【正文】 作，都必須在制造規(guī)程和批記錄中記錄下來。取樣點位置必須以書面程序說明，取樣時間、頻率和位置 都必須在無菌工藝設(shè)施的監(jiān)控環(huán)境內(nèi)用科學(xué)合理的方法進行。關(guān)鍵區(qū)域檢出微生物污染的結(jié)果 不一定 要 成批拒收 ，必須 立即 對操作運行信息和數(shù)據(jù)進行調(diào)查，必須注意有可能存在的極低概率的 假陽性 情況發(fā)生?？梢?參考 歷史數(shù)據(jù)庫、培養(yǎng)基灌裝試驗、潔凈區(qū)確認和清潔衛(wèi)生處理研究的數(shù)據(jù)來建立這個標準。 ? 趨勢分析報告必須包括 每個地點、每個班次、每個房間、每個操作人員和其他參數(shù)產(chǎn)生 的數(shù)據(jù)。許多 常見的消毒劑對孢子無效 （如70%的異丙醇對芽孢桿菌 Bacillus upp的芽孢無效）。每種設(shè)備都是測定一定體積內(nèi)的有機體數(shù)量，但是又都有優(yōu)點和缺點。做為方法驗證的一部分，質(zhì)量控制實驗室必須評詁培養(yǎng)基在什么情況下可以有效的獲得低級別的環(huán)境微生物。至少必須有規(guī)程來鑒別輔助區(qū)域環(huán)境內(nèi)（周期性檢測）發(fā)現(xiàn)的微生物種類，從而建立一個有效的數(shù)據(jù)庫來反映生產(chǎn)中可能存在的微生物數(shù)據(jù)庫，并證明清洗和消毒操作的持續(xù)有效性。 ? 外購的環(huán)境監(jiān)控培養(yǎng)基必須測試證明其可以用于培養(yǎng)微生物。對于任何位置的超標情況必須 進行調(diào)查，找出根源。 ? 根據(jù) ，無菌測試方法必須真實且可重復(fù)， USP71 171。 ? 無菌測試受到其檢測污染能力的限制，因為一般檢測樣品都比較少，如按照 USP的描述，統(tǒng)計學(xué)評詁表明無菌測試的取樣計劃“也只能在 10次 測試中， 9次 監(jiān)測到的污染率高達10%的批號”，進一步的解釋為：如果批量為 10000單元的生產(chǎn)中有 %的污染，則使用 20個 單元進行無菌測試時 有98%概率 的該批號會通過無菌測試。 ?在綜合考慮所有與產(chǎn)品制造和樣品測試相關(guān)的因素后，必須匯總成為書面的調(diào)查報告，涵蓋確切的結(jié)論和整改措施。當(dāng)無菌測試過程中發(fā)生偏差的時候，必須記錄、調(diào)查和補救。 ? 如果實驗室保留了這類的缺陷記錄，這樣的歷史數(shù)據(jù)可以降低對實驗室的懷疑，生產(chǎn)階段被污染的可能性會更大一些，反之確不一定正確。 F、生產(chǎn)歷史的調(diào)查 ? 該產(chǎn)品或是類似產(chǎn)品的制造歷史也必須作為調(diào)查的一部分進行審核。除了會延長無菌產(chǎn)品在關(guān)鍵區(qū)域的滯留時間，廣泛的干預(yù)會增加產(chǎn)品污染的風(fēng)險。一個設(shè)計優(yōu)良的維護正壓的并具有維護檢測和控制的隔離器，可以提供傳統(tǒng)無菌工藝所不能提供的優(yōu)勢，包括工藝中微生物更少污染的可能性。傳統(tǒng)系統(tǒng)、密封襯墊和封條都必須在維護規(guī)程中規(guī)定。 ? 密閉式隔離器（一般是固定大小而不是生產(chǎn)線房間）中可以允許有紊流。公司建立的最小壓差必須基于系統(tǒng)設(shè)計及其出口位置。 物料轉(zhuǎn)移 ? 傳遞窗口設(shè)計可以影響凈化隔離器維持完整性的能力。采用合適的規(guī)程清潔隔離器內(nèi)表面非常重要。例如4個對數(shù)級別的降低對于傳送低生物載量物質(zhì)，或是包裹好的與周邊潔凈室環(huán)境短暫接觸的無菌耗材都是適用的。如果證明環(huán)境被危害，所有可能由于泄漏影響的產(chǎn)品都必須 報廢 。例如，建議在出口監(jiān)控顆粒度來檢測任何不正常的結(jié)果。 A、從早期制造步驟開始的無菌工藝 ?一些產(chǎn)品在制成成品之前的一些或所有制造步驟中都使用了無菌工藝，而另一些產(chǎn)品，它們在某點之后就不能再進行無菌過濾了。操作中必須進行微生物和顆粒度的監(jiān)測。 ? 在模擬工藝中包括無菌原料藥或產(chǎn)品的儲存和在不同制造區(qū)域之間的轉(zhuǎn)運非常重要。這些產(chǎn)品往往在成品無菌測試結(jié)果出來前就已經(jīng)被制造商或是管理當(dāng)局放行用于別人治療。 06:24:2806:24:2806:24Saturday, March 4, 2023 ? 1乍見翻疑夢，相悲各問年。 06:24:2806:24:2806:243/4/2023 6:24:28 AM ? 1成功就是日復(fù)一日那一點點小小努力的積累。 上午 6時 24分 28秒 上午 6時 24分 06:24: ? 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 2023年 3月 上午 6時 24分 :24March 4, 2023 ? 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 :24:2806:24:28March 4, 2023 ? 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023年 3月 上午 6時 24分 :24March 4, 2023 ? 1少年十五二十時，步行奪得胡馬騎。 上午 6時 24分 28秒 上午 6時 24分 06:24: ? 沒有失敗，只有暫時停止成功！。 06:24:2806:24:2806:243/4/2023 6:24:28 AM ? 1以我獨沈久，愧君相見頻。在可能的情況下，可以在制造過程中使用密閉系統(tǒng)。研究還必須包括最差的情況，例如 最大 的 運行暴露時間 、 最多的操作人員數(shù)量 等等。 ? 產(chǎn)品的暴露工序或是與產(chǎn)品接觸面的操作（如無菌加連接）必須在 100級（ ISO5）單向氣流 的環(huán)境下進行。 附錄 的無菌工藝 ★ 本附錄的目的是為本指南提供補充信息，規(guī)范那些 CBER（ 生物制品審評和研究中心 ）或 CDER（ 藥品研究和評價中心 ）監(jiān)管的產(chǎn)品在制造工藝早期階段的無菌工藝，或那些由于不能進行成品除菌的情況下對整個制造工藝中都要求無菌的工藝。必須使用接觸平皿取樣來去除表面上的營養(yǎng)培養(yǎng)基。完整性可以由于 斷電 、閥門損壞、正壓不足、手套及接縫的破損 或其他的泄漏所影響。一般說 ,log4～ log6級別的降低是可以接受的。 凈化 ? 表面暴露 －－凈化規(guī)程必須確保所有隔離器表面全部暴露在化學(xué)試劑下。一個 10萬級（ ISO8） 背景的區(qū)域通常用于考察隔離器的設(shè)計和制造業(yè)的情形。必須使用有確認研究支持的可以達到這個目的的正壓差。 設(shè)計 ?有兩種無菌工藝隔離器：開放式和密閉式。手套、上裝和接縫必須每天檢查，并按照一個全面防護程序穿戴。（ ）。 ? 雖然干預(yù)和打斷操作一般都會在批記錄上記錄，但記錄方式有很多種。 E、生產(chǎn)記錄的審核 ? 必須審核完整的批生產(chǎn)記錄和批控制記錄來確認是否存在嚴重的失誤或是異?，F(xiàn)象影響到產(chǎn)品的無菌度。實驗室無菌區(qū)域的微生物的上升趨勢必須立即調(diào)查其原因，并整改。例如，如果是實驗室環(huán)境中 很少發(fā)現(xiàn)的微生物 ，那么生產(chǎn) 環(huán)境中被污染的 可能性 就很大；如果該微生物在實驗室和生產(chǎn)環(huán)境中都存在，最少也可以 表明 產(chǎn)品確實被污染了。 ?只有確定且書面記載的證據(jù)清楚的證明污染發(fā)生在測試過程中，方可以進行新的測試。 ? 進行無菌測試的培養(yǎng)基必須無菌且通過了促生長試驗。這樣的生產(chǎn)缺陷可能不會被發(fā)現(xiàn)。 ? 在證明其和傳統(tǒng)方法（如 USP方法）等效或是更好的前提下，可以在環(huán)境監(jiān)控、中控控制測試和成品放行測試中使用其他合適的微生物測試方法。用于環(huán)境監(jiān)控的微生物培養(yǎng)基必須驗證在一定的溫度和時間下，適合于檢測真菌（如酵母菌和霉菌）和細菌。一般情況下，環(huán)境趨勢的數(shù)據(jù)可以揭示出非受控或低級別受控區(qū)域的微生物污染了無菌工藝區(qū)域。因為可以監(jiān)測到那些降落在培養(yǎng)皿上的微生物，所以沉降菌檢測方法可以被作為定性或是半定量的空氣監(jiān)控方法。可以使用接受皿和擦拭法來進行這類試驗。 ?為了避免引入新的污染消毒劑 必須無菌 ，且存放在適當(dāng)?shù)模?無菌）容器 中并在書面程序預(yù)先規(guī)定的 最長時間 內(nèi)使用。必須建立書面的程序，詳細描述審核的頻率和采取的行動。 ? 所有環(huán)境監(jiān)控點的位置都必須在 SOPs中詳細描述，以確?？梢栽谙嗤牡攸c重復(fù)操作。當(dāng)設(shè)定關(guān)鍵取樣點時，必須考慮這些點在工藝中的 污染風(fēng)險 ，包括 裝備困難、工藝操作持續(xù)時間、中斷影響 等因素。 ?潔凈室內(nèi) 空氣和表面質(zhì)量 的 評詁必須從書面定義好的規(guī)程和科學(xué)的測試方法開始。 ?為了確保滅菌設(shè)備的人工控制，必須適當(dāng)?shù)脑O(shè)計設(shè)備，注意諸如 滅菌介質(zhì)可達性能、管道坡度、冷凝水完全排除 等性能。變更控制程序必須足夠說明負載情況的變化或是滅菌器的結(jié)構(gòu)改變。生產(chǎn)批記錄的規(guī)定必須和驗證的裝載方法一致。生產(chǎn)中過濾器完整性測試的規(guī)格標準必須同細菌截留驗證研究產(chǎn)生的數(shù)據(jù)相一致。只要有充分的理由，過濾器對藥物制劑配方的有效性可以使用合適的替代方法來評詁，但替代產(chǎn)品不能含有抗菌成分，且模擬的工藝和生產(chǎn)條件必須相同。無菌級過濾器必須驗證可以從工藝流中重復(fù)去除活的微生物來獲得無菌液體。在合理設(shè)計的設(shè)施內(nèi)的當(dāng)代無菌工藝操作被證明可以達到 零污染率， 且一般不會導(dǎo)致培養(yǎng)基灌裝試驗被污染。 ? 大數(shù)量的在線清除不應(yīng)該影響培養(yǎng)基灌裝試驗?zāi)M正常生產(chǎn)來檢測潛在的污染能力。如果 QC不負責(zé)具體檢查，也必須在這樣的檢查時現(xiàn)場監(jiān)督。選擇的培養(yǎng)基必須證明能夠促進 G＋、 G－、酵母菌和霉菌（以及 USP生物指示劑）的生長。一般性發(fā)生的中斷操作必須在日常模擬中涵蓋，那些不經(jīng)常發(fā)生的中斷操作可在周期性的模擬中確認。 ?研究設(shè)計應(yīng)考慮的要素： ? 生產(chǎn)線允許的最長時間范圍，可造成潛在污染的相關(guān)因素（如員工的疲勞）； ? 人員數(shù)量及操作活動； ? 每次運行中的常規(guī)中斷操作次數(shù)、類別和復(fù)雜程度以及非常規(guī)的中斷操作和干擾事件（如維護、停產(chǎn)、設(shè)備調(diào)整）； ? 設(shè)備的無菌裝配； ? 無菌分裝和凍干過程； ? 有代表性的無菌加料（如容器 /密封件和無菌組分的添加）和轉(zhuǎn)移操作的次數(shù)； ? 班次變化、中途休息和合適的更衣次數(shù)； ? 無菌設(shè)備連接 /斷開的類別； ? 無菌取樣操作； ? 生產(chǎn)線速度和構(gòu)造； ? 稱重；容器密封系統(tǒng)（如大小、類別、設(shè)備兼容性）； ? 書面規(guī)程中的無菌工藝相關(guān)的特殊限定（ 如 CIP指令 前的環(huán)境要求） ： ?在最初的確認時，至少應(yīng)進行 三次 連續(xù)且獨立的 模擬。生物載量和內(nèi)毒素載量必須在建立配方加工階段的時間限制的時候進行評詁。設(shè)備必須設(shè)計成容易拆御 /裝配 /清洗 /消毒或滅菌。對最后分裝好的產(chǎn)品的檢查中發(fā)現(xiàn) 任何被破壞 或 有缺陷 的 單個容器 必須檢出并被銷毀。 ? 橡膠密封件（膠塞和注射器活塞）在進行純蒸汽滅菌前的最初清洗水至少使用符合 USP最低內(nèi)毒素的純化水， 最后 沖洗水必須是注射用水。 /密封件 ?制備非腸道產(chǎn)品所使用的容器具 /密封件必須無菌、無熱源，其滅菌方法必須符合它們的材質(zhì)性質(zhì)，其滅菌的有效性必須驗證證明。后續(xù)采取的措施應(yīng)包括增加取樣、增加觀測、重新培訓(xùn)、再確認著裝程序、特殊情況下的人員重新調(diào)整、安排指定的人員離開無菌操作區(qū)域。 ? 無菌技術(shù)和無菌制造人員的要求同樣適用于進行無菌取樣和微生物測試的實驗室人員。 ?任何人在進入無菌操作區(qū)前必須接受如下培訓(xùn)內(nèi)容的培訓(xùn)： ? 消毒技術(shù)和更衣操作； ? 微生物學(xué)和衛(wèi)生學(xué)； ? 精制包裝行為準則； ? 非無菌藥物造成的病人安全性危害； ? 無菌制造區(qū)域內(nèi)的所有書面操作規(guī)程等。 ? 必須仔細定義和控制各房間之間的 動態(tài)過程 。必須控制產(chǎn)品暴露的時限，提供最高級別的環(huán)境控制，優(yōu)化工藝路線和防止低質(zhì)量空氣進入Class100的設(shè)備設(shè)計都是高度無菌確認的關(guān)鍵。 ? HEPA的 過濾效率 應(yīng)能夠截留 %的大于 。過濾器必須進行周期性更換。 ? 無菌操作間與其鄰近的無任何潔凈級別要求的房間必須始終保持 ≥?？梢杂娩浵窕蛘障裥问阶C明氣體流動的方向。 ? 無菌區(qū)域必須控制 ≥，在使用后必須在動態(tài)測試下符合 100級 要求。 ? 無菌工藝 的產(chǎn)品、容器 /密封件都必須事先 分別 用無菌方法處理，再于嚴格控制的環(huán)境下操作成最終的產(chǎn)品，其最終產(chǎn)品不能進行滅菌操作。 ? 本指南主要是針對無菌產(chǎn)品和生物制劑 產(chǎn)品的無菌工藝要求的 GMP指南 。 二、無菌制劑對廠房設(shè)施設(shè)備要求 ?對無菌工藝制劑的潔凈區(qū)必須有監(jiān)控微粒和微生物的設(shè)施； ?其潔凈廠房在使用前必須進行靜態(tài)測試合格，否則認為驗收不合格； ?其潔凈廠房的潔凈級別劃分必須以動態(tài)條件下測試的數(shù)據(jù)為準； ?必須用日常的動態(tài)數(shù)據(jù)監(jiān)控證明其潔凈級別始終如一。） ? 日常生產(chǎn)每班都應(yīng)進行無菌區(qū)顆粒度的監(jiān)測（ FDA無菌工藝 cGMP指南 建議 使用 遠程技術(shù) 來實現(xiàn)）。 ? FDA推薦直接臨近無菌工藝生產(chǎn)的支持區(qū)域在 動態(tài)條件 下至少應(yīng)達到 萬級（ ISO7）。 例如： cGMP (C) 作業(yè)在特定區(qū)域進行（無菌操作） 經(jīng)ＨＥＰＡ過濾器過濾的空氣向作業(yè)區(qū)供給 ? 常用氣體過濾的－－ 疏水性 材料－－ PTFE（聚四氟乙烯），使用中必須 干燥（應(yīng)防冷凝水的堵塞和微生物的生長）。（美國聯(lián)邦標準 209A和 209B指出： 如果