【文章內(nèi)容簡介】 標本的采集要盡量減少上呼吸道正常菌群干擾 ? 應在用藥前或停藥 1天后留取標本 。 泌尿道標本細菌培養(yǎng) ? 應在用藥前或停藥 5天后留取標本 , 并使尿液在膀胱內(nèi)停留 6～ 8h以上 。 ? 盡量避免或減少尿道口正常菌群干擾 。 ? 清潔中段尿 、 導尿?qū)Ч苣?、 經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液 ， 送檢標本以晨起第一次尿液為佳 ? 尿量不宜太多 ， 試管塞子與尿液不應直接接觸 ? 留取導尿管尿要排空導尿管內(nèi)陳舊尿液 ， 倘留置尿管超過三天應避免采用 。 ? 標本采集后立即送檢 ， 不能立即送檢者 ， 可暫存 4℃ 冰箱 ， 但保存不超過 8h 糞便標本的培養(yǎng) ? 應在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集 ， 稀便不少于 1ml， 固體便不少于 1克 ，無便患者可用直腸拭子采集標本 。 ? 要挑取含膿 、 黏液 、 血等病理改變或水樣糞便送檢 。 直腸拭子采樣量要足夠 ， 拭子上肉眼應可見糞便 。 ? 注意事項： ⑴ 雖然糞便標本本身含很多細菌但也要用無菌容器 。 ⑵ 厭氧細菌 （ 難辯梭菌 ） 培養(yǎng)的標本應盡量減少與空氣接觸 。 ⑶ 注意挑取膿血便或粘液便做培養(yǎng) ⑷ 要進行分區(qū)劃線 。 如圖所示 。 分泌物的培養(yǎng) 1. 對開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物 、 扁桃體 、 外耳道 、 手術(shù)后切口 、 導管治療感染 、 瘺管內(nèi)膿液 、 生殖道分泌物等均屬于開放性病灶 。 應先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌 ， 去除舊的分泌物 ， 用滅菌拭子采集病灶深部的分泌物 ， 也可取感染部位下的組織送檢 。 2. 閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫 、 肺膿腫 、 肝膿腫 、 腹腔膿腫 、 盆腔膿腫等 ， 對封閉的膿腫常采用穿刺或引流的的方法采樣 ， 應在用藥前采集 ， 應注意膿液的氣味 、 性狀 、 顏色注意厭氧菌存在的可能 。 不能及時送檢應應用輸送培養(yǎng)基 。 膿液標本 要盡量避免病灶表面細菌污染 。 開放性膿腫 ， 采樣前無菌鹽水沖洗傷口 ， 拭去表面污染膿液 ， 挑取病灶深部膿液；封閉性膿液 ， 嚴格病灶皮膚或黏膜表面的消毒后用無菌干燥注射器穿刺抽取 ， 置無菌試管內(nèi)送檢 ， 或切開排膿時用無菌拭子采集深部膿液 。 厭氧菌和傷口標本 ? 厭氧菌標本 隔絕空氣 氧對厭氧菌有毒性作用 液狀標本應用注射器抽取密封送檢 分泌物標本最好床邊采集床邊接種；另置厭氧環(huán)境送檢（輸送培養(yǎng)基） ? 傷口標本 在傷口切開排膿時留取標本 不能在傷口消毒清洗后留取標本 盡量采集傷口深部的膿汁送檢 腦脊液標本 ? 直接涂片：革蘭染色、抗酸染色、印度墨汁染色 ? 無菌采集技術(shù)：避免標本污染及患者被感染 ? 病毒培養(yǎng)標本：置 4 ℃ 保存 ? 分枝桿菌培養(yǎng)標本： 2mL以上，置 4 ℃ 保存 ? 細菌培養(yǎng)標本置 35 ℃ 保存 ? 種類和環(huán)節(jié)多 （ 細菌鑒定 、 藥敏 、 培養(yǎng)基 、 生化管 、 儀器 、 稀釋液 ） ? 涉及知識面廣 ? 復雜性高 ? 需要強烈的責任感 四、微生物試驗分析中質(zhì)量控制 常規(guī)試驗的質(zhì)量控制 天天做（質(zhì)控菌株） ? 觸酶試驗： 3％ H2O2每三天更換一次 ? 血漿凝固酶試驗：人血漿或商品乳膠試劑 ? 氧化酶試驗： 1％鹽酸四甲基對苯胺水溶液浸泡厚濾紙，室溫吹干壓成小紙片，置含干燥劑容器－ 20℃ 保存，或買商品制劑 ? β －內(nèi)酰胺酶：頭孢硝噻吩 (Nitrocefin)為底物，適于測試嗜血桿菌、淋球菌、卡他莫拉菌、腸球菌 ? 革蘭染色：革蘭陽性菌染成紫色；革蘭陰性菌染成紅色；另涂片厚度、染色和脫色時間、染料沉渣等也影響染色質(zhì)量 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 ? 一般性狀：① 外觀： 透明、清亮、無混濁、無沉淀，顏色符合要求，表面濕潤但無水汽、平整、光潔無凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻。 ② 厚度 ： 一般厚度在 3mm，但 MH平板厚度 ≥ 4mm。斜面的長度 ≤ 試管長度的 2/3。 ③ pH是細菌生長的重要條件之一，合格培養(yǎng)基的 pH應在規(guī)定值上下 。 ? 無菌試驗： 新制備或新買的培養(yǎng)基在使用前要隨機抽取一定數(shù)量的樣品作無菌試驗。 購買的培養(yǎng)基要有質(zhì)量保證如合格證明等文件；若無質(zhì)量保證需檢測相應的性能。 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 ? 細菌生長試驗： 所有的培養(yǎng)基在使用前還必須做細菌生長試驗以測定培養(yǎng)基性能是否符合要求。標準菌株分 2種：一種是已知的可在某種培養(yǎng)基上生長并產(chǎn)生典型生物學性狀的，對培養(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陽性反應的菌株；另一種是用已知的不能在某種培養(yǎng)基上生長或?qū)ε囵B(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陰性生化反應的菌株。如血瓊脂平板：乙型溶血性鏈球菌生長， β 溶血；甲型鏈球菌， a溶血；巧克力瓊脂平板：流感嗜血桿菌生長良好；中國藍瓊脂平板和 SS瓊脂平板：革蘭陰性菌生長，革蘭陽性菌不生長。 試劑質(zhì)控 臨床微生物實驗室常用的試劑包括染色液 、 診斷血清以及各種生化反應試劑等 。 染色液及染色方法質(zhì)量控制： 購買的或配置的染色液 ， 每次需做好相關的記錄 ， 如操作者和開瓶日期等；還要進行染色步驟質(zhì)控 ， 如革蘭染色在一張玻片上同時涂有金葡菌和大腸桿菌 ， 以保證染色性判斷準確無誤 。 常用生化試劑的質(zhì)控： 隨著細菌鑒定儀和快速微量生化鑒定板條的普及 ， 臨床微生物檢驗常用的生化試劑種類日趨減少 ， 應注意在用試劑在貯存時的避光 、 冷藏等要求 ， 保證試劑的穩(wěn)定性 。 不要使用過期的試劑 。 診斷血清的質(zhì)控： 診斷血清是一種重要的細菌鑒定試劑 ， 應從有資質(zhì)的生產(chǎn)單位購買 。驗收時必須看清生產(chǎn)批號 、 血清效價 、 透明度與色澤 。 試驗中應注意無菌操作 ，避免細菌污染 。 要經(jīng)常檢查貯存在 4℃ 冰箱中的各種血清 ， 若發(fā)現(xiàn)混濁 ， 出現(xiàn)絮狀 ，應停止使用 。 為保證血清凝集反應結(jié)果準確 ， 應每 3個月對血清進行一次質(zhì)控 。 不要使用過期的血清 。 紙片藥敏試驗的室內(nèi)質(zhì)控 ? 基礎質(zhì)控：連續(xù)做 30天，如失控超過 3次還需繼續(xù)，如失控低于 3次可改為每周 1次 ? 糾控：每周質(zhì)控中發(fā)生失控應糾控，方法：連續(xù) 5天，每天 1次，每次重復 5個紙片，如找到明確失控原因，可立即改為每周 1次，否者繼續(xù) ? 4℃ 冰箱保存一周的用量 ? 藥物敏感試驗是臨床微生物檢驗的重要步驟之一，其結(jié)果正確與否涉及治療效果的好壞。 儀器的質(zhì)量控制 ? 按儀器說明規(guī)定用標準菌株定期對不同批號的試劑進行質(zhì)控 ? 對冰箱、二氧化碳孵箱、普通孵箱、水浴箱等基本設備的每日溫度、氣體濃度的監(jiān)控記錄；顯微鏡、細菌鑒