免疫細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù)(已修改)
2024-10-03 13:49 本頁(yè)面
【正文】 第十五章 免疫細(xì)胞功能檢測(cè)技術(shù) 免疫細(xì)胞是指參與機(jī)體免疫應(yīng)答的細(xì)胞，大致可分為兩類，一類能識(shí)別特異性抗原，一旦被激活則顯示出特異性應(yīng)答的功能，主要指淋巴細(xì)胞群，包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、K細(xì)胞等；另一類能捕獲抗原，處理抗原，以一定方式提呈給淋巴細(xì)胞或表現(xiàn)其他免疫功能，包括中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等。測(cè)定這些細(xì)胞功能可以有效評(píng)價(jià)機(jī)體特異性和非特異性免疫功能。第一節(jié) 淋巴細(xì)胞的功能檢測(cè) 淋巴細(xì)胞功能測(cè)定可分為體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)。 體內(nèi)試驗(yàn)主要是進(jìn)行遲發(fā)型超敏反應(yīng)，借此間接了解淋巴細(xì)胞對(duì)抗原、半抗原或有絲分裂原的應(yīng)答反應(yīng)； 體外試驗(yàn)主要包括淋巴細(xì)胞對(duì)抗原或有絲分裂原刺激后的增殖反應(yīng)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)及淋巴細(xì)胞分泌產(chǎn)物的測(cè)定?！ ∫?、T細(xì)胞功能檢測(cè) T細(xì)胞具有多種免疫生物學(xué)功能，如直接殺傷靶細(xì)胞、輔助或抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，對(duì)特異性抗原或絲裂原刺激產(chǎn)生增殖反應(yīng)及產(chǎn)生各種細(xì)胞因子。據(jù)此，建立了一系列檢測(cè)T細(xì)胞功能的體內(nèi)和體外試驗(yàn)?！ 。ㄒ唬㏕細(xì)胞增殖試驗(yàn) ?。篢細(xì)胞在體外受到有絲分裂原或抗原的刺激后，細(xì)胞增殖，并轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。因此，淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)又稱淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化?！ 。褐参镅兀≒HA）、刀豆素A（ConA）和美洲商陸（PWM）、白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、純化蛋白衍生物（PPD）和白色念珠菌等?！ 。簷z測(cè)T細(xì)胞增殖反應(yīng)的方法有： ?。?）形態(tài)學(xué)檢查法：運(yùn)用普通光學(xué)顯微鏡，簡(jiǎn)便易行。缺點(diǎn)是依靠肉眼觀察形態(tài)學(xué)變化，判斷結(jié)果易受主觀因素影響，重復(fù)性和準(zhǔn)確性較差?！ 。?）3HTdR摻入法：敏感性高，客觀性強(qiáng)，重復(fù)性好，但需一定設(shè)備條件，及存在放射性核素污染問(wèn)題?！ 。?）MTT比色法：本方法的敏感性雖不及3HTdR摻入法，但操作簡(jiǎn)便，無(wú)放射性污染。較常采用。 ?。ǘ㏕細(xì)胞分泌功能測(cè)定 體外培養(yǎng)的T細(xì)胞經(jīng)各種絲裂原或抗原刺激后，分泌各種細(xì)胞因子，可借助免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)通過(guò)對(duì)于T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的含量、生物學(xué)活性和基因表達(dá)水平，以反映T細(xì)胞功能?！ 。ㄈ㏕細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn) 常選用可傳代的已建株的人腫瘤細(xì)胞，與待檢淋巴細(xì)胞混合，觀察腫
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