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正文內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)八聚炳烯凝膠電泳-資料下載頁

2025-05-01 01:20本頁面
  

【正文】 樣 (四 ). 電 泳 將電泳儀的正極負(fù)極與電泳槽連接( 方向切勿接錯 ),打開電泳儀開關(guān),開始時將電壓調(diào)至 150V,待樣品進(jìn)入分離膠時,將電壓調(diào)至 250V。當(dāng)藍(lán)色染料遷移至距離凝膠下端 2cm時,將電流調(diào)回到零,關(guān)閉電源。 電泳結(jié)束后,卸下膠框,用凝膠鏟小心撬開短玻璃板,(不要撬兩邊耳朵處,易斷裂) 在膠板一端切除一角作為標(biāo)記 ,用緩沖液沖洗膠板,將其移至大培養(yǎng)皿中染色。 ※ 剝膠時要小心 ,保持膠完好無損 ,染色要充分 . (五 ). 固定和染色 將凝膠放入固定染色液中,使染色液剛好沒過膠板,放到搖床上,緩慢搖動,染色 7 min。 (注意染色液要用漏斗回收) (六 ). 脫 色 放置搖床上,用脫色液漂洗數(shù)次,直至背景藍(lán)色褪去。 六 . 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 可在培養(yǎng)皿下襯一白紙,便于觀察,用手機(jī)拍下凝膠圖,打印出來附在實(shí)驗(yàn)報告后。 Acr和 Bis為神經(jīng)毒劑,對皮膚有刺激作用,操作應(yīng)戴手套。 玻璃板表面應(yīng)光滑潔凈,否則在電泳時會造成凝膠板與 玻璃板或硅橡膠條剝離,產(chǎn)生氣泡或滑膠;撥膠時凝膠板易斷 裂,為防止此現(xiàn)象,所用器材均應(yīng)嚴(yán)格的清洗。 安裝電泳槽和鑲有長、短玻璃板的硅橡膠框時,位置要端正, 均勻用力旋緊固定螺絲,以免緩沖液滲漏,但亦不可太用力 旋,易將玻板邊緣壓破。 制備濃縮膠時,注意梳齒邊緣不能有氣泡 ,膠凝聚后,注意拔梳 子要垂直小心拔出。 電泳時,電泳儀與電泳槽間正、負(fù)極不能接錯,以免樣品反方 向泳動。 注 意 事 項(xiàng)
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