【文章內(nèi)容簡介】 究結(jié)果不一致，有認為在人的肌肉組織、離體脂肪細胞及活檢脂肪組織中沒有抵抗素的表達；有發(fā)現(xiàn) 9在正常人、胰島素抵抗及糖尿病患者的上述組織中抵抗 素的表達水平?jīng)]有差異。在部分患者離體的脂肪細胞和脂肪組織中，抵抗素呈特異性低豐度表達。由此認為，在人類抵抗素似乎并不是聯(lián)系肥胖和 2型糖尿病的重要信號分子。又有研究顯示，在多種肥胖模型 [ob／ ob， db／ db， tub／ tub和 kka（ y） d、鼠 ]的白色脂肪組織中，抵抗索表達水平顯著降低 .在 ob／ ob 小鼠和zucher 肥胖大鼠中， ppap 了激動劑可上調(diào)脂肪組織中抵抗素的表達。這表明在實驗性肥胖的嚙齒動物模型中，存在嚴。健的抵抗素表達缺陷，降低抵抗素的表達并不是 ppart 激動劑發(fā)揮抗，糖尿病效應(yīng)所必需的。 以上初步的研究資料顯示，抵抗索是繼瘦索之后發(fā)現(xiàn)的、脂肪組織分泌的又一重要激素，但抵抗索在胰島索抵抗和 2型柵尿病發(fā)病機制中的確切地位尚待闡明。 （ adiponectin）亦稱為凝膠結(jié)合蛋白（ gbp28）， 第 13 頁 共 28 頁 是一種由 apml（ aditposemostabundantgeranscript1）基因編碼的脂肪組織特異性的血漿蛋白。該基因特異且高豐度表達于脂肪組織，其啟動子區(qū)含有過氧化物酶體增生激活受體 a（ ppara）和糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合基序。脂聯(lián)素的鼠類同源蛋白已被鑒定，稱為 adipoq 或脂肪細咆補體相關(guān)蛋白（ acrp30）。 日本學者研究發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素可降低肥胖鼠骨骼肌和肝臟中三 10 酰甘油的含量，減輕胰島素抵抗。在動物模型及患者中均已證實低脂聯(lián)素血癥與胰島素抵抗存在相關(guān)性。在脂肪萎縮的胰島素抵抗模型鼠中，聯(lián)合應(yīng)用生理濃度的脂聯(lián)素和瘦素可完全逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗，而單用脂聯(lián)素或瘦素都僅能部分改善胰島素抵抗。這表明在肥胖和脂肪萎縮鼠模型中，脂聯(lián)素降低均參與了胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展。這也提示補充脂聯(lián)素可能為胰島素抵抗 2型糖尿病的治療提供了全新的手段。最近的研究表明，在不同種族人群中 ，血漿脂聯(lián)素 ..濃度降低均是聯(lián)系肥胖和 2 型糖尿病的重要指標，且血漿脂聯(lián)素的降低程度與胰島素抵抗及高胰島素血癥的相關(guān)性要強于肥胖度和糖耐量減退程度。已有研究觀察到，脂聯(lián)素基因 2號 .外顯子存在 g／ t的多態(tài)性位點， 3號外顯子存在錯義突變（ r112c），且發(fā)現(xiàn)攜有該突變術(shù)體的血漿脂聯(lián)素濃度顯著降低。而 2 號外顯子 g／ t 的多態(tài)性與血漿脂聯(lián)素濃度及肥胖均無相關(guān)性。 體內(nèi)外研究表明， tzds可誘導(dǎo)脂聯(lián)素基因表達和蛋白分泌。 第 14 頁 共 28 頁 tzds 可顯著增加伴有胰島素抵抗的患者和嚙齒動物血漿脂聯(lián)素濃度，而并不影響體重。 tzds 可使 肥胖鼠脂肪組織中降低的脂聯(lián)素水平恢復(fù)正常或高于正常。 tzd 衍生物可呈劑量和時間依賴的 o 方式增加 3t3l1細胞中脂聯(lián)素 mrna的表達和蛋白分泌。現(xiàn)已明確 tzds 是通過激活脂聯(lián)素的啟動子而發(fā)揮上述效應(yīng)。胰島素抵抗狀態(tài)下，脂肪源性 11tnf— a 生成增加 .tnf— a可抑制脂聯(lián)素的啟動子活性，降低脂聯(lián)素的表達。 tzds 可拮抗 tnf— a對脂聯(lián)素啟動子的抑制效應(yīng)，增加脂聯(lián)素的表達，改善胰島素抵抗。 （六）胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白基因剔除研究的啟示 基因剔除技術(shù)的基本原理是利用活細胞基因組 dna 可與外源 dna序列發(fā)生同源重組的特性，對預(yù)先選擇的基因進行定點修飾達到改變基因組某一基因的目的。其特點是把外源基因引入基因組 dna 的特定片段上，被擊中的基因或引入的新基因會隨基因組 dna的復(fù)制而穩(wěn)定復(fù)制，因而可在活體內(nèi)對某一基因的功能進行研究。組織選擇性剔除系統(tǒng)的建立為研究某一基因的組織特異性功能提供了有力手段?；蛱蕹夹g(shù)以及特定組織基因剔除 .為了解胰島素信號系統(tǒng)中一些主要蛋白分子的功能提供了前所未有的條件 .對理解胰島素抵抗及 2 型柵尿病的發(fā)生機制有重要啟示。 （ insr）剔除胰 島素必須與其特異性受體結(jié)合 第 15 頁 共 28 頁 才能發(fā)揮生物效應(yīng)?；蜊诔芯匡@示， insr 基因純合突變鼠（ insr/）宮內(nèi)發(fā)育正常 .吮乳后便出現(xiàn)嚴重的柵尿病酮癥酸中毒，血三酰甘油（ tg）和游離脂肪酸（ ffa）升高，肝臟脂肪變性，肝糖原含量減少 o生長遲滯，骨骼肌萎縮。脂肪細胞的分化及數(shù)日基本正常 .但細胞內(nèi)脂質(zhì)含量顯著降低。由于這些嚴重的代謝紊亂， insr/鼠多在出生后 1 周內(nèi)死亡。證明胰島素生理效應(yīng)完全缺乏，具嚴重后果。 12而雜合突變鼠（ insr/）表型正常，并無明顯的胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)缺陷。也有發(fā)現(xiàn) insr/鼠 46月齡時出現(xiàn)胰島素水平升高和胰島素抵抗 .但也只有 lo％發(fā)展為糖尿病，后者可能與遺傳背景有關(guān)。這一結(jié)果與人類胰島素受體生理學特性相符 o 因為靶細胞膜上的胰島素受體只需 10％～ 20％與胰島素結(jié)合，即足以發(fā)揮最大生理效應(yīng)。 在骨骼肌特異性 insr 剔除（ mirk0）鼠 .盡管骨骼肌中胰島素刺激葡萄糖攝取受損，出現(xiàn)體脂增加， tg 和 ffa 水平升高，但血糖、血清胰島素及糖耐量均正常。這提示骨骼肌胰島素抵抗有助于 2 型糖尿病相關(guān)的脂代謝異常的形成，而與胰島素相關(guān)的糖代謝的調(diào)節(jié)可能較人們以前認識的更為復(fù)雜。通常 運動能促進骨骼肌對葡萄糖的攝取，提高胰島素的敏感性。安靜狀態(tài)下，mirko鼠骨骼肌對 2脫氧葡萄糖（ 2dg）的攝取正常，且肌糖原含量及糖原合成酶活性亦正常，但對胰島素的刺激無反應(yīng)。單純 第 16 頁 共 28 頁 運動以及運動加上胰島素均能增加 mirko 鼠骨骼肌對 2dg 的攝取，且單純運動就能增加糖原合成酶活性，而單純胰島素并不能使糖原合成酶活性增加。這表明骨骼肌中 insr 的正常表達并非運動促進葡萄糖攝取和增加糖原合成酶活性所必需的。 選擇性剔除小鼠 b 細胞的 insr 后，在葡萄糖刺激下，第一時相的胰島素分泌完全缺失，而對精氨酸 刺激仍有反應(yīng)，酷似 2型糖尿病中的 b細胞缺陷。這種特征也見于臨床上由于 13 胰島素受體遺傳性缺陷而發(fā)生嚴重胰島素抵抗的患者，其對葡萄糖刺激下的急性胰島素分泌反應(yīng)也缺乏。上述專一 b細胞胰島素受體剔除小鼠葡萄糖所誘發(fā)的第 2 相胰島素分泌也較為遲鈍，隨著鼠齡增加，糖耐量逐漸減損，不過不出現(xiàn)明顯的糖尿病。這一研究表明完整的胰島素信號系統(tǒng)為 b細胞本身分泌胰島素功能所必需，同時提示 b細胞水平的胰島素抵抗日久也會引起胰島素分泌下降，從而有可能以一元論：胰島素抵抗來解釋 2型糖尿病的發(fā)病機制及自然病程。 也有 研究選擇性剔除小鼠肝臟的 insr， 2個月后出現(xiàn)嚴重的胰島素抵抗， igt 及對外源性胰島素抵抗。但到 4 月齡時，空腹血糖恢復(fù)正常。這表明單純的肝臟胰島素抵抗足以導(dǎo)致葡萄糖代謝的嚴重紊亂，但并不一定形成空腹高血糖或糖尿病。 （ ptpase）剔除 ptpase能使 insr脫磷酸化，抑制酪氨酸激酶活性，減弱胰島素的效應(yīng)。蛋白酪氨酸磷 第 17 頁 共 28 頁 酸酶 1b（ ptplb）基因剔除后，小鼠血糖輕度下降，胰島素濃度較野生型（ ptp1b+/+）降低一半。純合子鼠（ ptplb/）對胰島素的敏感性增加，胰島素刺激后 .肝臟和肌肉組織 insr 酪氨酸磷酸化增強。 ptplb/鼠和雜合子（ ptplb+/）鼠均能抵抗高脂飲食引發(fā)的體重增加，并保持胰島素的敏感性。且發(fā)現(xiàn) ptplb/鼠體重顯著減輕，并伴有基礎(chǔ)代謝率的提高和總能量消耗的增加，這種減肥效應(yīng)是由 14 于脂肪細胞體積明顯減小，而數(shù)目并無改變。進一步研究發(fā)現(xiàn)， ptplb/鼠的增敏效應(yīng)具有組織特異性，它可增加骨骼肌對葡萄糖的攝取，但對脂肪組織無明顯影響。由此提示 ptplb在調(diào)節(jié)胰島紊敏感性和能量代謝中發(fā)揮重要作用，這也為 2 型糖尿病和肥胖的治療提供了潛在的 新靶點。 （ irss）剔除口前已發(fā)現(xiàn)至少 9 種 irss，其巾與胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)密切相