凝血酶的提取(編輯修改稿)
2024-10-03 16:14 本頁面
【文章內容簡介】 右，然后過濾，沉淀分別用乙醇和乙醚洗滌一次，放置在干燥器或石灰缸中干燥，即得凝血酶粗品。（4）除雜、沉淀、干燥：把粗品溶于適量（1倍左右）%氯化鈉溶液中，在0℃放置6小時以上，然后用濾紙過濾，%氯化鈉溶液溶解，在0℃放置6小時以上，過濾，合并兩次濾液，用1%。然后離心，棄去沉淀，收集上層清液。在清液中加入2倍量預冷至4℃的丙酮，靜置3小時，離心30分鐘，收集沉淀。沉淀再浸泡于冷丙酮中，靜置過夜，然后過濾，沉淀分別用無水乙醇、乙醚各洗滌一次，干燥即得產品。（三）凝血酶效價測定：標準纖維蛋白測定法：凝血酶的單位定義為活度量，即1毫升標準纖維蛋白原溶液在28℃、15秒鐘內產生凝集的量為一個單位。具體做法是：將凝血酶樣品配成適當濃度，%纖維蛋白原溶液，于28℃測定其凝結時間（先將凝血酶配成一定濃度），得到每毫克樣品所含單位的估算值。，%纖維蛋白原溶液中，凝結時間須為15秒。草酸鹽牛血清測定法：即1毫升草酸鹽牛血清在28℃、。具體做法是：7份牛血清與1份等滲草酸鉀溶液（%）混合，離心分離得草酸鹽牛血清（40℃只能保存兩個星期）。取幾只試管，，通過反復試驗，確定適宜的稀釋度，使之在15秒鐘內產生凝集。同前面的定義一樣。估量稀釋度后，很快就可以確定凝血酶原液的滴定度及每毫升或每毫克凝血酶的單位。（四）工藝評價：國外已有報道以牛血漿為原料制備凝血酶，也可用豬血漿為原料分離制備凝血酶，以達到充分利用我國豐富的豬血資源之目的。豬血中，血漿與血球之體積比為55∶45，通常1000毫升全血用離心機分離只能得到500毫升血漿。新鮮豬血不能立即分離，需盡快冷至15℃以下（時間太長豬血會發(fā)生腐?。?，再進行分離。溫度愈低，血漿、血球愈容易分離。用以上工藝，每1000毫升血漿可制得凝血酶粗品約10克。即粗品收率約百分之一，精品收率約萬分之四。原有的凝血酶制備
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