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牛奶中酪蛋白的提取及含量測定-資料下載頁

2025-05-09 00:56本頁面
  

【正文】 一定體積 ( 使其測定值在標準曲線的直線范圍內 ) 。測定方法同上 , 根據所測定的 OD595nm值 , 在標準曲線上查出其相當于標準蛋白的量 , 從而計算出未知樣品的蛋白質濃度 (?g/mL)。 五 注意事項 ( 1) 如果測定要求很嚴格 , 可以在試劑加入后的 520 min內測定光吸收 , 因為再這段時間內顏色最穩(wěn)定 。 ( 2) 測定中 , 蛋白 染料復合物會有少部分吸附于比色杯壁上 , 但此復合物的吸附量可以忽略 。 測定完后可用乙醇將藍色的比色杯洗干凈 。 ( 3) 一些陽離子如 K+、 Na+、 Mg2+、 乙醇等物質對測定無影響 , 而大量的去污劑如 SDS等會嚴重干擾測定 。 六 722型分光光度計使用方法 1.調整 ( 1) 將靈敏度旋鈕調至“ 1”檔(放大倍率最?。U{波長調節(jié)器至所需波長。 ( 2) 開啟電源開關,指示燈亮,選擇開關置于“ T”,調節(jié)透光率[100%T]旋鈕使數(shù)字顯示 []左右,預熱 20min . 2.校正 ( 1)打開吸收池暗室蓋(光門自動關閉),調節(jié) [0% T]旋鈕,使數(shù)字顯示為“ ”,蓋上吸收池蓋,將參比溶液置于光路,使光電管受光,調節(jié)透光率 [100%T]旋鈕,使數(shù)學顯示為“ ”。 ( 2)如果顯示不到“ 100”,則可適當增加電流放大器靈敏度檔數(shù),但應盡可能使用低檔數(shù),這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。當改變靈敏度 后必須重新校正“ 0”和“ 100”。 ( 3)按( 1)連續(xù)幾次調整“ ”和“ ”后,如將選擇開關置于“ A”,調節(jié)吸光度調零旋鈕,使數(shù)字顯示為“ .000”,即可進行下面吸光度 A的測量;如將選擇開關置于“ C”,將標準溶液推入光路,調節(jié)濃度旋鈕,使得數(shù)字顯示值為已知標準溶液濃度數(shù)值,即可進行下面 濃度 c的測量。 3.測定 (1) 吸光度A的測量。將要測A的試樣溶液推入光路,顯示值即為待測樣品的吸光度值A。 (2) 濃度 c的測量。將要測 c試樣溶液推入光路,即可讀出待測樣品的濃度值 c。 4.結束 測量完畢,關閉電源,將各調節(jié)旋鈕恢復至初始位置。取出吸收池洗凈,晾干,存于專用盒內。 注意事項 : ( 1) 儀器接地要良好,否則顯示數(shù)字不穩(wěn)定。 ( 2) 如果大幅度改變測試波長時,在調整“ ”和“ 100”后稍等片刻(因光能量變化急劇,光電管受光后響應緩慢,需一段光響應平衡時間),當穩(wěn)定后,重新調整“ ”和“ 100”即可工作。 ( 3) 儀器左側下角有一只干燥劑筒,應保持其干燥,發(fā)現(xiàn)干燥劑變色應立即更新或烘干后再用。 ( 4) 當儀器停止工作時,關掉電源,電源開關需同時切斷,并罩好儀器 七 思考題 與其它測定蛋白質濃度的方法相比,考馬斯亮藍染色法測定有何優(yōu)點?
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