【正文】 時，常用取樣器取樣的方法進(jìn)行采集、調(diào)查，底棲動物所含鮮重為水+礦質(zhì)元素+蛋白質(zhì)，水和無機(jī)鹽不能氧化分解產(chǎn)生能量，故總能量為d(熱值)=(MMaMb)d；（2）冬季候鳥遷入越冬，被捕食的可能性增高，總能量最低大量捕食底棲動物導(dǎo)致底棲動物減少，而為了過冬，秋季的底棲動物要儲存能量，故此時總能量最高；（3）每只候烏每天消耗能量500KJ，停留100天，均已底棲動物為食，傳遞效率最高為20%，需要500 100247。 20%=105KJ，據(jù)圖可知， 109KJ，109/ (105) =10000 只；（4）建立自然保護(hù)區(qū)，沒有進(jìn)行生物遷移，屬于就地保護(hù)。據(jù)圖可知，紅樹林植被的總能量最高，所以增加對紅樹林植被的保護(hù)最為有效。23．人類禿頂基因位于常染色體上，但其表達(dá)受性別影響，基因型與性狀的關(guān)系如下表。某家庭有關(guān)禿頂（相關(guān)基因用A、a表示）和紅綠色盲（相關(guān)基因用B、b表示）的遺傳系譜如下圖。請回答下列問題：基因型AAAaaa表現(xiàn)型男非禿頂禿頂禿頂女非禿頂非禿頂禿頂（1）圖中Ⅱ1與Ⅱ2的基因型分別是_____、_____。 （2）Ⅲ1同時患禿頂和紅綠色盲的概率是_____。 （3）若Ⅱ1與Ⅱ2再生一個小孩，為降低發(fā)病風(fēng)險，你會建議他們生_____孩；為確保子代正常，懷孕后還應(yīng)進(jìn)行_____。 （4）研究發(fā)現(xiàn)禿頂遺傳在性別中的差異與雄性激素的水平有關(guān)。合理的推測是：雄性激素進(jìn)入靶細(xì)胞后，與靶細(xì)胞內(nèi)的受體結(jié)合后會抑制____ （填“A”或“a”） 基因的表達(dá)?！敬鸢浮緼aXBXb AaXBY 3/8 女 基因診斷 A 【解析】（1）由遺傳系譜圖可知，Ⅰ1只患禿頂，則基因型為aaXBX_，Ⅰ2只患紅綠色盲，則基因型為AAXbY，Ⅱ1兩病均不患，且必含有Ⅰ2傳遞的Xb，則Ⅱ1的基因型為AaXBXb；ⅠⅠ4不患病，則基因型可能分別為A_ XBX_、AAXBY，因此其子代必含A基因，又Ⅱ2只患禿頂，則其基因型為AaXBY。（2）Ⅱ2的基因型為AaXBY，而Ⅱ1的基因型為AaXBXb，因此男性Ⅲ1患禿頂?shù)母怕适?/4，患色盲的概率是1/2，同時患禿頂和紅綠色盲的概率是3/41/2=3/8。（3）若Ⅱ2（AaXBY）與Ⅱ1（AaXBXb）再生一個小孩，生男孩不患病的概率為1/41/2=1/8，生女孩不患病的概率為3/4，因此建議生女孩；為確保子代表現(xiàn)型正常，懷孕后還應(yīng)進(jìn)行基因診斷。（4）由于雄性激素是小分子脂質(zhì)類物質(zhì)，所以它通過自由擴(kuò)散方式進(jìn)入靶細(xì)胞，與靶細(xì)胞內(nèi)的受體結(jié)合后會發(fā)揮作用。由表格知，基因型Aa的男性表現(xiàn)禿頂，而女性為非禿頂，則推測雄性激素與靶細(xì)胞內(nèi)的受體結(jié)合后會抑制A基因的表達(dá)，從而導(dǎo)致男性與女性的表現(xiàn)型存在差異。24．某小組分離了一批能分泌脂肪酶（LipA）的細(xì)菌，并期望通過基因重組的方法優(yōu)化基因的序列，獲得更適用于生產(chǎn)工藝要求的酶。請回答下列問題：（1）菌株分離：下列相關(guān)操作正確的有______（填序號）。①實驗用到的玻璃器具需滅菌后使用②制備土壤懸液時，需充分振蕩，使細(xì)菌分散③可采用血細(xì)胞計數(shù)板分析菌懸液中的細(xì)菌量④涂布后的培養(yǎng)皿需立即倒置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（2）菌株篩選：采用含脂肪和甲基紅的培養(yǎng)基進(jìn)行菌株篩選，甲基紅變色范圍為pH4．4（紅）6．3（黃），應(yīng)選擇______的菌落，理由是______。（3）基因克隆與重組：分別選取一株具有高熱穩(wěn)定性和一株高催化效率的菌株，通過PCR的方式獲得各自的LipA基因片段，連入載體A（氨芐青霉素抗性），然后采用交錯延伸PCR的方法獲得不同重組DNA后，連入載體B（卡那霉素抗性），并轉(zhuǎn)入受體菌，最終篩選出既耐熱又高效的重組酶。實驗流程如下圖所示：①載體的連接：載體A用______酶切，與LipA基因（全長約1kb）連接，轉(zhuǎn)化后采用含有______的平板篩選。②交錯延伸PCR：為將上述兩個同源性為93%的LipA基因進(jìn)行重組，采用交錯延伸PCR的方法重組LipA序列。已知Taq酶在其最適延伸溫度（72℃）下的擴(kuò)增速度常以1kb/min計，而本實驗的循環(huán)擴(kuò)增條件為：95℃30s，55℃15s，80個循環(huán)。其中55℃15s包含的過程有______。最終獲得的混合PCR產(chǎn)物中，DNA分子的種類數(shù)為______（填字母）。a．4種 b．16種 c．64種 d．無法計算③LipA重組子的篩選：處理后的混合PCR產(chǎn)物連入載體B，轉(zhuǎn)化受體菌后涂布在含______的平板上進(jìn)行篩選，得到菌株進(jìn)行分析。④本研究采用了兩種不同功能的質(zhì)粒，與載體A相比，載體B結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)是______?！敬鸢浮竣佗? 有紅色水解圈 菌落分解脂肪能力強(qiáng)，釋放脂肪酸多，菌落周圍酸性強(qiáng) EcoR V 氨芐青霉素 退火，并延伸出較短的目的DNA片段 d 卡那霉素 載體B需有用于外源基因表達(dá)的啟動子和終止子序列 【解析】（1）菌株分離：①為得到純凈的培養(yǎng)物，防止雜菌污染，實驗用到的玻璃器具需滅菌后使用，①正確；②制備土壤懸液時，需充分振蕩，使細(xì)菌分散，均勻分布，減小實驗誤差，②正確；③不采用血細(xì)胞計數(shù)板分析菌懸液的主要原因有二，其一，采用稀釋涂布平板法可以同時做到計數(shù)和分離；其二，土壤中的微生物種類不單一，③錯誤；④涂布后的培養(yǎng)皿不能立即倒置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，否則會有菌液滴落到培養(yǎng)皿蓋上，④錯誤。故選①②。（2）菌株篩選：已知脂肪在脂肪酶的作用下分解成脂肪酸和甘油，（紅）（黃），可以利用甲基紅遇酸變色的原理篩選能分泌脂肪酶的細(xì)菌，采用含脂肪和甲基紅的培養(yǎng)基進(jìn)行菌株篩選，應(yīng)選擇有紅色水解圈的菌落，理由是菌落分解脂肪能力強(qiáng)，釋放脂肪酸多，菌落周圍酸性強(qiáng)。（3）基因克隆與重組：分別選取一株具有高熱穩(wěn)定性和一株高催化效率的菌株，通過PCR的方式獲得各自的LipA基因片段，連入載體A（氨芐青霉素抗性），然后采用交錯延伸PCR的方法獲得不同重組DNA后，連入載體B（卡那霉素抗性），并轉(zhuǎn)入受體菌，最終篩選出既耐熱又高效的重組酶。①載體的連接：分析題圖可知，LipA基因是平末端產(chǎn)物，故載體A也應(yīng)該用能產(chǎn)生平末端的EcoR V酶切，與LipA基因（全長約1kb）連接；載體A具有氨芐青霉素抗性基因，故轉(zhuǎn)化后采用含有氨芐青霉素的平板篩選。②交錯延伸PCR：已知PCR過程為“變性復(fù)性延伸”，而本實驗的循環(huán)擴(kuò)增條件為95℃30s為變性階段，55℃15s為復(fù)性階段，其中55℃15s包含的過程有退火，并延伸出較短的目的DNA片段。分析題圖可知，由于采用交錯延伸PCR的方法重組LipA序列，故最終獲得的混合PCR產(chǎn)物中，LipA基因片段的位置不確定，即DNA分子的種類數(shù)無法計算，故選d。③LipA重組子的篩選：處理后的混合PCR產(chǎn)物連入載體B，由于載體B具有卡那霉素抗性基因，轉(zhuǎn)化受體菌后涂布在含卡那霉素的平板上進(jìn)行篩選，得到菌株進(jìn)行分析。④本研究采用了兩種不同功能的質(zhì)粒，與載體A相比，由于載體B要導(dǎo)入受體菌內(nèi)，故載體B需要有用于外源基因表達(dá)的啟動子和終止子序列。