【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 究結(jié)果不一致，有認(rèn)為在人的肌肉組織、離體脂肪細(xì)胞及活檢脂肪組織中沒(méi)有抵抗素的表達(dá)；有發(fā)現(xiàn) 9在正常人、胰島素抵抗及糖尿病患者的上述組織中抵抗 素的表達(dá)水平?jīng)]有差異。在部分患者離體的脂肪細(xì)胞和脂肪組織中，抵抗素呈特異性低豐度表達(dá)。由此認(rèn)為，在人類抵抗素似乎并不是聯(lián)系肥胖和 2型糖尿病的重要信號(hào)分子。又有研究顯示，在多種肥胖模型 [ob／ ob， db／ db， tub／ tub和 kka（ y） d、鼠 ]的白色脂肪組織中，抵抗索表達(dá)水平顯著降低 .在 ob／ ob 小鼠和zucher 肥胖大鼠中， ppap 了激動(dòng)劑可上調(diào)脂肪組織中抵抗素的表達(dá)。這表明在實(shí)驗(yàn)性肥胖的嚙齒動(dòng)物模型中，存在嚴(yán)。健的抵抗素表達(dá)缺陷，降低抵抗素的表達(dá)并不是 ppart 激動(dòng)劑發(fā)揮抗，糖尿病效應(yīng)所必需的。 以上初步的研究資料顯示，抵抗索是繼瘦索之后發(fā)現(xiàn)的、脂肪組織分泌的又一重要激素，但抵抗索在胰島索抵抗和 2型柵尿病發(fā)病機(jī)制中的確切地位尚待闡明。 （ adiponectin）亦稱為凝膠結(jié)合蛋白（ gbp28）， 第 13 頁(yè) 共 28 頁(yè) 是一種由 apml（ aditposemostabundantgeranscript1）基因編碼的脂肪組織特異性的血漿蛋白。該基因特異且高豐度表達(dá)于脂肪組織，其啟動(dòng)子區(qū)含有過(guò)氧化物酶體增生激活受體 a（ ppara）和糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合基序。脂聯(lián)素的鼠類同源蛋白已被鑒定，稱為 adipoq 或脂肪細(xì)咆補(bǔ)體相關(guān)蛋白（ acrp30）。 日本學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素可降低肥胖鼠骨骼肌和肝臟中三 10 酰甘油的含量，減輕胰島素抵抗。在動(dòng)物模型及患者中均已證實(shí)低脂聯(lián)素血癥與胰島素抵抗存在相關(guān)性。在脂肪萎縮的胰島素抵抗模型鼠中，聯(lián)合應(yīng)用生理濃度的脂聯(lián)素和瘦素可完全逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗，而單用脂聯(lián)素或瘦素都僅能部分改善胰島素抵抗。這表明在肥胖和脂肪萎縮鼠模型中，脂聯(lián)素降低均參與了胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展。這也提示補(bǔ)充脂聯(lián)素可能為胰島素抵抗 2型糖尿病的治療提供了全新的手段。最近的研究表明，在不同種族人群中 ，血漿脂聯(lián)素 ..濃度降低均是聯(lián)系肥胖和 2 型糖尿病的重要指標(biāo)，且血漿脂聯(lián)素的降低程度與胰島素抵抗及高胰島素血癥的相關(guān)性要強(qiáng)于肥胖度和糖耐量減退程度。已有研究觀察到，脂聯(lián)素基因 2號(hào) .外顯子存在 g／ t的多態(tài)性位點(diǎn)， 3號(hào)外顯子存在錯(cuò)義突變（ r112c），且發(fā)現(xiàn)攜有該突變術(shù)體的血漿脂聯(lián)素濃度顯著降低。而 2 號(hào)外顯子 g／ t 的多態(tài)性與血漿脂聯(lián)素濃度及肥胖均無(wú)相關(guān)性。 體內(nèi)外研究表明， tzds可誘導(dǎo)脂聯(lián)素基因表達(dá)和蛋白分泌。 第 14 頁(yè) 共 28 頁(yè) tzds 可顯著增加伴有胰島素抵抗的患者和嚙齒動(dòng)物血漿脂聯(lián)素濃度，而并不影響體重。 tzds 可使 肥胖鼠脂肪組織中降低的脂聯(lián)素水平恢復(fù)正?；蚋哂谡?。 tzd 衍生物可呈劑量和時(shí)間依賴的 o 方式增加 3t3l1細(xì)胞中脂聯(lián)素 mrna的表達(dá)和蛋白分泌?，F(xiàn)已明確 tzds 是通過(guò)激活脂聯(lián)素的啟動(dòng)子而發(fā)揮上述效應(yīng)。胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下，脂肪源性 11tnf— a 生成增加 .tnf— a可抑制脂聯(lián)素的啟動(dòng)子活性，降低脂聯(lián)素的表達(dá)。 tzds 可拮抗 tnf— a對(duì)脂聯(lián)素啟動(dòng)子的抑制效應(yīng)，增加脂聯(lián)素的表達(dá)，改善胰島素抵抗。 （六）胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白基因剔除研究的啟示 基因剔除技術(shù)的基本原理是利用活細(xì)胞基因組 dna 可與外源 dna序列發(fā)生同源重組的特性，對(duì)預(yù)先選擇的基因進(jìn)行定點(diǎn)修飾達(dá)到改變基因組某一基因的目的。其特點(diǎn)是把外源基因引入基因組 dna 的特定片段上，被擊中的基因或引入的新基因會(huì)隨基因組 dna的復(fù)制而穩(wěn)定復(fù)制，因而可在活體內(nèi)對(duì)某一基因的功能進(jìn)行研究。組織選擇性剔除系統(tǒng)的建立為研究某一基因的組織特異性功能提供了有力手段?；蛱蕹夹g(shù)以及特定組織基因剔除 .為了解胰島素信號(hào)系統(tǒng)中一些主要蛋白分子的功能提供了前所未有的條件 .對(duì)理解胰島素抵抗及 2 型柵尿病的發(fā)生機(jī)制有重要啟示。 （ insr）剔除胰 島素必須與其特異性受體結(jié)合 第 15 頁(yè) 共 28 頁(yè) 才能發(fā)揮生物效應(yīng)。基因圳除研究顯示， insr 基因純合突變鼠（ insr/）宮內(nèi)發(fā)育正常 .吮乳后便出現(xiàn)嚴(yán)重的柵尿病酮癥酸中毒，血三酰甘油（ tg）和游離脂肪酸（ ffa）升高，肝臟脂肪變性，肝糖原含量減少 o生長(zhǎng)遲滯，骨骼肌萎縮。脂肪細(xì)胞的分化及數(shù)日基本正常 .但細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量顯著降低。由于這些嚴(yán)重的代謝紊亂， insr/鼠多在出生后 1 周內(nèi)死亡。證明胰島素生理效應(yīng)完全缺乏，具嚴(yán)重后果。 12而雜合突變鼠（ insr/）表型正常，并無(wú)明顯的胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)缺陷。也有發(fā)現(xiàn) insr/鼠 46月齡時(shí)出現(xiàn)胰島素水平升高和胰島素抵抗 .但也只有 lo％發(fā)展為糖尿病，后者可能與遺傳背景有關(guān)。這一結(jié)果與人類胰島素受體生理學(xué)特性相符 o 因?yàn)榘屑?xì)胞膜上的胰島素受體只需 10％～ 20％與胰島素結(jié)合，即足以發(fā)揮最大生理效應(yīng)。 在骨骼肌特異性 insr 剔除（ mirk0）鼠 .盡管骨骼肌中胰島素刺激葡萄糖攝取受損，出現(xiàn)體脂增加， tg 和 ffa 水平升高，但血糖、血清胰島素及糖耐量均正常。這提示骨骼肌胰島素抵抗有助于 2 型糖尿病相關(guān)的脂代謝異常的形成，而與胰島素相關(guān)的糖代謝的調(diào)節(jié)可能較人們以前認(rèn)識(shí)的更為復(fù)雜。通常 運(yùn)動(dòng)能促進(jìn)骨骼肌對(duì)葡萄糖的攝取，提高胰島素的敏感性。安靜狀態(tài)下，mirko鼠骨骼肌對(duì) 2脫氧葡萄糖（ 2dg）的攝取正常，且肌糖原含量及糖原合成酶活性亦正常，但對(duì)胰島素的刺激無(wú)反應(yīng)。單純 第 16 頁(yè) 共 28 頁(yè) 運(yùn)動(dòng)以及運(yùn)動(dòng)加上胰島素均能增加 mirko 鼠骨骼肌對(duì) 2dg 的攝取，且單純運(yùn)動(dòng)就能增加糖原合成酶活性，而單純胰島素并不能使糖原合成酶活性增加。這表明骨骼肌中 insr 的正常表達(dá)并非運(yùn)動(dòng)促進(jìn)葡萄糖攝取和增加糖原合成酶活性所必需的。 選擇性剔除小鼠 b 細(xì)胞的 insr 后，在葡萄糖刺激下，第一時(shí)相的胰島素分泌完全缺失，而對(duì)精氨酸 刺激仍有反應(yīng)，酷似 2型糖尿病中的 b細(xì)胞缺陷。這種特征也見(jiàn)于臨床上由于 13 胰島素受體遺傳性缺陷而發(fā)生嚴(yán)重胰島素抵抗的患者，其對(duì)葡萄糖刺激下的急性胰島素分泌反應(yīng)也缺乏。上述專一 b細(xì)胞胰島素受體剔除小鼠葡萄糖所誘發(fā)的第 2 相胰島素分泌也較為遲鈍，隨著鼠齡增加，糖耐量逐漸減損，不過(guò)不出現(xiàn)明顯的糖尿病。這一研究表明完整的胰島素信號(hào)系統(tǒng)為 b細(xì)胞本身分泌胰島素功能所必需，同時(shí)提示 b細(xì)胞水平的胰島素抵抗日久也會(huì)引起胰島素分泌下降，從而有可能以一元論：胰島素抵抗來(lái)解釋 2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制及自然病程。 也有 研究選擇性剔除小鼠肝臟的 insr， 2個(gè)月后出現(xiàn)嚴(yán)重的胰島素抵抗， igt 及對(duì)外源性胰島素抵抗。但到 4 月齡時(shí)，空腹血糖恢復(fù)正常。這表明單純的肝臟胰島素抵抗足以導(dǎo)致葡萄糖代謝的嚴(yán)重紊亂，但并不一定形成空腹高血糖或糖尿病。 （ ptpase）剔除 ptpase能使 insr脫磷酸化，抑制酪氨酸激酶活性，減弱胰島素的效應(yīng)。蛋白酪氨酸磷 第 17 頁(yè) 共 28 頁(yè) 酸酶 1b（ ptplb）基因剔除后，小鼠血糖輕度下降，胰島素濃度較野生型（ ptp1b+/+）降低一半。純合子鼠（ ptplb/）對(duì)胰島素的敏感性增加，胰島素刺激后 .肝臟和肌肉組織 insr 酪氨酸磷酸化增強(qiáng)。 ptplb/鼠和雜合子（ ptplb+/）鼠均能抵抗高脂飲食引發(fā)的體重增加，并保持胰島素的敏感性。且發(fā)現(xiàn) ptplb/鼠體重顯著減輕，并伴有基礎(chǔ)代謝率的提高和總能量消耗的增加，這種減肥效應(yīng)是由 14 于脂肪細(xì)胞體積明顯減小，而數(shù)目并無(wú)改變。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)， ptplb/鼠的增敏效應(yīng)具有組織特異性，它可增加骨骼肌對(duì)葡萄糖的攝取，但對(duì)脂肪組織無(wú)明顯影響。由此提示 ptplb在調(diào)節(jié)胰島紊敏感性和能量代謝中發(fā)揮重要作用，這也為 2 型糖尿病和肥胖的治療提供了潛在的 新靶點(diǎn)。 （ irss）剔除口前已發(fā)現(xiàn)至少 9 種 irss，其巾與胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)密切相