【導(dǎo)讀】臨床治療及預(yù)后和流行病學(xué)的調(diào)查。培養(yǎng)管中的熒光顯示劑將隨著管內(nèi)氧氣濃度的變化而發(fā)生反應(yīng)。用，管內(nèi)熒光指示劑將在特定光源的激活下釋放熒光。BACTECMGIT960熒光強(qiáng)度記憶探測。器將每隔60min連續(xù)測定培養(yǎng)管內(nèi)熒光強(qiáng)度，從而判斷管內(nèi)分支桿菌生長情況。標(biāo)本儲(chǔ)存和運(yùn)輸：室溫放置，室溫運(yùn)輸并立即送檢。使用滅菌器皿盛放標(biāo)本，不加任何防腐劑。試劑名稱：Middlebrook7H9培養(yǎng)肉湯，OADC營養(yǎng)添加劑，抑菌劑PANTA。見儀器操作維護(hù)規(guī)程：BD960結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)儀操作維護(hù)規(guī)程；檢驗(yàn)樣本中是否含有抗酸桿菌，為臨床提供診斷依據(jù)。色，但一經(jīng)著色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脫色。利用這特性并以增強(qiáng)的染色液予。病人標(biāo)本須密封運(yùn)送以避免污染環(huán)。加亞甲基藍(lán)溶液染色30秒，水洗，干燥。參加我科質(zhì)量管理組的質(zhì)量控制活動(dòng)。麻風(fēng)菌可能對檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。繁殖的能力，細(xì)菌成分與其代謝產(chǎn)物引起免疫反應(yīng)（Ⅳ型）導(dǎo)致一系列組織學(xué)上的意義。

　　

【正文】 100ul，如手指有凍瘡，則主張采耳垂血。 3. 標(biāo)本儲(chǔ)存： 2 小時(shí)內(nèi)完 成實(shí)驗(yàn)，室溫放置下不超過 8 小時(shí)， 4℃ 8℃ 保存不 超過48 小時(shí)。 4. 標(biāo)本運(yùn)輸： 室溫運(yùn)輸 5. 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)： 細(xì)菌污染、溶血標(biāo)本不能作測定 6. 試劑 試劑名稱： ABO 血型檢測試劑 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK03 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定 生效日期： 20210808 第 33 頁 共 49 頁 試劑生產(chǎn)廠家： 上海華泰 生物工程有限公司 試劑組成 試劑 1：抗 A 分型試劑（藍(lán)色），效價(jià) 1： 128， 2℃ 8℃ 避光保存，室溫放置不宜過久。 試劑 2：抗 B 分型試劑（黃色），效價(jià) 1： 128， 2℃ 8℃ 避光保存，室溫放置不宜過久。 試劑 3： 5％ A、 B 及 O 型紅細(xì)胞鹽水懸液，自制。配制方法：分別采取已知A、 B、 O 三種 血型的紅細(xì)胞，經(jīng)鹽水洗滌 3 次，以壓積紅細(xì)胞配成不同濃度的紅細(xì)胞懸液。 紅細(xì)胞懸液的配制 懸液濃度（％） 壓積紅細(xì)胞（滴） 鹽水（滴） 2 5 10 20 1 1 1 1 2ml（ 40） （ 16） （ 8） （ 4） 為了防止紅細(xì)胞懸液敏感性不一致，可隨機(jī)采取 3 個(gè)或以上的健康成人血液，按 A、 B、 O 型分別混合后，按上法制備。 7. 操作步驟 玻片法 取清潔玻片 1 張用蠟筆劃出小格，并注明 A、 B 字樣。將抗 A 試劑、抗 B 試劑各一滴分別滴于玻片上 A、 B 處。分別取等體積待檢 血樣（ 5％ 10％紅細(xì)胞懸液或全血）于抗 A 試劑和抗 B 試劑。 另取潔凈玻片 1 張，用蠟筆劃 出小 格，標(biāo)明 A 細(xì)胞、 B 細(xì)胞和 O 細(xì)胞，用滴管各加受檢者血清 1 滴，再分別用滴管滴加 A、 B 和 O 型試劑紅細(xì)胞懸液1 滴。 不停的搖動(dòng)玻片 將 分型試劑與待檢血樣調(diào)勻，并觀察血型凝集反應(yīng) 情況 。 并用低倍鏡觀察結(jié)果。 試管法 取潔凈小試管 2 支，分別標(biāo)上 A、 B 字樣，用滴管分別向 A 管滴加抗 A 分型試劑 1 滴。向 B 管滴加抗 B 分型試劑 1 滴。向 A、 B 管各滴加待檢血樣的5％紅細(xì)胞懸液各 1 滴，混合。 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK03 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定 生效日期： 20210808 第 34 頁 共 49 頁 另取潔 凈小試管 3 支，分別標(biāo)明 A、 B 和 O 細(xì)胞。用滴管分別加入受檢者血清 1 滴于試管底部，再分別以滴管加入 A、 B 和 O 型 5％紅細(xì)胞懸液 1 滴，混合。 搖勻后以 1000 轉(zhuǎn) /分的速度離心 1 分鐘判定結(jié)果。將試管輕輕 搖動(dòng)，使沉于管底的紅細(xì)胞浮起，先以肉眼觀察有無凝集（或溶血）現(xiàn)象。如肉眼不見凝集，應(yīng)將反應(yīng)物倒于玻片上，再以低倍鏡檢查。 8. 結(jié)果判斷 觀察結(jié)果時(shí)既要看有無凝集，更要注意凝集強(qiáng)度，此有助于 A、 B 亞型、類 B 或 cisAB 的發(fā)現(xiàn)。 凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)： 4＋＝紅細(xì)胞凝集成一大塊，血清清晰透明。 3＋＝紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊，血清尚清晰。 2＋＝紅細(xì)胞凝塊分散成許多小塊，見到游離紅細(xì)胞。 1＋＝肉眼可見大顆粒，周圍有較多游離紅細(xì)胞。 177。= 鏡下可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細(xì)胞。 MF＝混合凝集外觀是指鏡下可見少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而絕大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布。 －表示陰性，鏡下未見凝集，紅細(xì)胞均勻分布。 按下表報(bào)告受檢者紅細(xì)胞 ABO 血型 ABO 血型正反定型結(jié)果 分型血清＋受檢者紅細(xì)胞 受檢者 受檢者血清＋試劑紅細(xì)胞 抗－ A ＋ — — ＋ 抗－ B — ＋ — ＋ 血型 A B O AB A 細(xì)胞 — ＋ ＋ — B 細(xì)胞 ＋ — ＋ — O 細(xì)胞 — — — — 9. 臨床意義 ： 輸血、器官移植與親子鑒定 10. 操作性能 ： 快速簡便、特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好。 11 超出范圍結(jié)果處理 紅細(xì)胞自凝：冷凝集系增高是最為常見原因。應(yīng)用 37℃ 40℃ 的生理鹽水洗滌紅細(xì)胞可去除紅細(xì)胞表面附著的導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集的冷集素。 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK03 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定 生效日期： 20210808 第 35 頁 共 49 頁 正反定型結(jié)果不一致原因 分型血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)。如抗 — A 血清效價(jià)不高，可將 A 亞型誤定為 O 型， AB 型誤定為 B 型。 紅細(xì)胞懸液過濃或 過淡，抗原抗體比例則不適當(dāng)，使反應(yīng)不明顯，誤判為陰性反應(yīng)。 受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過少（如亞型）或抗原性減弱（見于白血病或惡性腫瘤）以及 B 類或 cisAB 等。 受檢者血清中蛋白紊亂（高球蛋白血癥），或?qū)嶒?yàn)時(shí)溫度過高，常引起紅細(xì)胞呈緡錢狀排列。 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗 — A 和抗 — B 抗體，如丙種球蛋白缺乏癥。 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集，部分溶血時(shí)，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體。 由細(xì)菌污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定 型不符的原因。 血清中有意外抗體，如自身抗 — I，常引起干擾。 老年人血清中抗體水平大幅度下降。 正反定型結(jié)果不一致的解決方法： 另從受檢者采取 1 份新鮮血液標(biāo)本，這樣可以糾正因污染或搞錯(cuò)樣本造成的不符合。 將紅細(xì)胞洗滌數(shù)次，配成 2％鹽水細(xì)胞懸液，用抗 — A、抗 — B、抗 — AI，抗 — A＋ B 及抗 — H 做試驗(yàn)可以得到其它有用的信息。 對受檢紅細(xì)胞作直接抗球蛋白試驗(yàn)，如結(jié)果呈陽性，表示紅細(xì)胞已被抗體致敏。 用 A A B、 O 紅細(xì) 胞從自身紅細(xì)胞檢查受檢血清。如果懷疑是抗 — I，用 O 型（或 ABO 相合的）臍血紅細(xì)胞檢查。 如果試驗(yàn)結(jié)果未見凝集，應(yīng)將細(xì)胞及血清試驗(yàn)至少在室溫和 4℃ 放置30min，用顯微鏡檢查核實(shí)。 如疑為 A 抗原或 B 抗原減弱，則可將受檢紅細(xì)胞與抗 A 或抗 — B 血清作吸收及放散試驗(yàn)以及受檢者唾液作 A、 B、 H 血型物質(zhì)測定。后者只對 80％HAB 分泌型的人有用。 如試驗(yàn)結(jié)果紅細(xì)胞呈緡錢狀排列，加等滲鹽水 1 滴，混合。往往可使緡錢現(xiàn)象消失。應(yīng)注意不應(yīng)先加鹽水 1 滴于受檢者血清中而后和紅細(xì)胞作試驗(yàn)，以免使 血清中抗體被稀釋。 如受檢者為 A 型血而疑為有類 B 抗原時(shí)，可用下列方法進(jìn)行鑒別： ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK03 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 ABO 血型鑒定 生效日期： 20210808 第 36 頁 共 49 頁 觀察細(xì)胞與抗 — A 及抗 B 的凝集強(qiáng)度，與抗 A 的反應(yīng)要比抗 — B 的反應(yīng)強(qiáng)。這種區(qū)別用玻片法作試驗(yàn)更為明顯。 用受檢者紅細(xì)胞與自身血清作試驗(yàn)，血清中的抗 — B 不凝集自身紅細(xì)胞上的類 B 抗原。 檢查唾液中是否有 A、 B 物質(zhì)，如果是分泌型，可檢出 A 物質(zhì)而無 B 物質(zhì)。 核對患者的診斷，類 B 抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰件桿菌感染有關(guān)。 12. 方法局限性 分型血清質(zhì)量性能符合要求，用畢后，應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。 試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。 操作方法應(yīng)按規(guī)定，一般應(yīng)先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便容易核實(shí)是否漏加血清。 按理 IgM抗 — A 和抗 — B 與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以 4℃ 為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般仍在室溫（ 20℃ 24℃ ）內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)， 37℃ 可使反應(yīng)減弱。 離心時(shí)間不宜過長或過短，速度不宜過快或過慢，以防假陽性或假陰性結(jié)果。 觀察時(shí)應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢 狀排列的區(qū)別。 判斷結(jié)果后應(yīng)仔細(xì)核對、記錄，避免筆誤。 試劑一旦發(fā)現(xiàn)渾濁不得使用。 制紅細(xì)胞懸液時(shí)防止自凝現(xiàn)象。 13. 參考文獻(xiàn) 中國人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編 . 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第 三 版） . 2021 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK05 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 KJXIA 型冰凍血漿解凍箱 生效日期： 20210808 第 37 頁 共 49 頁 Rh 血型鑒定 1. 原理 Rh 血型系統(tǒng)的鑒定是根據(jù)是否存在 D 抗原來決定的。 2. 標(biāo)本采集 標(biāo)本種類：新抽 采 的血 液 標(biāo)本要求 ： EDTA 或 枸櫞酸鈉抗凝 、末梢血。 3. 標(biāo)本儲(chǔ)存： 待測標(biāo)本在 28℃ 下的保存時(shí)間為 48小時(shí) 4. 標(biāo)本運(yùn)輸： 室溫保存 5. 標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)： 不可使用溶血或受污染，或者含有凝塊的樣品。 6. 試劑 試劑名稱： Rh血型鑒定試劑 試劑生產(chǎn)廠家： 英國密理博 試 劑說明： IgM/IgG 抗 D 試劑 7. 操作步驟 加 樣品 紅細(xì)胞 、 Rh 血型鑒定試劑各 1 滴于干凈的玻片上 混勻，觀察結(jié)果。 判讀結(jié)果 ，凝集為 Rh 抗 D 陽性，反之為陰性。 9. 臨床意義 ： Rh 血型鑒定不合出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)。 10. 操作性能 操作簡便方便； 靈敏度高、特異性高、重復(fù)度好； 12 方法局限性： 變質(zhì)的或受到細(xì)菌等物污染 的樣品，試劑可能會(huì)帶來錯(cuò)誤的陰或陽性結(jié)果； ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK05 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 KJXIA 型冰凍血漿解凍箱 生效日期： 20210808 第 38 頁 共 49 頁 BH5100五通道原子吸收光譜儀儀器操作流程 一、開機(jī)準(zhǔn)備 認(rèn)真學(xué)習(xí) BH5100 原子吸收光譜儀的使用說明書，熟悉其基本操作要點(diǎn)。 檢查儀器主機(jī)、計(jì)算機(jī)、打印機(jī)等電源線連接是否正常。 檢查排風(fēng)裝置狀況是否正常。 檢查空壓機(jī)電源、供氣管路狀況是否正常。 檢查乙炔氣供氣系統(tǒng)狀況是否正常。 檢查原子化器水封是否構(gòu)成。 檢查火焰原子化器用的點(diǎn)火槍是否備好。 二、開機(jī)及調(diào)試 “計(jì)算機(jī) — 主機(jī)”系統(tǒng)的開機(jī)操作 （ 1） 按順序依次開啟顯 示器、打印機(jī)及計(jì)算機(jī)主機(jī)的電源按鍵開關(guān)。 （ 2） 開啟儀器主機(jī)電源綠色“船形”開關(guān)，綠燈亮，表示儀器主機(jī)電源已接通。 （ 3 ） 計(jì) 算 機(jī) 開 機(jī) 后 ， 屏 幕 上 有 BH5100 及 圓 形 軟 件 圖 標(biāo) 用鼠標(biāo)左鍵雙擊后，則屏幕顯示“博暉創(chuàng)新 BH5100 操作軟件”如圖 1。屏幕上部的狀態(tài)攔，共排列 12 個(gè)小方形圖標(biāo)： 從左到右依次為：打開、保存、調(diào)控參數(shù)、測量參數(shù)、信號圖形、標(biāo)準(zhǔn)曲線、報(bào)告文件、開始、停止、自動(dòng)調(diào)零、調(diào)整視圖參數(shù)、數(shù)據(jù)顯示。 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK05 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 KJXIA 型冰凍血漿解凍箱 生效日期： 20210808 第 39 頁 共 49 頁 （ 4） 連接主機(jī)與計(jì)算機(jī)：鼠標(biāo)左鍵單擊“開始”圖標(biāo)，出現(xiàn)數(shù)據(jù)顯示頁面。若頁面無反應(yīng)，可以反復(fù)交 替點(diǎn)擊“開始”圖標(biāo)和“停止”圖標(biāo)，直至屏幕右上角出現(xiàn)連續(xù)閃爍數(shù)字的頁面，綠色為工作；紅色為停止； AA：代表吸光度；數(shù)字框內(nèi)依次代表： Cu、 Zn（第一行）、 Ca、 Mg、 Fe的吸光度（閃爍）數(shù)值。 能量調(diào)節(jié) 能量調(diào)節(jié)是指：光電倍增管的負(fù)高壓將空心陰極燈的光信號進(jìn)行光電轉(zhuǎn)換為電信號數(shù)值大小的調(diào)節(jié)。 在“調(diào)控參數(shù)”狀況下，調(diào)節(jié)光電倍增管的負(fù)高壓，可達(dá)到調(diào)節(jié)能量大小的目的。具體由計(jì)算機(jī)對五種元素光電系統(tǒng)的能量按要求進(jìn)行分別調(diào)整，其具體操作如下。 （ 1） 用鼠標(biāo)左鍵單擊“調(diào)控參數(shù)”圖標(biāo)，調(diào)出“調(diào)控參數(shù)”頁面。 （ 2） 點(diǎn)擊確定 ，則計(jì)算機(jī)進(jìn)入負(fù)高壓（增益）調(diào)節(jié)狀態(tài)。 （ 3） 點(diǎn)擊 Cu 自動(dòng)調(diào)整 按扭，則進(jìn)入 Cu 的增益自動(dòng)平衡調(diào)節(jié)狀態(tài)，最終使能量值變?yōu)椤?100~110”左右閃動(dòng)；待負(fù)高壓數(shù)值停止閃電后，依次點(diǎn)擊其它 4個(gè)元素的自動(dòng)調(diào)整，使能量值變?yōu)椤?100~110”左右閃動(dòng)。儀器測樣前需預(yù)熱30分鐘 火焰原子化系統(tǒng)的操作調(diào)試 （ 1） 開啟助燃?xì)猓諝猓?— 燃?xì)猓ㄒ胰玻┫到y(tǒng)操作： 啟動(dòng)空氣壓縮機(jī) ① 按下“風(fēng)機(jī)開關(guān)” 按下“工作開關(guān)” ② 調(diào)節(jié)“調(diào)壓閥”鈕 開排風(fēng)機(jī) ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 血庫 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3XK05 版本 /修訂號 ： A/0