免疫細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù)(編輯修改稿)
2024-10-03 13:49 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 和SRBC混合時(shí)，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體產(chǎn)生細(xì)胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復(fù)合物,此時(shí)能活化補(bǔ)體導(dǎo)致溶血。上述直接法和間接法都只能檢測(cè)抗RBC抗體的產(chǎn)生細(xì)胞，而且需要事先免疫，難以檢測(cè)人類的抗體產(chǎn)生情況?！ 。?）被動(dòng)溶血空斑試驗(yàn)：是指抗體形成細(xì)胞產(chǎn)生的Ig與SRBC上的抗原結(jié)合，在補(bǔ)體參與下出現(xiàn)溶血反應(yīng)。方法是將吸附有已知抗原的SRBC、待檢B細(xì)胞、補(bǔ)體及適量瓊脂糖液混合，傾注平皿，溫育1～3小時(shí)后，形成肉眼可見(jiàn)的溶血空斑。這種非紅細(xì)胞抗體性溶血空斑試驗(yàn)可檢測(cè)SRBC上抗原相應(yīng)的抗體形成細(xì)胞，因此應(yīng)用范圍較廣 ?。喝苎瞻咴囼?yàn)主要用于測(cè)定藥物和手術(shù)等因素對(duì)體液免疫功能的影響，評(píng)價(jià)免疫治療或免疫重建后機(jī)體產(chǎn)生抗體的能力。 ?。ㄈ┟嘎?lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISPOT） ?。河每乖还滔噍d體，加入待檢的抗體產(chǎn)生細(xì)胞，即可誘導(dǎo)抗體的分泌。分泌的抗體與包被抗原結(jié)合，在抗體分泌細(xì)胞周圍形成抗原抗體復(fù)合物，使細(xì)胞吸附于載體上，加入酶標(biāo)記的第二抗體與細(xì)胞上的抗體結(jié)合，通過(guò)底物顯色反應(yīng)的深淺，可測(cè)定出生成的抗體量，并可在鏡下計(jì)數(shù)著色的斑點(diǎn)形成細(xì)胞?！ ≡摲椒瓤蓹z測(cè)抗體分泌細(xì)胞，又可檢測(cè)抗體分泌量。其優(yōu)點(diǎn)是穩(wěn)定、特異、抗原用量少；可同時(shí)檢測(cè)不同抗原誘導(dǎo)的不同抗體分泌，并可定量；可檢測(cè)組織切片中分泌抗體的單個(gè)細(xì)胞?！ 。ㄋ模w內(nèi)實(shí)驗(yàn) B細(xì)胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig和血型抗體量下降或缺如。常用于體內(nèi)抗體產(chǎn)生的特異性抗原有白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、多價(jià)肺炎鏈球菌菌苗等。將適量抗原皮下或肌內(nèi)注射免疫，并于免疫前及免疫后3周分別采血，分離血清，測(cè)定受檢者免疫前后相應(yīng)抗體的效價(jià)，判斷受檢者體內(nèi)B細(xì)胞的功能?！ ∪?、NK細(xì)胞活性測(cè)定 NK細(xì)胞具有ADCC，能直接殺傷腫瘤細(xì)胞，故將單個(gè)核細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共同培養(yǎng)，腫瘤細(xì)胞存活率低，NK細(xì)胞的活性則高。測(cè)定人NK細(xì)胞活性的靶細(xì)胞多用K562細(xì)胞株，而測(cè)定小鼠NK細(xì)胞活性則常采用YAC1細(xì)胞株?！ ◇w外檢測(cè)NK細(xì)胞活性的方法有形態(tài)學(xué)法、酶釋放法、放射性核素釋放法、化學(xué)發(fā)光法、流式細(xì)胞術(shù)法等。第二節(jié) 吞噬細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù) 大吞
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