【正文】 ④本研究采用了兩種不同功能的質(zhì)粒，與載體A相比，由于載體B要導(dǎo)入受體菌內(nèi)，故載體B需要有用于外源基因表達(dá)的啟動(dòng)子和終止子序列。分析題圖可知，由于采用交錯(cuò)延伸PCR的方法重組LipA序列，故最終獲得的混合PCR產(chǎn)物中，LipA基因片段的位置不確定，即DNA分子的種類(lèi)數(shù)無(wú)法計(jì)算，故選d。①載體的連接：分析題圖可知，LipA基因是平末端產(chǎn)物，故載體A也應(yīng)該用能產(chǎn)生平末端的EcoR V酶切，與LipA基因（全長(zhǎng)約1kb）連接；載體A具有氨芐青霉素抗性基因，故轉(zhuǎn)化后采用含有氨芐青霉素的平板篩選。（2）菌株篩選：已知脂肪在脂肪酶的作用下分解成脂肪酸和甘油，（紅）（黃），可以利用甲基紅遇酸變色的原理篩選能分泌脂肪酶的細(xì)菌，采用含脂肪和甲基紅的培養(yǎng)基進(jìn)行菌株篩選，應(yīng)選擇有紅色水解圈的菌落，理由是菌落分解脂肪能力強(qiáng)，釋放脂肪酸多，菌落周?chē)嵝詮?qiáng)?！敬鸢浮竣佗? 有紅色水解圈 菌落分解脂肪能力強(qiáng)，釋放脂肪酸多，菌落周?chē)嵝詮?qiáng) EcoR V 氨芐青霉素 退火，并延伸出較短的目的DNA片段 d 卡那霉素 載體B需有用于外源基因表達(dá)的啟動(dòng)子和終止子序列 【解析】（1）菌株分離：①為得到純凈的培養(yǎng)物，防止雜菌污染，實(shí)驗(yàn)用到的玻璃器具需滅菌后使用，①正確；②制備土壤懸液時(shí)，需充分振蕩，使細(xì)菌分散，均勻分布，減小實(shí)驗(yàn)誤差，②正確；③不采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板分析菌懸液的主要原因有二，其一，采用稀釋涂布平板法可以同時(shí)做到計(jì)數(shù)和分離；其二，土壤中的微生物種類(lèi)不單一，③錯(cuò)誤；④涂布后的培養(yǎng)皿不能立即倒置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，否則會(huì)有菌液滴落到培養(yǎng)皿蓋上，④錯(cuò)誤。a．4種 b．16種 c．64種 d．無(wú)法計(jì)算③LipA重組子的篩選：處理后的混合PCR產(chǎn)物連入載體B，轉(zhuǎn)化受體菌后涂布在含______的平板上進(jìn)行篩選，得到菌株進(jìn)行分析。其中55℃15s包含的過(guò)程有______。②交錯(cuò)延伸PCR：為將上述兩個(gè)同源性為93%的LipA基因進(jìn)行重組，采用交錯(cuò)延伸PCR的方法重組LipA序列。（3）基因克隆與重組：分別選取一株具有高熱穩(wěn)定性和一株高催化效率的菌株，通過(guò)PCR的方式獲得各自的LipA基因片段，連入載體A（氨芐青霉素抗性），然后采用交錯(cuò)延伸PCR的方法獲得不同重組DNA后，連入載體B（卡那霉素抗性），并轉(zhuǎn)入受體菌，最終篩選出既耐熱又高效的重組酶。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）菌株分離：下列相關(guān)操作正確的有______（填序號(hào)）。由表格知，基因型Aa的男性表現(xiàn)禿頂，而女性為非禿頂，則推測(cè)雄性激素與靶細(xì)胞內(nèi)的受體結(jié)合后會(huì)抑制A基因的表達(dá)，從而導(dǎo)致男性與女性的表現(xiàn)型存在差異。（3）若Ⅱ2（AaXBY）與Ⅱ1（AaXBXb）再生一個(gè)小孩，生男孩不患病的概率為1/41/2=1/8，生女孩不患病的概率為3/4，因此建議生女孩；為確保子代表現(xiàn)型正常，懷孕后還應(yīng)進(jìn)行基因診斷?！敬鸢浮緼aXBXb AaXBY 3/8 女 基因診斷 A 【解析】（1）由遺傳系譜圖可知，Ⅰ1只患禿頂，則基因型為aaXBX_，Ⅰ2只患紅綠色盲，則基因型為AAXbY，Ⅱ1兩病均不患，且必含有Ⅰ2傳遞的Xb，則Ⅱ1的基因型為AaXBXb；ⅠⅠ4不患病，則基因型可能分別為A_ XBX_、AAXBY，因此其子代必含A基因，又Ⅱ2只患禿頂，則其基因型為AaXBY。 （4）研究發(fā)現(xiàn)禿頂遺傳在性別中的差異與雄性激素的水平有關(guān)。 （2）Ⅲ1同時(shí)患禿頂和紅綠色盲的概率是_____。某家庭有關(guān)禿頂（相關(guān)基因用A、a表示）和紅綠色盲（相關(guān)基因用B、b表示）的遺傳系譜如下圖。據(jù)圖可知，紅樹(shù)林植被的總能量最高，所以增加對(duì)紅樹(shù)林植被的保護(hù)最為有效?！敬鸢浮繕臃椒ǎㄈ悠魅臃ǎ? G=（MaMbM）d 冬季候鳥(niǎo)遷入越冬，大量捕食底棲動(dòng)物導(dǎo)致底棲動(dòng)物減少；而為了過(guò)冬，秋季的底棲動(dòng)物要儲(chǔ)存能量，故此時(shí)總能量最高 1104 就地 紅樹(shù)林植被 【解析】（1）底棲動(dòng)物有較強(qiáng)的活動(dòng)能力，而且身體微小，因此不適于用樣方法或標(biāo)記重捕法進(jìn)行調(diào)查,，進(jìn)行這類(lèi)研究時(shí)，常用取樣器取樣的方法進(jìn)行采集、調(diào)查，底棲動(dòng)物所含鮮重為水+礦質(zhì)元素+蛋白質(zhì)，水和無(wú)機(jī)鹽不能氧化分解產(chǎn)生能量，故總能量為d(熱值)=(MMaMb)d；（2）冬季候鳥(niǎo)遷入越冬，被捕食的可能性增高，總能量最低大量捕食底棲動(dòng)物導(dǎo)致底棲動(dòng)物減少，而為了過(guò)冬，秋季的底棲動(dòng)物要儲(chǔ)存能量，故此時(shí)總能量最高；（3）每只候?yàn)趺刻煜哪芰?00KJ，停留100天，均已底棲動(dòng)物為食，傳遞效率最高為20%，需要500 100247。（4）深圳福田紅樹(shù)林濕地自然保護(hù)區(qū)創(chuàng)建于1984年，這種保護(hù)方式屬于___________保護(hù)。（2）據(jù)圖可知，深圳紅樹(shù)林濕地底棲動(dòng)物的總能量在冬季最低、秋季最高，請(qǐng)從種間關(guān)系的角度分析主要原因___________?，F(xiàn)測(cè)得底棲動(dòng)物的以下數(shù)據(jù)：a．含水率（%）；b．灰分（即礦質(zhì)元素）所占比例（%）；c．蛋白質(zhì)所占比例（%）；d．熱值（單位質(zhì)量有機(jī)物徹底氧化分解釋放的能量（kJ/kg）。為了評(píng)估紅樹(shù)林濕地對(duì)鳥(niǎo)類(lèi)的承載力，研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)采樣估算出濕地底棲動(dòng)物的鮮重總量（M，單位kg），據(jù)此推算出底棲動(dòng)物所含的總能量（G，單位kJ），結(jié)果如下圖。因此實(shí)驗(yàn)步驟第四部應(yīng)該為將甲組的瓊脂塊放在甲組植株的花芽B處，乙組的瓊脂塊放在乙組植株的花芽B處，第五步：需要將甲乙二組植株均置于相同且適宜的黑暗條件下一段時(shí)間，這樣可以排除光照對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響，再觀察兩組植株的開(kāi)花情況。②每天的光照時(shí)間短于黑暗時(shí)間，該植物才能開(kāi)花。第四步：_______________________________________________________________第五步；將甲乙二組植株均置于相同且適宜_______________（光照條件/黑暗環(huán)境）下一段時(shí)間，觀察兩組植株開(kāi)花情況。第二步：將甲組切下的葉片A置于一空白瓊脂塊上；乙組取一等大空白瓊脂塊不做任何處理待用。下面是借鑒“溫特實(shí)驗(yàn)”方法證明上述觀點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，請(qǐng)完善相關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟。觀點(diǎn)二：_______________________________________________，該植物才能開(kāi)花。21．在其他條件相同且適宜的條件下，如圖是研究某植物的開(kāi)花與光照時(shí)長(zhǎng)之間關(guān)系的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果。故選D。20．下表為某實(shí)驗(yàn)小組為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果的實(shí)驗(yàn)記錄（丙組不加酶），有關(guān)分析正確的是（ ）水溫/℃1020304050組別甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙清除血漬時(shí)間/min67668852518336347711126891167清除油漬時(shí)間/min93789587639182468575277769868A．該實(shí)驗(yàn)的自變量不只一個(gè)，不遵循單因子變量原則B．為了排除偶然性，除了酶的種類(lèi)和溫度不同之外的其