【導(dǎo)讀】生理、病理和生態(tài)等方面的基礎(chǔ)理論和應(yīng)用技術(shù)研究明顯滯后于產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。由于缺乏充分的科技支。肝臟和誘發(fā)肝臟病變?yōu)樘卣鞯募膊∥：ι醮?。因?yàn)楦闻K是魚體內(nèi)最主要的代謝器官，其損傷或者病變。虐，嚴(yán)重威脅著集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。肪肝，尤以營(yíng)養(yǎng)性脂肪肝危害最突出，已經(jīng)引起水產(chǎn)科技工作者和養(yǎng)殖者的廣泛關(guān)注[1]。肝臟上有大量脂肪，膽變大，膽汁變黑或萎縮。營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的配合飼料而生長(zhǎng)旺盛的情況下。病情較輕時(shí)一般魚體沒(méi)有明顯癥狀，魚體色、體形等無(wú)明。應(yīng)呆滯，呼吸困難，甚至昏迷翻轉(zhuǎn)，不久便死亡。變主要特征為肝貧血，肝細(xì)胞脂肪浸潤(rùn)、細(xì)胞肥大、細(xì)胞質(zhì)充滿脂肪，細(xì)胞核被擠偏于一端。魚類的肝臟脂肪主要來(lái)自對(duì)飼料中脂肪的直接吸收以及飼料中過(guò)量蛋白質(zhì)和糖類的轉(zhuǎn)化合成。要原料，膽堿不足，脂肪在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)和氧化受阻，結(jié)果導(dǎo)致脂肪在肝臟內(nèi)大量沉積，發(fā)生脂肪肝。

　　

【正文】 待飼料原料、重點(diǎn)是蛋白質(zhì)原料的安全質(zhì)量。只有在排除飼料原料摻假、尤其是蛋白質(zhì)原料摻入了有毒有害物質(zhì)后，我們的飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià) 值才能正常發(fā)揮。而對(duì)于飼料企業(yè)而言，也只有在保障飼料安全、在養(yǎng)殖生產(chǎn)中不發(fā)生質(zhì)量安全事故、不造成經(jīng)濟(jì)損失的前提下，再最求養(yǎng)殖魚類的生長(zhǎng)速度、飼料效率，并獲得經(jīng)濟(jì)效益，簡(jiǎn)單講就是在不因飼料質(zhì)量事故而賠錢的前提下，才可能使企業(yè)賺錢。從這種意義分析，蛋白質(zhì)原料的安全質(zhì)量較其營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量更為重要。 一、在蛋白質(zhì)原料中使用的 NPN 主要類型和特點(diǎn) 在早期的 NPN 摻假物中主要是尿素、氯化銨、碳酸氨等含氮化學(xué)肥料。而近年來(lái)，一是更高氮含量的化工產(chǎn)品出現(xiàn)，二是要逃避飼料原料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)的監(jiān)控，一些新的高含氮化工原料進(jìn)入飼料蛋白質(zhì) 原料中。 據(jù)不同渠道來(lái)源的資料和信息表明，在蛋白質(zhì)飼料中加入高含氮化工原料的基本要求包括以下幾點(diǎn)： ① 氮含量高，其折算的粗蛋白質(zhì)含量要在 100%以上，愈高愈好； ② 物理性狀為白色無(wú)味，便于加入各種原料之中； ③ 要能夠逃避水溶總氮、揮發(fā)性鹽基氮、真蛋白、離體蛋白質(zhì)消化率、顯微鏡分析等檢測(cè)技術(shù)的監(jiān)控； ④ 易于購(gòu)買、易于生產(chǎn)，成本很低。符合這些要求的化學(xué)物質(zhì)較多，主要有以下幾種。 三聚氰胺 工業(yè)上目前多數(shù)采用的工藝是用尿素直接在高溫高壓下制得，成本低。三聚氰胺主要作為有機(jī)合成單體 ,與甲醛縮合制成三聚氰胺 甲醛樹脂 (即 蜜胺樹脂 ),是模塑料、涂料、粘合劑、建材層壓板、造紙、紡織、皮革及醫(yī)藥等工業(yè)的重要化工原料之一。 57 三聚氰胺又稱蜜胺 ,分子式為 C3H6N6,結(jié)構(gòu)式見圖。主要物理性質(zhì)為熔點(diǎn) 345℃ (分解 ), 在常壓下，當(dāng)溫度超過(guò) 150℃ 表現(xiàn)出升華性。 密度 ㎝ 3 (16℃ )。 在有機(jī)溶劑中的溶解性為：能溶于甘油、吡啶、熱乙二醇、乙酸、一乙醇胺、三乙醇胺、甲醛。微溶于乙醇、丙酮。不溶于乙醚。 化學(xué)性質(zhì)為，三聚氰胺呈弱堿性，能夠與各種酸分應(yīng)生成三聚氰胺鹽。在強(qiáng)酸和強(qiáng)堿液中，三聚氰胺發(fā)生水解，胺基逐步被羥基取代，生成三聚氰 胺二酰胺，三聚氰胺一酰胺和三聚氰酸。 在飼料原料中使用的 三聚氰胺產(chǎn)品是以生物蛋白質(zhì)精等產(chǎn)品名稱出現(xiàn)的，其特征為： 為黃色、白色、灰褐色等粉狀物，細(xì)度 50 目 60 目。有流動(dòng)性、無(wú)味、 抗碘、抗鏡檢、耐氨氮反應(yīng)、耐水洗化驗(yàn)、耐高溫、新鮮度 ≥90%。 ① 含蛋白質(zhì) 160%，水溶解度 70%，水份 8% ； ② 含蛋白質(zhì) 300%，水融解度 80%，水份 8% 。在魚粉、肉松粉、豆粕、菜粕、濃縮料等各種飼料原料每 100 公斤加入 “生物蛋白精 ”1kg可提高蛋白質(zhì) %%。 根據(jù)上述產(chǎn)品表述就可以發(fā)現(xiàn)，目前的顯微鏡檢驗(yàn)、氨氮反 應(yīng)、水溶總氮測(cè)定的常規(guī)方法對(duì)這類產(chǎn)品是難以檢測(cè)出來(lái)的。 三聚氰胺對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物的主要危害主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。 ① 使飼料原料、配合飼料的蛋白質(zhì)出現(xiàn)不真實(shí)的 “虛高 ”現(xiàn)象，導(dǎo)致粗蛋白在飼料原料、配合飼料中已經(jīng)達(dá)到設(shè)計(jì)的要求，而實(shí)際上蛋白質(zhì)水平并沒(méi)有達(dá)到要求，最后導(dǎo)致養(yǎng)殖效果難以達(dá)到配方設(shè)計(jì)的要求； ② 對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物產(chǎn)生嚴(yán)重的毒性作用。三聚氰胺對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物、人體的毒性主要為腎臟毒性作用，對(duì)腎臟有非常大的傷害，并由此對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物整體生理機(jī)能造成嚴(yán)重影響，養(yǎng)殖魚體出現(xiàn)很多怪病，如腎臟腫瘤、表皮和內(nèi)臟出血（與喹乙醇的癥狀類似）、體色 白化等。 最初將三聚氰胺摻假到飼料蛋白質(zhì)原料中的情況公開報(bào)道的是出口到美國(guó)的 2種飼料原料，這 2種原料在寵物飼料中使用，最后導(dǎo)致寵物死亡。出口到美國(guó)的小麥蛋白粉，最終導(dǎo)致了美國(guó)近三個(gè)月來(lái)數(shù)十只寵物貓、狗死亡，并使上千只寵物患上腎病。 FDA 的調(diào)查最終確證，導(dǎo)致寵物死亡的罪魁禍?zhǔn)资沁@些小麥蛋白粉、大米蛋白濃縮物里含有的一種名為三聚氰胺的化學(xué)物質(zhì)。 磷酸脲 磷酸脲分子式為 CO(NH2)2H3PO4，性質(zhì)為白色斜方晶體。熔點(diǎn) ℃ 。含氮 ％，％。 20℃ 時(shí)水中的溶解度為 。水溶液呈酸性。 30℃ 時(shí)的臨界相對(duì)濕度為 53％。不溶于醚類、甲苯、四氯化碳和二噁烷。 典型制造方法為尿素與熱法磷酸或濕法磷酸 (54％ P2O5)反應(yīng)，料液經(jīng)冷卻結(jié)晶，離心分離 (水 )而制成。也可用含 50％五氧化二磷的濕法磷酸和 60％ (質(zhì)量 )的尿素溶液進(jìn)行反應(yīng)制得。飼料級(jí)產(chǎn)品，可進(jìn)行二次結(jié)晶提純。用作反芻類動(dòng)物的飼料添加劑，紡織品、木材、紙張的阻燃劑；食品防腐保鮮劑；金屬表面的除垢防銹劑；在 120～ 130℃ 下熱解成尿素多磷酸銨，配制含聚磷酸銨的液體復(fù)合肥料。 磷酸脲可以作為反芻動(dòng)物的飼料添加劑 ,可代替 部分豆餅、魚粉等動(dòng)植物蛋白。但是，多數(shù)魚類沒(méi)有胃，魚類長(zhǎng)期生活在水體中，其腸道微生物區(qū)系沒(méi)有反芻動(dòng)物的復(fù)雜，不能直接利用、也難以依 58 賴腸道微生物轉(zhuǎn)化后再利用 NPN。因此，魚雷是不能利用磷酸脲等在反芻動(dòng)物可以利用的 NPN 物質(zhì)。 羥甲基羧基類 NPN 產(chǎn)品 尿素與甲醛反應(yīng)生成羥甲基脲，與泥炭、褐煤反應(yīng)生成硝基腐脲，與脂肪酸反應(yīng)生成脂肪酸脲。 羥甲基羧基氮是由有機(jī)醛基團(tuán)與氮、磷營(yíng)養(yǎng)基經(jīng)生化反應(yīng)，將醛基部分氧化成羧基而合成。這類產(chǎn)品的外觀有白色、灰色或黃色粉末 ；總氮含量（ N%）胃 34177。2%或 43177。2%，蛋白含量 200%－ 280% ；酸堿度（ PH值）： － 或 － 12 。 縮二脲 縮二脲又稱雙縮脲或氨基甲酰脲，由尿素縮合而得。縮二脲是無(wú)味的非蛋白氮化物，在反芻動(dòng)物通過(guò)動(dòng)物瘤胃中的微生物合成菌體蛋白，以滿足動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的需要。 在高溫下，兩分子尿素脫去一分子水縮合成一分子縮二脲，縮二脲比尿素較難溶解，縮二脲含有%的氮。 二脲基產(chǎn)品以氮換算的粗蛋白含量 275%以上，全溶于水，無(wú)灰分，用濾紙過(guò)濾后，濾紙上無(wú)殘留物、無(wú)蛋白含量。熔點(diǎn) 190℃ （分解），相對(duì)密度 （ 5/4℃ ）。水中結(jié)晶體含 4分子結(jié) 晶水，在約 110℃ 時(shí)失水。易溶于醇，極微溶于醚。顏色分為白色、黃色兩種。在棉粕、豆粕、花生粕、菜粕、玉米蛋白粉、豌豆蛋白粉、大米蛋白粉、小麥蛋白粉、魚粉、血粉、肉松粉等飼料原料中均有可能摻假。 磷寶蛋白精 魚粉、肉松粉、豆粕、菜粕、濃縮料等各種飼料原料每 100 公斤加入 “磷寶蛋白精 ”1kg 可提高蛋白質(zhì) %%。 產(chǎn)品介紹為為黃色、白色、灰褐色等粉狀物，細(xì)度 50目 60目。有流動(dòng)性、無(wú)味、抗碘、抗鏡檢、耐氨氮反應(yīng)、耐水洗化驗(yàn)、耐高溫、新鮮度 ≥90%。 生物蛋白精 (蛋白粉 ) 在企業(yè)宣傳的產(chǎn) 品介紹為為 3 大類。 ① 普通型 ： 蛋白含量 180%、 200% 、 260% 。 ② 抗化驗(yàn)型（不含脲酶、抗氨氮反應(yīng)）：蛋白含量150% 、 240%、 260%、 330% 。 ③ 抗水洗型（不含脲酶、抗水洗化驗(yàn)）： 蛋白含量180%、 195% 。 異丁叉二脲 學(xué)名亞異丁基二脲 ,結(jié)構(gòu)式為 CHCH3CH3CHNHCNH2ONHCNH2O。簡(jiǎn)稱 IBDU。尿素與異丁醛反應(yīng)生成異丁基二脲（ DUIB），含氮 32． 18 ％，蛋白質(zhì)當(dāng)量為 201％，其特點(diǎn)是氨的釋放速度較慢，安全性好，利用率高。異丁叉二脲具有在水中溶解度小、水解速 度慢的特點(diǎn)。 作為飼料用異丁叉二脲，每 kg相當(dāng)于 ，可代替 。 二、在蛋白飼料中摻假 NPN 對(duì)養(yǎng)殖魚類的危害 59 關(guān)于三聚氰胺的危害 資料表明，出口到美國(guó)的小麥蛋白粉、大米蛋白濃縮物，最終導(dǎo)致了美國(guó)近三個(gè)里來(lái)數(shù)十只寵物貓、狗死亡，并使上千只寵物患上腎病。美國(guó) FDA 的調(diào)查已最終確證，導(dǎo)致寵物死亡的有毒物質(zhì)是這些小麥蛋白粉里含有的一種名為三聚氰胺的化學(xué)物質(zhì)。 FDA 在對(duì)連續(xù)死亡貓、狗的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，數(shù)個(gè)知名品牌寵物飼料的主要原料小麥蛋白粉和大米蛋白濃縮物中，含有化學(xué)物質(zhì)三聚氰胺。這種物質(zhì) 對(duì)人體和動(dòng)物的危害尚未被完全認(rèn)知，但已知的是， “如長(zhǎng)期和反復(fù)接觸作用，該物質(zhì)可能對(duì)腎發(fā)生作用 ”。 由國(guó)際化學(xué)品安全規(guī)劃署和歐洲聯(lián)盟委員會(huì)合編的《國(guó)際化學(xué)品安全手冊(cè)》（第三卷），對(duì)三聚氰胺則有如下描述： “長(zhǎng)期或反復(fù)接觸作用：該物質(zhì)可能對(duì)腎發(fā)生作用 ”。 在高溫下，三聚氰胺可能分解產(chǎn)生氰化物（有較大毒性），在進(jìn)行膨化飼料加工時(shí)，是否會(huì)分解產(chǎn)生氰化物倒是值得研究的問(wèn)題。 養(yǎng)殖魚體可能出現(xiàn)的問(wèn)題 養(yǎng)殖魚體可能出現(xiàn)的問(wèn)題包括以下幾個(gè)方面： ① 對(duì)魚體主要內(nèi)臟器官造成傷害，出現(xiàn)器質(zhì)性病態(tài)反應(yīng)，如肝胰臟、腎臟、脾臟 等發(fā)生腫大、出血等現(xiàn)象。由于內(nèi)臟主要器官組織的傷害，可能導(dǎo)致魚體整體生理機(jī)能的傷害，使魚體整體免疫、防御能力出現(xiàn)嚴(yán)重的病理反應(yīng)，生長(zhǎng)速度下降，死亡率增高等綜合性反應(yīng)。 ② 體色發(fā)生變化，目前在多數(shù)無(wú)鱗魚如斑點(diǎn)叉尾回、黃桑魚、胡子鯰，有鱗魚如武昌魚、青魚等，體色出現(xiàn)顯著的 “白化 ”現(xiàn)象，嚴(yán)重的肌肉色澤也要發(fā)生變化。 ③ 消化道、鰓、鰭條基部、表皮等發(fā)生嚴(yán)重的出血現(xiàn)象，可能是氨氮過(guò)量造成。 ④ 養(yǎng)殖魚類生產(chǎn)性能嚴(yán)重受到影響，如部分企業(yè)出現(xiàn)使用了魚粉的飼料的養(yǎng)殖效果還不如不用魚粉的飼料的養(yǎng)殖效果，高蛋白、高價(jià)格的飼料還不如低蛋 白、低價(jià)格飼料的養(yǎng)殖效果等難以理解的奇怪現(xiàn)象，極有可能是魚粉等高蛋白原料有摻假所造成。 三、蛋白質(zhì)飼料摻假物的質(zhì)量鑒定 在蛋白質(zhì)原料中除了摻入 NPN 類化工產(chǎn)品外，還有摻入部分水解羽毛粉、膨化羽毛粉、膨化皮革粉、豬踢角粉、蛋白胨等物質(zhì)。因此，蛋白質(zhì)飼料原料摻假物的質(zhì)量鑒定應(yīng)該要全面進(jìn)行。 氨基酸分析方法 分析氨基酸應(yīng)該是最佳分析方法，但是，目前有些摻假蛋白質(zhì)飼料、尤其是魚粉的氨基酸指標(biāo)與真魚粉的氨基酸組成幾乎沒(méi)有什么差異。出現(xiàn)這種情況的原因有幾種可能性： ① 氨基酸分析報(bào)告有人為干擾，這類案例較多，建議將樣品 分別送高等院校、研究所分析，或有條件的企業(yè)自己分析，對(duì)不同分析單位的分析結(jié)果進(jìn)行比較，就可以知道那些單位的氨基酸分析報(bào)告可能存在人為干擾，以后就不再送這些單位進(jìn)行檢驗(yàn)和分析。 ② 魚粉等蛋白質(zhì)原料已經(jīng)是經(jīng)過(guò)專家配方的產(chǎn)品，這些配方魚粉的氨基酸組成的確與真魚粉相差不大。 對(duì)于魚粉等蛋白質(zhì)原料氨基酸分析結(jié)果的分析和判定，可以從氨基酸總量、氨基酸平衡 性進(jìn) 行分析。對(duì)于純化的蛋白質(zhì)，其水解為氨基酸后，氨基酸總量應(yīng)該大于蛋白質(zhì)的總量，因?yàn)樵谒膺^(guò)程中氨基酸殘基結(jié)合了水分子成為游離的氨基酸。但是，在進(jìn)行氨基酸分析時(shí)，一般是采 用酸水解的方法 60 對(duì)蛋白質(zhì)水解后再進(jìn)行分析的，而在水解過(guò)程中部分氨基酸如色氨酸、部分苯丙氨酸等被破壞，使氨基酸總量下降。因此，對(duì)于一般的魚粉和其他蛋白質(zhì)原料的氨基酸分析結(jié)果，在進(jìn)行氨基酸總量判定時(shí)，至少要求氨基酸總量為蛋白質(zhì)量的 90%以上，能夠達(dá)到 95%以上為最好。 但是，對(duì)于摻入不同處理羽毛粉、豬踢角粉、血粉等蛋白質(zhì)飼料，單從氨基酸總量 和氨基酸平衡性是難以進(jìn)行分析和判定的，對(duì)于摻入 NPN 類高氮化工原料的可以采用此方法進(jìn)行分析和判定。 改進(jìn)離體消化率測(cè)定方法 常規(guī)離體率、國(guó)標(biāo)中消化率測(cè)定方法是以經(jīng)過(guò)酶水解后 進(jìn)行過(guò)濾、或離心，測(cè)定殘?jiān)械牡鞍踪|(zhì)含量，再通過(guò)消化前、后樣品中蛋白質(zhì)量的差異計(jì)算消化率，這類方法是將消化后溶解于消化液中的所有含氮物質(zhì)計(jì)算為了已經(jīng)被效化的物質(zhì)的量，如果在蛋白質(zhì)飼料中摻假的 NPN 能夠溶解或部分溶解于水中時(shí)，測(cè)定的消化率結(jié)果就會(huì)很高，高于真實(shí)結(jié)果。這對(duì)摻入不同處理羽毛粉、豬踢角粉、血粉等蛋白質(zhì)飼料可以采用這種方法進(jìn)行分析和判定，但是，對(duì)于摻入水溶性 NPN 的蛋白質(zhì)原料就難以判定了，其離體消化率會(huì)很高。 對(duì)此，建議在進(jìn)行常規(guī)離體消化率測(cè)定時(shí)，對(duì)消化液進(jìn)行氨基酸分析，計(jì)算消化液中氨基酸種類、氨基酸 總量，以消化液氨基酸總量計(jì)算樣品經(jīng)過(guò)消化后氨基酸生產(chǎn)率?？梢詫?biāo)準(zhǔn)魚粉與待檢測(cè)、魚粉同時(shí)進(jìn)行離體消化，并進(jìn)行相對(duì)比較，如果與標(biāo)準(zhǔn)樣品差異太大，就可以基本判定摻入了水溶性NPN。 水溶總氮測(cè)定 將蛋白質(zhì)原料樣品直接用水溶解，觀察水溶液色澤、氣味的同時(shí)，測(cè)定水溶液中含氮成分量進(jìn)行分析和判定。 取樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品各 1 克左右，加入 10 毫升蒸餾水，攪拌 5 分鐘， 3000 轉(zhuǎn) /分離心 15 分鐘，或定量濾紙過(guò)濾，去上清液或?yàn)V液 5毫升進(jìn)行凱氏定氮分析，測(cè)定總氮量，并與標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行比較分析，或參照測(cè)定樣品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中水溶總氮含量 進(jìn)行比較分析，如果過(guò)高就有可能摻入水溶性 NPN。 顯微鏡分析 顯微鏡分析對(duì) 于摻入不同處理過(guò)的羽毛粉的蛋白質(zhì)原料可以進(jìn)行很有效的鑒定和分析。 對(duì)于原料中摻假脲醛聚合物也可以進(jìn)行顯微鏡分析，而其他 NPN 不宜采用此方法。鏡檢下，脲醛聚合物為乳黃色不規(guī)則球狀物，用探針輕壓后會(huì)散開并呈晶體狀，且不溶于水。例如，在 20 倍顯微鏡下鏡檢時(shí)，玉米蛋白粉中的脲醛顏色較黃。魚粉中的脲醛顏色為淡黃色，為了便于撿出，可用乙醚或四氯化碳先脫脂，脫脂后的魚粉中的脲醛顏色變淡。 （原文發(fā)表在《飼料廣角》 2020 年第 17 期） 61 飼 料中補(bǔ)充晶體或微囊氨基酸對(duì)鯉魚 魚種生長(zhǎng)性能的影響 羅運(yùn)仙 1，冷向軍 1，宋宏斌 2，趙永志 2 1 上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院； 2 廣東海納川集團(tuán)協(xié)力同創(chuàng)飼料有限公司 隨著魚粉、豆粕等優(yōu)質(zhì)動(dòng)植物蛋白源的供應(yīng)緊張和價(jià)格上揚(yáng)，有關(guān)廉價(jià)植物蛋白源的研究和應(yīng)用也逐漸增加，與優(yōu)質(zhì)動(dòng)植物蛋白源相比，廉價(jià)植物蛋白源通常表現(xiàn)為某些必需氨基酸缺乏或不足，如賴氨酸、蛋氨酸等，因而向飼料中添加晶體氨基酸成為解決這一問(wèn)題的有效途徑。但是在水產(chǎn)飼料中添加晶體氨基酸的作用效果，目前尚無(wú)定論，研究和生產(chǎn)中對(duì)氨基酸的使用也存在許多模糊認(rèn)識(shí) 。總體來(lái)看，氨基酸在水產(chǎn)飼料中的作用效