【正文】 dendrimers）能催化 Cu 2＋ 氧化 Hfin的反應(yīng)使 Hfin ， 強(qiáng)度 劇烈 下降 ， 且 Cu 2+的含量與 Δ F值呈線性關(guān)系， 據(jù)此建立了 Cu(Bipy) 2+和 Hfin熒光法測(cè)定痕量銅的新方法。 實(shí)驗(yàn)方法 往 25mL熒光池中加入適量銅， HFin， ， αα聯(lián)吡啶， Na2HPO4，混勻 ， 水定容 ， 30℃ 、 15min后，加 Na2H2EDTA，同時(shí)作試劑空白， 于 λex/λem =488/514nm 處以熒光方式掃描試劑空白和試液的激發(fā)光譜和發(fā)射 光譜，測(cè)量試劑空白的 F0和試液的 F值，計(jì)算△ F =( F0－ F) . 熒光光譜 按實(shí)驗(yàn)方法掃描體系的熒光光譜于圖 12。 1 1’ mL and mL KH2PO4Na2HPO4 2 2’ mL HFin+ mL α,αdipyridyl + pg mL－ 1 Cu 2+ + mL KH2PO4Na2HPO4 3 3’ mL HFin + mL α,αdipyridyl + mL KH2PO4Na2HPO4 4 4’ mL HFin + pg mL－ 1 Cu 2+ + mL KH2PO4Na2HPO4 5 5’ mL HFin + mL KH2PO4Na2HPO4 6 6’ mL HFin+ mL + pg mL－ 1 Cu 2+ + mL KH2PO4Na2HPO4 7 7’ mL HFin + mL + mL KH2PO4Na2HPO4 圖 1表明， Hfin能發(fā)射強(qiáng)而穩(wěn)定的熒光，其 λex/λem= 487/514 nm， F = ；加入 Cu 2＋ 時(shí)， Hfin的 λex/λem幾乎不變， F = ，熒光強(qiáng)度下降，可能是隨著熒光團(tuán)被催化轉(zhuǎn)變?yōu)樵诜治霾ㄩL(zhǎng) 下的不發(fā)光的一類(lèi)物質(zhì)而熒光減少；當(dāng) αα聯(lián)吡啶存在時(shí)，能催化 Cu2＋ 氧化 Hfin的反應(yīng)，但 Δ F值（ ）很??；當(dāng) ，亦 能催化 Cu 2＋ 氧化 Hfin的反應(yīng)，其 Δ F值（ ）比 αα聯(lián) 吡啶大 ，說(shuō)明 αα聯(lián)吡啶有較強(qiáng)的催化作用（圖 1）； 圖 2 Hfin Cu 2＋ 體系熒光光譜 1 1’ mLHFin+ + mLα,αdipyridyl+ KH2PO4Na2HPO4 2 2’1 1’+ mL－ 1Cu 2+ 3 3’1 1’+ pg mL－ 1Cu 2+ 當(dāng) αα聯(lián)吡啶與 ， λex/λem= 489/514 nm， F = ， Δ F = ，分別比 αα聯(lián)吡啶、 Δ F大 、 （圖 2），可選擇 514 nm作為測(cè)定痕量銅的 工作波長(zhǎng) 。 要測(cè)定測(cè)定痕量銅，必須選擇最佳條件。 最佳條件 對(duì) pg/ml Cu 2＋ ，單因素優(yōu)選法 試劑濃度與用量 Reagents Concentrations and volumes Δ F Note fluorescein ( 104mol L－ 1) (mL) , , , , , , , , , , , , , , , , fluorescein 104 mol L－ 1 fluorescein DP (%) (mL) , , , , , , , , , , , , , , 375, mL DP % DP (mol L－ 1) (mL) , , , , , , , , , , , , , , , mol L－ 1 Table 1. Optimization of the concentration and volume of reagents 發(fā)光分子 對(duì) 12 pg/ml Cu 2＋ , 考查不同發(fā)光分子對(duì)體系的 Δ F值的影響， 結(jié)果表明，當(dāng)分別加入濃度均為 10－ 4 mol/L的丁基 、 、鈣黃綠素、曙紅和 HFin時(shí)，體系的 Δ F值依次為 、 、 、 、 ，因此選用 HFin作為體系的發(fā)光分 子 。 對(duì)于 12 pg/ml Cu 2＋ ,分別考察了增敏劑對(duì)體系 Δ F的影響 (圖 3 )。 A B C D E F G0130260390Δ F 當(dāng) ml 的 、 、 、 、 (mol/L) 和 α,α聯(lián)吡啶濃度分別為 、 、 、 、 (1‰) 時(shí)， Δ F值依次為 、 、 、 、 。實(shí)驗(yàn)表明： G的 Δ F 最高 ,故 選擇 1‰α α聯(lián)吡啶 （ G）為 增敏劑。 反應(yīng)溫度與時(shí)間 對(duì)于 12 pg/ml Cu 2＋ ，分別考察反應(yīng)溫度 與時(shí)間對(duì)體系 Δ F的影響（圖 4， 5），實(shí)驗(yàn)表明：當(dāng)反應(yīng)溫度與 時(shí)間分別為 30℃ 、 15min 時(shí) Δ F最大。 8 16 24 32095190285380t / min－ 1 21 28 35 42095190285380T/℃ Δ F Δ F 圖 4 反應(yīng)溫度對(duì)體系 Δ F的影響 圖 5 反應(yīng)時(shí)間對(duì)體系 ΔF的影響 反應(yīng)酸度 對(duì)于 12 pg/ml Cu 2＋ ，分別考察 pH = 、 、 、 ΔF的影響，其 ΔF依次為 、 、 、與 ， 故本實(shí)驗(yàn)選用 Na2HPO4（ pH = ）控制反應(yīng)酸度。 體系的穩(wěn)定性 在上述條件下， %EDTA，放置 30 、 40時(shí)，體系的 Δ F值分別為 、 、 、 ，表明體系在 40 min 內(nèi)是穩(wěn)定的。 工作曲線、線性范圍和檢出限 本方法與文獻(xiàn) [2]的方法比較見(jiàn)表 2。 LOD(以 3Sb/k算 ,n=11)， “ 3Sb/K”指試劑空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差的 3倍與共作曲線斜率的商 。 with some methods for the determination of silver Method Linear range (g mL－ 1) Regression equation working curve r RSD (%) LD (g mL－ 1) This method ( 10－ 12) (g mL－ 1) Δ F = + + pg mL－ 1 (n = 7) ( ( 10－ 12) ) (g mL－ 1 , n = 6) 10－ 14 Method of [2] 10－ 1110－ 9 Cu2+ (g mL－ 1) Δ F = C Cu2+ + 10－ 3 ΔF = Cu2+ + 10－ 2 ( 10－ 6 g mL－ 1 Cu2+), n = 8 10－ 1110－ 9 10－ 12 在上述最佳條件下 , 測(cè)定 12 pg/ml的 Cu 2+相對(duì)誤差為 177。 5℅時(shí)， 共存離子的允許倍數(shù)列于表 3，共存離子的允許倍數(shù)比文獻(xiàn) [2] （ +）大，表明本方法具有高的選擇性。 Coexistence ions This method (ppm) Ref. [2] (ppm) Coexistence ions This method (ppm) Ref. [2] (ppm) Na+ Ca2+ Sr2+ SO42－ NO3－ Ac－ Br– ClO4– Ni2+ Mn2+ Cd2+ Al3+ Sn2+ As(Ⅲ ) Ce4+ Mo(VI) S2－ I－ BrO3－ C2O42－ CN－ 72 72 72 72 72 60 great amount great amount great amount great amount great amount great amount great amount K+ Mg2+ Ba2+ Cl－ NH4+ F－ SiO32－ Zn2+ Cr3+ Pb2+ Sb3+ Fe3+ Hg2+ As(Ⅴ ) Bi3+ Cr(Ⅴ ) Co2+ SO32－ PO43－ SCN– 72 72 72 72 great amount great amount great amount great amount great amount great amount Table 3. The effects of the coexistence ions 樣品分析 取人發(fā)樣經(jīng)丙酮浸泡 30min，水洗凈，烘干。準(zhǔn)確稱(chēng)取 (177。 )，加 32ml 1∶ 8（ V/V）的 HClO4∶ HNO3混合液，低溫消化，升溫蒸干，加數(shù)滴 1∶ 1（ V/V）的 H2SO4，用水浸取殘液，轉(zhuǎn)入 500ml容量瓶?jī)?nèi)，用稀堿調(diào)節(jié) pH值為 ，定容至500ml。 取 ，再稀釋至 1000ml。 取茶葉 ，定容至 100ml。取 ml，再稀釋至 1000ml。 取適量體積溶液按實(shí)驗(yàn)方法 測(cè)定樣品中 Cu 2+含量。同時(shí)加入標(biāo)準(zhǔn)液做回收實(shí)驗(yàn) ,并與 AAS法進(jìn) 行比較，結(jié)果見(jiàn)表 4 Table3 Determination results of samples 樣品 測(cè)得值 加入量 測(cè)得總量 回收量 回收率 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 AAS 法 Sample Found Added Total Obtained Recovery RSD AAS (μg/g) (μg/g) (μg/g) (μg/g) (%) (%) (μg/g) 人發(fā) Hair 茶葉 Tea 熒光光度 法測(cè)定痕量銅 反應(yīng)機(jī)理 Hfin可發(fā)射強(qiáng)而穩(wěn)定的熒光，其 λex/λem= 487/514 nm， F = （圖 1曲線 5,5’）。 Hfin被氧化而轉(zhuǎn)變?yōu)樵诜治? 波長(zhǎng)下不發(fā)光的產(chǎn)物（ Hfin’）， Cu2+被還原成 Cu+，結(jié) 果導(dǎo)致 Hfin的強(qiáng)度下降，其 λex/λem = 477/514 nm ， F = , Δ F = （圖 1曲線 4,4’）； OCHO OC O O_ + C u 2+_C O OOCO O + C u + H F i n H F i n 39。 當(dāng) ， Hfin的其 λex/λem = 489/514 nm ， F = , ΔF= （圖 1曲線 7,7’），可能是 Hfin， 使 Hfin的熒光信號(hào)劇烈增強(qiáng)的緣故 [8]。 此時(shí)加入 Cu 2＋ ， 在 , － NH2基與 Cu 2＋ 以 CuN4 和 CuN2 兩種配位方式形成 [ 9 ]： ＋ Cu2＋ Cu 此類(lèi)絡(luò)合物能催化 Cu 2＋ 氧化 HFin反應(yīng) ,使其熒光信號(hào)降低。 當(dāng)在 α,α′ 聯(lián)吡啶共 存時(shí) ,體系 除了發(fā)生 催化 Cu 2＋ 氧化 HFin反應(yīng)外， α,α′ 聯(lián)吡啶將與 Cu 2+作用生成 Cu(Bipy) 2+ , Cu(Bipy)2 2+等絡(luò)合物 ， Cu(Bipy) 2+ , Cu(Bipy)2 2+絡(luò)合 物亦能催化 Cu 2＋ 氧化 HFin反應(yīng)。 此類(lèi)絡(luò)合物的催化活性隨著配位