免疫細胞功能檢測技術(shù)(編輯修改稿)
2025-10-03 13:49 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 和SRBC混合時，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體產(chǎn)生細胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復合物,此時能活化補體導致溶血。上述直接法和間接法都只能檢測抗RBC抗體的產(chǎn)生細胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產(chǎn)生情況?！ 。?）被動溶血空斑試驗：是指抗體形成細胞產(chǎn)生的Ig與SRBC上的抗原結(jié)合，在補體參與下出現(xiàn)溶血反應。方法是將吸附有已知抗原的SRBC、待檢B細胞、補體及適量瓊脂糖液混合，傾注平皿，溫育1～3小時后，形成肉眼可見的溶血空斑。這種非紅細胞抗體性溶血空斑試驗可檢測SRBC上抗原相應的抗體形成細胞，因此應用范圍較廣 ：溶血空斑試驗主要用于測定藥物和手術(shù)等因素對體液免疫功能的影響，評價免疫治療或免疫重建后機體產(chǎn)生抗體的能力?！ 。ㄈ┟嘎?lián)免疫斑點試驗（ELISPOT） ：用抗原包被固相載體，加入待檢的抗體產(chǎn)生細胞，即可誘導抗體的分泌。分泌的抗體與包被抗原結(jié)合，在抗體分泌細胞周圍形成抗原抗體復合物，使細胞吸附于載體上，加入酶標記的第二抗體與細胞上的抗體結(jié)合，通過底物顯色反應的深淺，可測定出生成的抗體量，并可在鏡下計數(shù)著色的斑點形成細胞。 該方法既可檢測抗體分泌細胞，又可檢測抗體分泌量。其優(yōu)點是穩(wěn)定、特異、抗原用量少；可同時檢測不同抗原誘導的不同抗體分泌，并可定量；可檢測組織切片中分泌抗體的單個細胞?！ 。ㄋ模w內(nèi)實驗 B細胞功能減低或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig和血型抗體量下降或缺如。常用于體內(nèi)抗體產(chǎn)生的特異性抗原有白喉類毒素、破傷風類毒素、多價肺炎鏈球菌菌苗等。將適量抗原皮下或肌內(nèi)注射免疫，并于免疫前及免疫后3周分別采血，分離血清，測定受檢者免疫前后相應抗體的效價，判斷受檢者體內(nèi)B細胞的功能?！ ∪?、NK細胞活性測定 NK細胞具有ADCC，能直接殺傷腫瘤細胞，故將單個核細胞與腫瘤細胞共同培養(yǎng)，腫瘤細胞存活率低，NK細胞的活性則高。測定人NK細胞活性的靶細胞多用K562細胞株，而測定小鼠NK細胞活性則常采用YAC1細胞株?！ ◇w外檢測NK細胞活性的方法有形態(tài)學法、酶釋放法、放射性核素釋放法、化學發(fā)光法、流式細胞術(shù)法等。第二節(jié) 吞噬細胞功能檢測技術(shù) 大吞
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