【文章內(nèi)容簡介】 的監(jiān)控下進(jìn)行，污染單元的數(shù)量必須和灌裝試驗?zāi)M的時間和活動相一致。使用 攝像機(jī)記錄 可以幫助確認(rèn)人員操作對于灌裝實驗中的無菌工藝沒有負(fù)面的影響； ? 任何被污染的單元都被認(rèn)為是不好的且需要調(diào)查的。相關(guān)的染菌必須鑒定出其 種系 ，必須調(diào)查污染的可能原因。 ? 無論灌裝運行批量多大，只要模擬運行中發(fā)現(xiàn)了污染，就必須認(rèn)為存在著潛在的無菌保證問題。灌裝試驗的總數(shù)和被污染的數(shù)目沒有直接比例關(guān)系。 測試結(jié)果 必須可靠且 可以 重復(fù)的表明 無菌工藝 操作生產(chǎn)的產(chǎn)品是無菌的。在合理設(shè)計的設(shè)施內(nèi)的當(dāng)代無菌工藝操作被證明可以達(dá)到 零污染率， 且一般不會導(dǎo)致培養(yǎng)基灌裝試驗被污染。 推薦的可接受標(biāo)準(zhǔn)： ? 對于任何批量的大小，灌裝試驗中間斷的發(fā)生微生物污染應(yīng)意味著存在低級別的污染問題，是必須調(diào)查的。對于一條生產(chǎn)線上重復(fù)發(fā)生試驗污染事故，無論是否符合接受標(biāo)準(zhǔn)，都是一個信號表明無菌工藝生產(chǎn)線的不好趨勢，必須確認(rèn)問題、改正和再驗證。 ? 模擬灌裝試驗的可接受標(biāo)準(zhǔn)允許有少量的污染，這并不意味著無菌產(chǎn)品的批號中可以存在著非無菌單元。（美國食品藥品化妝品法案 section301a,：禁止制造商出售任何非無菌制劑產(chǎn)品）。 ? 只有書面規(guī)程要求市售產(chǎn)品批號 必須在相同方法處理的情況下發(fā)生的灌裝試驗失敗可以被放棄考慮。對于這樣的情況必須有支持的文件和合理的解釋。 灌裝數(shù)量 可接受污染量 處理措施 ﹤ 5000瓶 0 調(diào)查后重新驗證 5000~10000 1 調(diào)查，必要時重新驗證 2 調(diào)查后重新驗證 ﹥ 10000 1 調(diào)查 2 調(diào)查后重新驗證 ?過濾是藥品溶液無菌處理的常用方法。無菌級過濾器必須驗證可以從工藝流中重復(fù)去除活的微生物來獲得無菌液體。無菌過濾器的孔徑應(yīng) ≤，可以使用一級或多級過濾器。無菌過濾驗證中必須包括模擬最差生產(chǎn)條件下的 微生物挑戰(zhàn)試驗 和 過濾器完整性測試 。應(yīng)選擇代表最差情況的 生物指示菌 評詁其去生物載量的能力， 微生物挑戰(zhàn)試驗 常用的指示菌為 缺陷假小單胞菌（ Pseudomonas diminuta ATCC19146)，它的直徑為 。滅菌前產(chǎn)品的生物載量必須檢測以確定潛在污染微生物的趨勢特征。 ?挑戰(zhàn)試驗所需生物指示菌的濃度至少為 107CFU/ cm2 （ 則驗證所需指示菌數(shù)量＝過濾器濾膜有效表面積 107CFU/ cm2 ），使用此濃度的 目的是為實際生產(chǎn)提供一個安全界限。 因為過濾器膜上通常有些孔徑比一般孔徑要大，有可以使微生物通過的風(fēng)險，此風(fēng)險隨微生物數(shù)量的增加而增大，因此挑戰(zhàn)試驗的微生物數(shù)量非常重要。 ? 直接在產(chǎn)品中使用生物指示菌過濾并培養(yǎng)，雖然是最好的方法，但是如果藥物本身具有抗菌作用或是在油性配方中則會導(dǎo)致錯誤的結(jié)論。只要有充分的理由，過濾器對藥物制劑配方的有效性可以使用合適的替代方法來評詁，但替代產(chǎn)品不能含有抗菌成分，且模擬的工藝和生產(chǎn)條件必須相同。任何使用與實際產(chǎn)品及工藝條件的模擬物所產(chǎn)生的任何分歧都必須進(jìn)行合理的解釋。 ? 可以影響過濾器性能的因素包括： ? 被過濾物質(zhì)的黏度和表面張力； ? PH值 ； ? 被過濾物質(zhì)或配方組分和過濾器的相容性； ? 過濾壓力； ? 過濾速度； ? 最大使用時間； ? 過濾溫度； ? 滲透性（重量滲透濃度表示）； ? 液壓減震效果。 ? 在設(shè)計無菌過濾驗證方案時說明過濾器所允許的極端工藝參數(shù)非常重要，一旦過濾驗證過于復(fù)雜，超出了使用者的測試能力，就必須 委托測試 或交由 濾器制造商 測試。但是濾器使用者必須審核過濾驗證報告來確保其達(dá)到工藝的用途，其數(shù)據(jù)必須與使用者的產(chǎn)品和生產(chǎn)條件相一致（因為濾器的性能在不同條件下對不同的產(chǎn)品有很大差異）。 ? 一旦過濾器被驗證通過后，就必須保證實際生產(chǎn)過程中使用相同類別的過濾器。無菌過濾器必須在 每批 生產(chǎn)后更換，對那此可以重復(fù)使用的情況必須進(jìn)行合理解釋，其無菌過濾驗證必須包括最大的 可處理的批數(shù)。 ? 無菌過濾器應(yīng)進(jìn)行 完整性測試 ，其測試必須在過濾工藝 開始前和結(jié)束后 均應(yīng)進(jìn)行，以確認(rèn)其使用前和使用后是否有泄漏和穿孔，可以采用 前置流速 和 起泡點測試 來確認(rèn)其完整性。生產(chǎn)中過濾器完整性測試的規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)必須同細(xì)菌截留驗證研究產(chǎn)生的數(shù)據(jù)相一致。 /容器 /密封件的滅菌 ? 接觸無菌產(chǎn)品、無菌容器和密封件的設(shè)備表面都必須無菌?？拷鼰o菌產(chǎn)品的表面，只要有理由懷疑其有潛在污染的可能，都必須保持無菌狀態(tài)。這些關(guān)鍵設(shè)備的無菌處理工藝驗證與產(chǎn)品 /容器密封件的無菌工藝驗證同樣重要，最廣泛的方法是濕熱和干熱滅菌 。 ? 無菌工藝設(shè)備的無菌處理必須 每批 進(jìn)行。滅菌后，設(shè)備 /容器 /密封件的傳送、裝御都必須 嚴(yán)格按照無菌操作的方法進(jìn)行保護(hù)和維持產(chǎn)品的無菌狀態(tài)。 ? 驗證研究必須可以證明 滅菌周期的有效性 ，且必須進(jìn)行周期性再確認(rèn)。指定的裝載方式、生物指示劑和溫度探頭的位置必須在驗證中有記錄。生產(chǎn)批記錄的規(guī)定必須和驗證的裝載方法一致。 ? 必須評詁滅菌器或設(shè)備（使用 SIP的設(shè)備）內(nèi)部潛在的很難達(dá)到的位置（ 通常說的滅菌器的冷點區(qū) ），用空載和負(fù)載試驗來確認(rèn)其內(nèi)部不同位置的條件均勻性（如 溫度 和壓力），這些均勻性研究或參數(shù)布局研究必須使用校驗過的儀器進(jìn)行。 ? 熱穿透試驗必須使用已經(jīng)建立的 負(fù)載模式 進(jìn)行 評詁 ，以確定不能有效達(dá)到滅菌致死率的熱物質(zhì)穿透難度。用放置在溫度傳感器附近的生物指示劑來 評詁微生物致死率 與基于輸入熱量的預(yù)期致死率之間的關(guān)系。當(dāng)確定什么物質(zhì)特別難滅菌時必須注意過濾器 /泵和灌裝系統(tǒng)的滅菌。 ? 最終，這種滅菌方法的滅菌周期標(biāo)準(zhǔn)必須依據(jù)達(dá)到足夠滅菌能力的最低位置所需的時間來定。必須證明滅菌方法可以達(dá)到使 微生物下降至 106或是更好的情況 。 ? 滅菌器的驗證程序必須持續(xù)關(guān)注最冷點和最難穿透的部位，其合適性必須建立在確認(rèn) /維護(hù) /變更控制和周期性確認(rèn)（涵蓋微生物挑戰(zhàn)）的基礎(chǔ)上。變更控制程序必須足夠說明負(fù)載情況的變化或是滅菌器的結(jié)構(gòu)改變。 ? 無論是驗證還是日常監(jiān)控，滅菌監(jiān)控設(shè)備產(chǎn)生的數(shù)據(jù)可信性都是至關(guān)重要的。測定滅菌周期參數(shù)的設(shè)備都必須進(jìn)行日常校驗。必須建立書面的規(guī)程來確保這此設(shè)備處于校驗的有效狀態(tài)， FDA建議的規(guī)定如下： ? 熱法滅菌中使用的溫度和壓力測定儀器必須進(jìn)行日常周期性校驗，且間隔必須合適。驗證中使用的傳感器必須在驗證的前后 都校驗； ? 用于監(jiān)控滅菌器滅菌時間的儀器必須周期性校驗； ? 生物指示劑使用的微生物計數(shù)器必須確認(rèn)，且生物指示劑必須保存在合適的條件下； ? 如果供應(yīng)商的 COA的可靠性已經(jīng)通過合適的確認(rèn)程序確認(rèn)，則生物指示劑（如胞子試紙，玻璃安瓿）的 D值 可以在每批確認(rèn)后接受。否則必須對接種到滅菌物質(zhì)中的生物指示劑 D值進(jìn)行測定，或是采用供應(yīng)商提供的方法之外的其他方法來測定。D值測定可以使用獨立的實驗定完成。 ? 蒸汽純度測定的儀器必須校驗； ? 對于干熱滅菌隧道，測定傳輸帶速度的儀器（如傳感器和發(fā)送器）必須周期性校驗；內(nèi)毒性挑戰(zhàn)試驗必須由實驗室合適的配制和測定。 ?為了確保滅菌設(shè)備的人工控制，必須適當(dāng)?shù)脑O(shè)計設(shè)備，注意諸如 滅菌介質(zhì)可達(dá)性能、管道坡度、冷凝水完全排除 等性能。設(shè)備控制系統(tǒng)必須確保通過哪些安裝在可以快速反映工藝變化位置的測量儀器來實現(xiàn)。哪些滅菌器或 SIP操作中需要人工手動控制的閥門操作，都必須在制造規(guī)程和批記錄中記錄下來。 ?滅菌設(shè)備都必須進(jìn)行合適的維護(hù)以確保其連續(xù)和滿意的功能。滅菌器性能特性的日常評詁（如平衡時間對于確保滅菌單元始終按照驗證條件進(jìn)行連續(xù)的運行）是非常重要的。 八、實驗室控制 ?無菌工藝中環(huán)境監(jiān)控程序是非常重要的實驗室控制之一。此程序不但為無菌工藝環(huán)境質(zhì)量提供了有意義的信息，還為相鄰的潔凈區(qū)域提供了環(huán)境變化的趨勢數(shù)據(jù)。環(huán)境監(jiān)控必須可以及時的確認(rèn)潛在的污染源，允許在產(chǎn)品被污染前實施整改措施。 ?潔凈室內(nèi) 空氣和表面質(zhì)量 的 評詁必須從書面定義好的規(guī)程和科學(xué)的測試方法開始。監(jiān)控程序必須 涵蓋 所有的生產(chǎn)班次，包括空氣、地板、墻壁和設(shè)備表面及那此可能接觸無菌物料、容器和密封件的關(guān)鍵表面。取樣點位置必須以書面程序說明，取樣時間、頻率和位置 都必須在無菌工藝設(shè)施的監(jiān)控環(huán)境內(nèi)用科學(xué)合理的方法進(jìn)行。 取樣量大小 必須足以使環(huán)境污染的監(jiān)測最優(yōu)化，以滿足其符合規(guī)定的潔凈級別。 ? 書面程序中說明微生物 最大風(fēng)險的位置 非常重要。監(jiān)控關(guān)鍵區(qū)域的微生物質(zhì)量來決定灌裝和封口操作中是否 保持了無菌狀態(tài) 是尤為重要的?？梢栽谥匾牟僮骰顒踊蚴巧a(chǎn)中產(chǎn)品暴露位置進(jìn)行 空氣和表面取樣 。與無菌產(chǎn)品接觸的關(guān)鍵表面必須 在操作過程中始終保持無菌 。當(dāng)設(shè)定關(guān)鍵取樣點時，必須考慮這些點在工藝中的 污染風(fēng)險 ，包括 裝備困難、工藝操作持續(xù)時間、中斷影響 等因素。關(guān)鍵表面的 取樣操作 必須按照無菌工藝運行的要求來防止直接接觸無菌的表面。關(guān)鍵區(qū)域檢出微生物污染的結(jié)果 不一定 要 成批拒收 ，必須 立即 對操作運行信息和數(shù)據(jù)進(jìn)行調(diào)查，必須注意有可能存在的極低概率的 假陽性 情況發(fā)生。 ? 環(huán)境監(jiān)控檢測方法不可能一直有效的檢測出取樣區(qū)域的微生物，特別是那些低水平污染很難監(jiān)測到的區(qū)域。由于 假陰性可能發(fā)生，連續(xù)的微生物生長檢測結(jié)果只是一種不利趨勢。在給定時間內(nèi)，污染發(fā)生率的增加是一樣或是更加值得關(guān)注的趨勢。在缺少任何不利趨勢的信息前提下，單一超出 行動限 的情況都必須 進(jìn)行調(diào)查和評詁 ，并決定是否需要采取任何合適的 補救措施 。在所有的潔凈級別中，都必須在 發(fā)生不良趨勢 時采取適當(dāng)?shù)难a救措施。 ? 所有環(huán)境監(jiān)控點的位置都必須在 SOPs中詳細(xì)描述，以確?？梢栽谙嗤牡攸c重復(fù)操作。書面規(guī)程必須涵蓋以下信息： ? 取樣頻率； ? 取樣時間（如運行到什么階段進(jìn)行取樣）； ? 取樣過程所用的時間； ? 取樣量（如表面積、空氣體積）； ? 特殊的取樣設(shè)備和技術(shù)； ? 警告限和行動限； ? 超出警告限和行動限后的合適反應(yīng)； ? 微生物取樣標(biāo)準(zhǔn) 必須根據(jù)取樣點位置和操作的相關(guān)性來確定，這個標(biāo)準(zhǔn)必須可以確保整個無菌制造設(shè)施內(nèi)的微生物受控。可以 參考 歷史數(shù)據(jù)庫、培養(yǎng)基灌裝試驗、潔凈區(qū)確認(rèn)和清潔衛(wèi)生處理研究的數(shù)據(jù)來建立這個標(biāo)準(zhǔn)?？梢允褂孟囝愃频倪\行數(shù)據(jù)來設(shè)定 警告限和行動限 ，尤其對那些新的運行操作非常適用。 ? 環(huán)境監(jiān)控的數(shù)據(jù)必須為制造環(huán)境的質(zhì)量提供信息。每個單獨的測試樣品結(jié)果都必須與警告限或行動限進(jìn)行比較，分析其有效性 。使用檢測結(jié)果的 平均值會掩蓋 不可以接受的位置的情況。達(dá)到警告限的數(shù)據(jù)必須立即 采取行動 ，達(dá)到行動限的結(jié)果必須立即 采取調(diào)查 。必須建立書面的程序，詳細(xì)描述審核的頻率和采取的行動。質(zhì)量控制部門必須對環(huán)境和人員監(jiān)控數(shù)據(jù)進(jìn)行日常短期監(jiān)督（如 每天、每周、每月、每季 ）和長期趨勢分析。 ? 趨勢分析報告必須包括 每個地點、每個班次、每個房間、每個操作人員和其他參數(shù)產(chǎn)生 的數(shù)據(jù)。質(zhì)量控制部門必須負(fù)責(zé)對任何超標(biāo)進(jìn)行調(diào)查并編寫相關(guān)的數(shù)據(jù)報告（如一年內(nèi)指定的微生物調(diào)查研究）并確定后續(xù)合適的整改措施。微生物 種類的明顯變化 必須考慮進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控數(shù)據(jù)的 重新審核 。 ? 書面操作程序必須定義進(jìn)行周期通行監(jiān)控結(jié)果、趨勢分析和調(diào)查結(jié)果給最高負(fù)責(zé)經(jīng)理的程序系統(tǒng)。 ?消毒劑 /消毒方法的 適應(yīng)性、有效性和局限性 都必須評詁。這些消毒劑 /消毒方法的有效性必須根據(jù)其確保潛在污染可以徹底從表面去除的能力大小來測定。 ?為了避免引入新的污染消毒劑 必須無菌 ，且存放在適當(dāng)?shù)模?無菌）容器 中并在書面程序預(yù)先規(guī)定的 最長時間 內(nèi)使用。日常使用的消毒劑必須可以有效的抑制那些菌叢恢復(fù)的實驗室內(nèi)常態(tài)的微生物生長。許多 常見的消毒劑對孢子無效 （如70%的異丙醇對芽孢桿菌 Bacillus upp的芽孢無效）。所以有效的消毒程序必須包括一個 能殺孢子的物質(zhì) ，當(dāng)發(fā)現(xiàn)環(huán)境中存在孢子有機(jī)體時，必須按照書面規(guī)程的方法消毒。 ?消毒操作程序必須詳細(xì)描述（如 配制方法、使用頻率和接觸時間 ）以確保能夠重復(fù)。一旦建立了方法，必須使用日常監(jiān)控程序來 評詁其有效性和充分性 。一旦 發(fā)現(xiàn)微生物相關(guān)的不良趨勢，必須調(diào)查確認(rèn)潔凈室內(nèi)分離到的微生物對潔凈室內(nèi)使用的消毒劑的敏感性。 ?可接受的監(jiān)控微生物學(xué)特性的環(huán)境包括： A、表面監(jiān)控 －－環(huán)境監(jiān)控涉及不同表面的微生物質(zhì)量取樣測試，如產(chǎn)品接觸的表面、地板、墻壁和設(shè)備表面都必須測試