【正文】 HEPA的泄漏試驗和空氣流速測試均合格，則潔凈室的空氣潔凈度是不難達到的，此兩項運行檢驗比在含極少微粒的部位進行微粒計數(shù)測定的做法更有意義， 故其重要性不亞于粒子測定。 ? HEPA檢漏測試必須有完整的書面記錄備查，一旦發(fā)現(xiàn)氣溶膠光度計的讀數(shù) ≥%時表明有泄漏，應及時更換或維修，更換維修后必須重新測試。如：使用在線稱量裝置可減少重復的手動操作，使用 SIP滅菌處理預裝備的連接可減少滅菌操作，其他工藝路線的自動化操作可降低產(chǎn)品污染的風險。 ? 工藝設備和系統(tǒng)必須配備衛(wèi)生裝置和閥門。 ? 無菌操作之前和整個過程中必須避免著裝的意外污染（ 著裝的維持和控制）?？赏ㄟ^獲得 每天每個 操作工 手套的表面樣品，或者是每批生產(chǎn)的相關樣品來建立監(jiān)控程序。 ? 非腸道產(chǎn)品要求無熱源，因此必須有書面的規(guī)程和的規(guī)格標準來規(guī)定產(chǎn)品中每個組分的內(nèi)毒素可接受標準，任何內(nèi)毒素不合格的組分都必須拒不使用。 ?評詁去熱源工藝的有效性方法：向容器 /密封件中添加已知量的內(nèi)毒素，然后去熱源處理，再測定其殘留的熱源量，同時使用陽對照的方法計算內(nèi)毒素的回收率。對清洗滅菌的過程必須進行驗證，以確認這些物料上的內(nèi)毒素被完全去除。 ? 遞送裝置（如灌注裝置）的功能缺陷，使遞送的體積不一致，同樣可以導至產(chǎn)品質(zhì)量問題，必須采用合適的中控方法進行監(jiān)控。 ? 對設備內(nèi)表面的內(nèi)毒素可以采用高溫干熱滅活，或采用清洗程序去除內(nèi)毒素。如果過濾器可以提供微生物吸附的基底，必須確定和合理解釋其最多的使用次數(shù)。如 設備設施的改變、生產(chǎn)線構(gòu)造的變化、人員重大變化、環(huán)境監(jiān)控結(jié)果的異常、容器密封系統(tǒng)的變更、延期的關機或最終成品無菌檢查顯示產(chǎn)品被污染等都可引發(fā)對系統(tǒng)的再驗證； ?一旦灌裝試驗數(shù)據(jù)表明工藝不受控，必須對污染的起原和問題涉及面進行調(diào)查。 ?培養(yǎng)基灌裝試驗程序必須充分解釋生產(chǎn)期間的生產(chǎn)線速度范圍，每次培養(yǎng)基灌裝操作必須評詁一個生產(chǎn)線速度，必須對選擇的速度進行合理的解釋。如果促生長試驗失敗，模擬試驗中發(fā)現(xiàn)的任何污染的來源應進行調(diào)查，培養(yǎng)基灌裝試驗 必須立刻 重新進行。 ? 培養(yǎng)過后任何被破壞的單元必須和灌裝過程中損壞的單元一起計數(shù)，從最終計數(shù)中排除這些單元的決定都必須全面解釋，并在培養(yǎng)基灌裝報告中作為偏差解釋。使用 攝像機記錄 可以幫助確認人員操作對于灌裝實驗中的無菌工藝沒有負面的影響； ? 任何被污染的單元都被認為是不好的且需要調(diào)查的。 ? 模擬灌裝試驗的可接受標準允許有少量的污染，這并不意味著無菌產(chǎn)品的批號中可以存在著非無菌單元。應選擇代表最差情況的 生物指示菌 評詁其去生物載量的能力， 微生物挑戰(zhàn)試驗 常用的指示菌為 缺陷假小單胞菌（ Pseudomonas diminuta ATCC19146)，它的直徑為 。 ? 在設計無菌過濾驗證方案時說明過濾器所允許的極端工藝參數(shù)非常重要，一旦過濾驗證過于復雜，超出了使用者的測試能力，就必須 委托測試 或交由 濾器制造商 測試。這些關鍵設備的無菌處理工藝驗證與產(chǎn)品 /容器密封件的無菌工藝驗證同樣重要，最廣泛的方法是濕熱和干熱滅菌 。用放置在溫度傳感器附近的生物指示劑來 評詁微生物致死率 與基于輸入熱量的預期致死率之間的關系。必須建立書面的規(guī)程來確保這此設備處于校驗的有效狀態(tài)， FDA建議的規(guī)定如下： ? 熱法滅菌中使用的溫度和壓力測定儀器必須進行日常周期性校驗，且間隔必須合適。 ?滅菌設備都必須進行合適的維護以確保其連續(xù)和滿意的功能。 取樣量大小 必須足以使環(huán)境污染的監(jiān)測最優(yōu)化，以滿足其符合規(guī)定的潔凈級別。 ? 環(huán)境監(jiān)控檢測方法不可能一直有效的檢測出取樣區(qū)域的微生物，特別是那些低水平污染很難監(jiān)測到的區(qū)域?？梢允褂孟囝愃频倪\行數(shù)據(jù)來設定 警告限和行動限 ，尤其對那些新的運行操作非常適用。質(zhì)量控制部門必須負責對任何超標進行調(diào)查并編寫相關的數(shù)據(jù)報告（如一年內(nèi)指定的微生物調(diào)查研究）并確定后續(xù)合適的整改措施。所以有效的消毒程序必須包括一個 能殺孢子的物質(zhì) ，當發(fā)現(xiàn)環(huán)境中存在孢子有機體時，必須按照書面規(guī)程的方法消毒。 FDA建議每生產(chǎn)班次都在選擇的位置使用這些設備來評詁無菌工藝生產(chǎn)區(qū)域環(huán)境的好壞。暴露的環(huán)境必須預先防止漫干燥作用（如漫長的取樣時間或高的氣流速度）而妨礙微生物的生長。 ? 已知的基因鑒別方法比傳統(tǒng)的生物化學和形態(tài)學技術更加準確和真實的鑒別微生物的種類。促生長試驗必須每個配制批號都要進行。調(diào)查范圍必須涵蓋偏離的嚴重程度以及對趨勢數(shù)據(jù)的評詁。無菌測試 187。 ? 樣品可以代表整個批號和工藝條件是非常重要的，必須在以下情況下取樣： ? 在無菌工藝操作的開始、中間和最后取樣； ? 結(jié)合工藝中斷和干擾情況來考慮取樣。必須給予以下有說服力的證據(jù)進行調(diào)查： A、陽性菌的鑒別 ? 無菌測試中分離的微生物必須進行 種一級 別的 鑒別。如果任何的偏差被認為無菌測試的完整性有危害，必須立即終止試驗。當實驗室沒有很好的記錄情況下，廠家不能自然而然的認為實驗室缺陷對無菌測試失敗貢獻大于生產(chǎn)缺陷。以往的偏差、問題或是變更（如工藝、成分、設備的變更）都在考慮的因素之內(nèi)，都有可能是問題的根源所在。無菌失敗常常是由于不正?；蜓娱L的干預造成，所以這類行為被認為是無菌工藝中不受歡迎的事件。然而，操作者還是必須對潛在的操作污染風險保持警惕。 ?破損的手套或長袖手套是一個典型的污染源，也是構(gòu)成隔離器完整性缺陷的關鍵部位，必須建立預防性的維護程序。其他無菌工藝隔離器都是要求單向流空氣，來避免將無菌物料、產(chǎn)品和容器 /密封件暴露在紊流或停滯氣流中。隔離器和其他直接接觸界面（如干熱通道）的空氣平衡必須確認。不同能力的不同類別設計傳遞窗口的選用可以實現(xiàn)物料進出 隔離器。 ? 有效性 －－凈化方法必須使其內(nèi)表面無活微生物。 ? 確認凈化劑的濃度均勻性分布必須作為研究評詁的一部分， 化學指示劑 也可以被用作為定性工具來證明凈化劑已經(jīng)達到了指定的位置。 －－ 為了確保產(chǎn)品接觸的表面從 一開始每步 都是無菌 的，整個無菌工藝生產(chǎn)線必須全部滅菌。環(huán)境監(jiān)控使用的培養(yǎng)基不能暴露在凈化周期殘留物接觸下，可為這樣會抑制微生物的生長。在這樣的情況下，產(chǎn)品必須在無菌過濾后所有步驟中都保持無菌；而另一些產(chǎn)品最終不能無菌過濾時，其處方中的每個組分都必須分別無菌處理后再進行無菌混合。 操作結(jié)束后清場前 必須進行 表面微生物 檢測。例如，必須確保大宗轉(zhuǎn)運容器在指定時間內(nèi)的完整性。對于在產(chǎn)品使用前無法獲得最終無菌測試的情況，必須考慮使用額外的控制和測試手段。 :24:2806:24:28March 4, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 :24:2806:24Mar234Mar23 ? 1世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 , March 4, 2023 ? 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 3月 4日星期六 6時 24分 28秒 06:24:284 March 2023 ? 1一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。勝人者有力，自勝者強。 。 2023年 3月 4日星期六 6時 24分 28秒 06:24:284 March 2023 ? 1做前，能夠環(huán)視四周；做時，你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 , March 4, 2023 ? 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 B、細胞治療產(chǎn)品和細胞衍生物產(chǎn)品的無菌工藝 ? 細胞治療和一些細胞衍生物（如溶菌產(chǎn)物和半純化提取物）等代表了一類產(chǎn)品，這些 產(chǎn)品不能進行無菌過濾，必須在全部制造過程中進行無菌操作。這些研究必須涵蓋所有的產(chǎn)品操作步驟、添加操作和設計產(chǎn)品接觸面暴露在環(huán)境下的情況。在大批量的一些藥品或產(chǎn)品案例都必須已經(jīng)試驗無菌。傳統(tǒng)的無菌操作的警戒依然非常關鍵，要認識到隔離器手套的污染將導致產(chǎn)品的非無菌現(xiàn)象，因此必須采取一絲不茍的無菌技術標準（ ），包括操作 中合適的使用無菌工具。 －－ 必須建立環(huán)境監(jiān)控程序來確保日常隔離器中的空氣、表面和手套（上裝）可接受的微生物質(zhì)量和顆粒度水平。 ? 隔離器完整性泄漏一般導致新的凈化。凈化周期必須顯示額外殺滅的合適限度來確保 凈化方法的耐用性。隔離器常包括一個出口來排出內(nèi)部產(chǎn)品，這個出口是和外周環(huán)境相連的，必須保持足夠的正壓，并連續(xù)局部監(jiān)控確保維持隔離。 －－隔離器內(nèi)部的環(huán)境必須達到 100級（ ISO5），其周邊環(huán)境的級別必須基于其接口界面（如傳遞窗口）的設計和傳送進出隔離器的次數(shù)。 ? 具有開口的隔離器必須合理設計來確保與外部環(huán)境徹底的物理隔絕。 ?由于微生物通過手套上的孔道移動的可能性，以及手套完整性測試缺少高靈敏度測試方法，所以 FDA建議“ 固定手套內(nèi)表面的衛(wèi)生質(zhì)量必須注意，或者使用第二套薄手套 ”。然而，某個組件的泄漏可能會造成系統(tǒng)完整性的嚴重破壞。 ? 任何動力供應的中斷，即便是可能影響到產(chǎn)品質(zhì)量的 短暫中斷 ，都是生產(chǎn)偏差，都必須進行在生產(chǎn)批記錄上記錄。環(huán)境和人員監(jiān)控數(shù)據(jù)的審核以及其他支持系統(tǒng)（如 HEPA/HVAC、注射用水和蒸汽發(fā)生器）輸出的可接受數(shù)據(jù)的審核，以及設備（如批警告報告、不同過濾器的完整性）正常運行數(shù)據(jù)都是批放行決定所考慮的關鍵因素。 D、產(chǎn)品的生物載量 ? FDA建議審核產(chǎn)品生物 載量的變化趨勢，并考慮是否發(fā)生了生物載量的不良趨勢。 ? 實驗室無菌區(qū)域和人員的微生物監(jiān)控也可以提供有意義的趨勢信息。 B、實驗室測試和偏差記錄 ? 實驗室偏差的審核和調(diào)查的發(fā)現(xiàn)可以幫助 證明 實驗室是否為污染源的結(jié)論。只有可以造成微生物生長的明確原因被找出，方可認為最初的陽性測試結(jié)果無效。最終方法驗證研究證明該方法不會提供假陰性的測試結(jié)果。如果生產(chǎn)設施和控制水平明顯好于無菌測試的設施和條件，那么無菌測試的假陽性結(jié)果會干擾對于實際無菌產(chǎn)品的判斷。因此必須建立過濾前的生物載量限度。穩(wěn)定的方法可以產(chǎn)生一個數(shù)據(jù)庫，可以使數(shù)據(jù)比較和解釋更加合理。關鍵區(qū)域及其直接接觸區(qū)域人員的監(jiān)控必須包括微生物種類的常規(guī)鑒別。 C、被動空氣檢測（沉降菌檢測） －－ 本方法使用的是被動的空氣取樣器，如沉降皿（將含有營養(yǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿敞開放置在環(huán)境中）。 ?可接受的監(jiān)控微生物學特性的環(huán)境包括： A、表面監(jiān)控 －－環(huán)境監(jiān)控涉及不同表面的微生物質(zhì)量取樣測試，如產(chǎn)品接觸的表面、地板、墻壁和設備表面都必須測試。這些消毒劑 /消毒方法的有效性必須根據(jù)其確保潛在污染可以徹底從表面去除的能力大小來測定。達到警告限的數(shù)據(jù)必須立即 采取行動 ，達到行動限的結(jié)果必須立即 采取調(diào)查 。在所有的潔凈級別中，都必須在 發(fā)生不良趨勢 時采取適當?shù)难a救措施。與無菌產(chǎn)品接觸的關鍵表面必須 在操作過程中始終保持無菌 。環(huán)境監(jiān)控必須可以及時的確認潛在的污染源，允許在產(chǎn)品被污染前實施整改措施。 ? 蒸汽純度測定的儀器必須校驗； ? 對于干熱滅菌隧道，測定傳輸帶速度的儀器（如傳感器和發(fā)送器）必須周期性校驗；內(nèi)毒性挑戰(zhàn)試驗必須由實驗室合適的配制和測定。 ? 滅菌器的驗證程序必須持續(xù)關注最冷點和最難穿透的部位，其合適性必須建立在確認 /維護 /變更控制和周期性確認（涵蓋微生物挑戰(zhàn)）的基礎上。指定的裝載方式、生物指示劑和溫度探頭的位置必須在驗證中有記錄。 ? 無菌過濾器應進行 完整性測試 ，其測試必須在過濾工藝 開始前和結(jié)束后 均應進行，以確認其使用前和使用后是否有泄漏和穿孔，可以采用 前置流速 和 起泡點測試 來確認其完整性。 ? 直接在產(chǎn)品中使用生物指示菌過濾并培養(yǎng)，雖然是最好的方法，但是如果藥物本身具有抗菌作用或是在油性配方中則會導致錯誤的結(jié)論。 灌裝數(shù)量 可接受污染量 處理措施 ﹤ 5000瓶 0 調(diào)查后重新驗證 5000~10000 1 調(diào)查，必要時重新驗證 2 調(diào)查后重新驗證 ﹥ 10000 1 調(diào)查 2 調(diào)查后重新驗證 ?過濾是藥品溶液無菌處理的常用方法。 測試結(jié)果 必須可靠且 可以 重復的表明 無菌工藝 操作生產(chǎn)的產(chǎn)品是無菌的。 ? 制造商沒有必要擔心培養(yǎng)基灌裝對生產(chǎn)設施和設備造成潛在污染，因為如果培養(yǎng)基被正確處理、并立即清洗和消毒，甚至對設備灌裝系統(tǒng)進行滅菌，則后續(xù)產(chǎn)品的生產(chǎn)沒理由被影響 。 ℃ 內(nèi)； －－培養(yǎng)的時間不得少于 14天 ，如果灌裝的培養(yǎng)基連續(xù)使用兩個溫度點培養(yǎng)，則每個單元在每個溫度的培養(yǎng)時間不得少于7天 ； ?培養(yǎng)基單元是否被污染必須由具有合適教育背景、培訓和經(jīng)驗的人員負責進行檢查。 ： ?一般情況選用大豆酪蛋白消化液培養(yǎng)基，特殊情