實(shí)驗(yàn)13大學(xué)瓊脂糖凝膠電泳的原理和方法-資料下載頁
2025-05-10 01:06本頁面
【正文】 反轉(zhuǎn)換電場(periodic inversion of the electric field)亦能使大分子 DNA通過電泳分開。電泳系統(tǒng)是由一個(gè)水平式電泳槽和兩組獨(dú)立，彼此垂直的電極組成，一組電極負(fù)極為 N，正極為 S；另一組負(fù)極為 W，正極為 E 。 28 一塊正方形瓊脂糖凝膠板 (10cm 10cm或20cm 20cm)呈 45176。 置于中央，電場在 NS和 WE之間交替建立。電場交替改變的時(shí)間長短與欲分離的 DNA分子大小有關(guān)。電泳時(shí)， DNA分子處在連續(xù)間隔交替的電場中。首先向 S極移動(dòng)，然后改向 E極。在每次電場方向改變時(shí)，DNA分子就要有一定的時(shí)間松弛，改變形狀和遷移方向。只有當(dāng) DNA分子達(dá)到一定構(gòu)型后，才能繼續(xù)前進(jìn)。 DNA分子凈移動(dòng)方向與加樣線 (圖中點(diǎn)線 )垂直，使樣品中各組分沿同一泳道形成各自的區(qū)帶。交變脈沖電泳可有效分離數(shù)百萬 bp的大分子 DNA。較新式的儀器電極間的 角度和 29 按電泳法分： 按超速離心法分： 乳糜微粒 （ CM） 乳糜微粒 CM ( ) ?脂蛋白 （ ?位 ） 極低密度脂蛋白 VLDL(?) 前 ?脂蛋白 （ ?2位 ） 低密度脂蛋白 LDL (?) ?脂蛋白 （ ?1位） 高密度脂蛋白 HDL(?) 六、血漿脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 30 31 32 pH pI ， 各 種 脂蛋白均 帶負(fù)電 ， 電 泳 時(shí) 由 負(fù)極 到正 極 ； VLDL為圓 形 ， 受阻力小 ， LDL形 態(tài) 不規(guī)則 ， 受阻力大 ， 所以 VLDL跑 在前 。 加樣槽 β 前 β α CM LDL VLDL HDL — + 33 臨床應(yīng)用：高脂蛋白血癥的分型 CM β 前 β α 正常 Ⅰ 型 Ⅱa 型 Ⅱb 型 Ⅲ 型 Ⅳ 型 Ⅴ 型 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44
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