【正文】 況選用厭氧菌培養(yǎng)基（硫代硫酸鹽培養(yǎng)基）。灌裝試驗的運(yùn)行持續(xù)時間必須考慮 實(shí)際操作時間和中斷操作的時間 。不應(yīng)該用產(chǎn)品灌裝試驗作為引入潛在污染操作行為的依據(jù)。不同產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)節(jié)的時間限制的建立必須有數(shù)據(jù)支持。 ? 設(shè)備的充分清洗、干燥和保存可以控制微生物的載量，防止內(nèi)毒素的載量增加。 ? 微生物能夠穿透的密封件不適合無菌產(chǎn)品的生產(chǎn)。 ?非腸道制劑所使用的塑料容器也必須是無熱源的。 ? 對熱穩(wěn)定而又不溶解的組分可采用干熱滅菌的方式，但必須小心的設(shè)計熱穿透和熱分布試驗。 ?一旦操作工表面微生物 超過 建立的 規(guī)定標(biāo)準(zhǔn) 或是 顯示出不利的趨勢 ，必須立即進(jìn)行調(diào)查。 ? 操作人員調(diào)任其他崗位應(yīng)經(jīng)過再培訓(xùn)和取得上崗資格，這種情況必須有充分的書面規(guī)程規(guī)定。 圖例： 1） .無菌操作的微生物污染控制 圖例 2） .環(huán)境區(qū)域劃分和正確的更衣事例 三、人員要求 ?質(zhì)量部門必須為制造操作提供常規(guī)的監(jiān)督以確保操作人員的無菌操作始終符合已建立的書面規(guī)程。 ? 無菌隔離系統(tǒng)的使用可以更好的保護(hù)產(chǎn)品不受人為污染 。 無菌環(huán)境的設(shè)計注意點(diǎn) /認(rèn)證 空調(diào)設(shè)備的設(shè)計／認(rèn)證 （ 原 FDA檢察官提出事項） ∫∫網(wǎng)框的間隙（無空氣滯留） ∫∫氣流監(jiān)控錄像的保管 ?總則： 無菌工藝要求盡可能的減少潛在的污染。 ? 對于替代的煙霧劑應(yīng)評詁其對微生物生長是否有促進(jìn)作用，以排除替代的煙霧劑 對 HEPA造成微生物污染的風(fēng)險。其中微生物挑戰(zhàn)性試驗用戶可以要求過濾器的制造商來完成，無菌用過濾器對數(shù)細(xì)菌減少量應(yīng)＞ 7。 ? 進(jìn)入無菌工藝操作間的更衣室和緩沖間的潔凈級別應(yīng)與無菌操作間的潔凈級別一致。 ? 應(yīng)有完整的測試記錄來分析證明其空氣流是否為單向，并且要有書面的結(jié)論（涵蓋對無菌操作和設(shè)備設(shè)計的影響評詁）。 ? 關(guān)鍵區(qū)域的操作活動包括：灌裝和封口之前及過程中的無菌物料的操作，如無菌連接和無菌組分的添加。 ? 技術(shù)框架－－本文的無菌工藝和終端產(chǎn)品滅菌工藝有本質(zhì)上的區(qū)別： ? 以 終端滅菌工藝 的產(chǎn)品在高質(zhì)量的環(huán)境下進(jìn)行灌封，但此種產(chǎn)品及其生產(chǎn)環(huán)境、容器和密封系統(tǒng)并非完全無菌，最終產(chǎn)品需要進(jìn)行熱壓或幅射滅菌。 ? 本指南應(yīng)結(jié)合“人用藥 /獸用藥新藥申請－無菌工藝驗證文件遞交指南”一起指導(dǎo)工業(yè)企業(yè)的無菌工藝生產(chǎn)。 潔凈 級別 ISO對 應(yīng)級別 顆粒度 (≥) 懸浮菌 （ cfu/m3) 沉降菌 Φ90mm培養(yǎng)皿 cfu/4h 100 5 3520 1 1 1000 6 35200 7 3 10000 7 352023 10 5 100000 8 3520230 100 50 注：以上數(shù)據(jù)均為靜態(tài)下的測試，動態(tài) 100級相當(dāng)于靜態(tài)的 1000級，以此類推。 ? 可以采用動態(tài)條件下操作前的顆粒水平來判定有否外源性顆粒污染。 工廠可以采用 千級（ ISO6） 或維持整個無菌灌封間在 百級（ ISO5）。 ? 常用藥液過濾的－－ 親水性 材料－－聚砜 ? 常用注射劑用水過濾的－－ 親水性 材料－－ PVDF（聚偏二 氟乙烯）。） ? 檢測位置 ：邊框、濾器表面。 ? 通過 HEPA過濾器的空氣速度均一性的周期性確認(rèn)非常重要，其速度的變化會造成紊流而增加污染的風(fēng)險。 ? 產(chǎn)品必須在合適的潔凈級別下進(jìn)行轉(zhuǎn)移。無菌工藝操作間內(nèi)應(yīng) 不設(shè) 下水道（地漏），如果不可避免，那么任何這樣的設(shè)施都必須有設(shè)計說明。 只有有資歷的人員，穿合適的著裝方可允許進(jìn)入無菌操作區(qū)。監(jiān)控樣品還應(yīng)包括衣物上合理部分的合適取樣頻率下獲得的樣品。 ? 無菌制劑的組分通常單個滅菌或是多個組分混合后的混合物滅菌。驗證研究數(shù)據(jù)必須證明采用的方法可以將內(nèi)毒素降低至 %（ 3Logs）。 ? 必須特別注意硅化處理過程是膠塞的潛在污染源，其所用的硅油（聚硅氧烷） 必須符合一定質(zhì)量規(guī)格，必須對 制劑產(chǎn)品的安全性 /質(zhì)量 /純度 不產(chǎn)生副作用。 ? 任何與中控或最后檢查不一致的或超出范圍的結(jié)果都必須 按照 。一些 CIP規(guī)程可以先使用合適的高純水或洗滌劑（如稀酸稀堿、表面活性劑）初洗，最后用熱的注射用水沖洗。 七、對無菌工藝和滅菌方法驗證 研究 ?為確保產(chǎn)品無菌，應(yīng)對其無菌灌裝和封口操作及滅菌方法進(jìn)行驗證，必須進(jìn)行“ 培養(yǎng)基灌裝試驗 ”－－用培養(yǎng)基替代產(chǎn)品模擬整個工藝過程（包括生產(chǎn)環(huán)境），確認(rèn)培養(yǎng)基是否在工藝過程中被污染 。一旦制定的整改措施，就必須進(jìn)行模擬試驗以確認(rèn)缺陷已經(jīng)被 修復(fù)，工藝已回到了受控狀態(tài)。 ：培養(yǎng)基灌裝試驗必須在足以代表實(shí)際的生產(chǎn)環(huán)境下進(jìn)行。 ? 每個單元都必須灌入合適數(shù)量 和類別的培養(yǎng)基，并確保其接觸到容器的內(nèi)部（倒置 或旋轉(zhuǎn)），以便目測觀察微生物的生長。如果發(fā)現(xiàn)在很難檢測損壞與微生物污染之間有必然的聯(lián)系，必須進(jìn)行完整的調(diào)查來查明原因。相關(guān)的染菌必須鑒定出其 種系 ，必須調(diào)查污染的可能原因。（美國食品藥品化妝品法案 section301a,：禁止制造商出售任何非無菌制劑產(chǎn)品）。滅菌前產(chǎn)品的生物載量必須檢測以確定潛在污染微生物的趨勢特征。但是濾器使用者必須審核過濾驗證報告來確保其達(dá)到工藝的用途，其數(shù)據(jù)必須與使用者的產(chǎn)品和生產(chǎn)條件相一致（因為濾器的性能在不同條件下對不同的產(chǎn)品有很大差異）。 ? 無菌工藝設(shè)備的無菌處理必須 每批 進(jìn)行。當(dāng)確定什么物質(zhì)特別難滅菌時必須注意過濾器 /泵和灌裝系統(tǒng)的滅菌。驗證中使用的傳感器必須在驗證的前后 都校驗； ? 用于監(jiān)控滅菌器滅菌時間的儀器必須周期性校驗； ? 生物指示劑使用的微生物計數(shù)器必須確認(rèn)，且生物指示劑必須保存在合適的條件下； ? 如果供應(yīng)商的 COA的可靠性已經(jīng)通過合適的確認(rèn)程序確認(rèn)，則生物指示劑（如胞子試紙，玻璃安瓿）的 D值 可以在每批確認(rèn)后接受。滅菌器性能特性的日常評詁（如平衡時間對于確保滅菌單元始終按照驗證條件進(jìn)行連續(xù)的運(yùn)行）是非常重要的。 ? 書面程序中說明微生物 最大風(fēng)險的位置 非常重要。由于 假陰性可能發(fā)生，連續(xù)的微生物生長檢測結(jié)果只是一種不利趨勢。 ? 環(huán)境監(jiān)控的數(shù)據(jù)必須為制造環(huán)境的質(zhì)量提供信息。微生物 種類的明顯變化 必須考慮進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控數(shù)據(jù)的 重新審核 。 ?消毒操作程序必須詳細(xì)描述（如 配制方法、使用頻率和接觸時間 ）以確保能夠重復(fù)。制造商必須知道這些設(shè)施進(jìn)行空氣監(jiān)控的能力，取樣器必須在收集效率、潔凈度、消毒難易及對單向空氣的影響大小的基礎(chǔ)上進(jìn)行選擇。被動空氣取樣的數(shù)據(jù)可以和其他取樣方法獲得的數(shù)據(jù)一起來評詁。這些方法在失敗調(diào)查（如無菌測試 /灌裝研究污染）中有特別的價值。在特定情況下必須使用去活劑來防止?jié)崈羰覂?nèi) 消毒劑或產(chǎn)品（如青霉素類）殘留 的影響 。如果需要必須執(zhí)行合適的整改措施來防止將來發(fā)生類似的偏差。是最主要的無菌試驗指導(dǎo)原則，涵蓋了測試方法和相關(guān)的培養(yǎng)基信息。 ? 由于測試方法靈敏度的限制，任何陽性結(jié)果都會被認(rèn)為是最嚴(yán)重的 cGMP問題，都必須進(jìn)行徹底的調(diào)查。必須審核微生物監(jiān)控數(shù)據(jù)來判斷該微生物是否在實(shí)驗室、生產(chǎn)環(huán)境、人員或產(chǎn)品生物載量中發(fā)現(xiàn)過。 ? 無菌測試的 陽性結(jié)果 可以作為生產(chǎn)和實(shí)驗室問題的表征，必須仔細(xì)的調(diào)查整個生產(chǎn)制造工藝，因為這樣的問題往往延申影響到不止一個批號。因此所有的無菌測試陽性結(jié)果都必須徹底的調(diào)查是非常重要的。 十、批記錄的審核 ? 制造商必須在他們的無菌工藝運(yùn)行時建立工藝和環(huán)境監(jiān)控活動，這些監(jiān)控活動每天維護(hù)和執(zhí)行至關(guān)重要。必須建立書面規(guī)程來規(guī)范在某些干預(yù)下必須進(jìn)行生產(chǎn)線清場，例如機(jī)器調(diào)整和整修。制造商也必須認(rèn)識到建立隔離器所必須的特殊要求的規(guī)程。選擇耐用的手套材質(zhì)，合理的更換頻率都是規(guī)范質(zhì)量操作必須說明的關(guān)鍵。在大多數(shù)合理的設(shè)計中，空氣都是一次性通過關(guān)鍵區(qū)域然后就被系統(tǒng)從環(huán)境區(qū)域中排除。 ? 正壓差必須結(jié)合開口的合適設(shè)計來防止周邊房間空氣的進(jìn)入。 ? 在批生產(chǎn)中一般都需要多次的物料傳遞。多次可汽化凈化劑用于達(dá)到凈化目的，工藝過程開發(fā)和確認(rèn)研究必須包括完整凈化周期能力的測定。 ?頻率 －－隔離器內(nèi)部設(shè)計和內(nèi)容物必須方便其 周期性凈化 。另個在隔離器中使用的工藝設(shè)備和輔助設(shè)施必須選擇能 耐受蒸汽 （或其他等效方法）消毒的。 －－ 雖然在隔離器操作中一般考慮潔凈室的更衣，但依然不能忽視人工操作因素的污染風(fēng)險。例如，含有氧化鋁佐劑的無菌制劑配方，它們在混合后可吸附組方中的明礬而達(dá)不到無菌過濾目的。操作 運(yùn)行的同時 必須進(jìn)行 人員的監(jiān)控 。無菌原料藥儲罐或其他容器的轉(zhuǎn)運(yùn)必須作為培養(yǎng)基灌裝試驗的一部分進(jìn)行模擬。如：可以在制造的中間體階段（成熟期之前產(chǎn)品的最后操作中）進(jìn)行額外的滅菌測試。 2023年 3月 4日星期六 上午 6時 24分 28秒 06:24: ? 1比不了得就不比，得不到的就不要。 06:24:2806:24:2806:24Saturday, March 4, 2023 ? 1不知香積寺，數(shù)里入云峰。 06:24:2806:24:2806:243/4/2023 6:24:28 AM ? 1越是沒有本領(lǐng)的就越加自命不凡。 上午 6時 24分 28秒 上午 6時 24分 06:24: MOMODA POWERPOINT Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感 謝 您 的 下 載 觀 看 專家告訴 。 06:24:2806:24:2806:24Saturday, March 4, 2023 ? 1知人者智，自知者明。 2023年 3月 4日星期六 上午 6時 24分 28秒 06:24: ? 1楚塞三湘接，荊門九派通。 2023年 3月 上午 6時 24分 :24March 4, 2023 ? 1行動出成果，工作出財富。 膠塞的清洗滅菌－－先前的 Ｇ rade“Ａ Ｇ rade“ Ａ Ｇ rade“Ｂ” Ｇ rade“ Ｃ ” 膠塞的清洗滅菌－－現(xiàn)在的 Ｇ rade“ Ｃ ” Ｇ rade“Ｂ” 保證關(guān)鍵控制點(diǎn) Critical Point的確保 ＜ CGMP動向的事例＞ ? 靜夜四無鄰，荒居舊業(yè)貧。 配方階段的工藝模擬研究至少 每年 進(jìn)行兩次。從工藝早期步驟開始的模擬工藝，必須可以證明其工藝控制對于在制造中保護(hù)產(chǎn)品是充分的。所有的運(yùn)輸、傳送和儲存階段都必須小心控制，確保維持產(chǎn)品的無菌性非常重要。必須意識到凈化中最難接觸到的是手套、袖子和上裝，以及手套完整性缺陷的發(fā)現(xiàn)不及時。待消毒的產(chǎn)品表面的凈化方法必須至少使用合適的 生物指示劑證明可以降低 log6個 級別。這個在驗證研究中建立的頻率，當(dāng)生產(chǎn)數(shù)據(jù)表明隔離器環(huán)境中微生物質(zhì)量惡化的時候必須 重新評詁 和 增加頻率 ?？梢允褂枚可镏甘緞┓胖迷诓煌锲泛筒煌恢茫êw最難達(dá)到的位置）來做挑戰(zhàn)性試驗。有些傳遞窗口可能有嚴(yán)格的限制，最低凈化能力（如紫外）或者設(shè)計上有潛在風(fēng)險 會將外周環(huán)境中的空氣引入隔離器，在后一種情況下可以使用局部的 HEPA的單向氣流 覆蓋入口。開口處的局部 100級（ ISO5）層流保護(hù)是一個設(shè)計設(shè)施，提供了與外界環(huán)境之間的額外屏障。 －－和其他無菌工業(yè)設(shè)計一樣，隔離器必須選擇耐用性好、容易清洗和去污染的合適材料，如不銹鋼和玻璃物料混合制成的堅硬墻體被廣泛使用。手套的完整性會造成嚴(yán)重的后果，必須確認(rèn)其監(jiān)控和維護(hù)規(guī)程，降低其完整性缺陷，以降低無菌產(chǎn)品風(fēng)險。雖然沒有一個隔離器能夠提供絕對密封的環(huán)境，但是在設(shè)計優(yōu)良的設(shè)備中可以達(dá)到高度的完整密封性。造成產(chǎn)品和容器 /密封件附近相當(dāng)大活動的干預(yù)必須進(jìn)行合適的本地或整個生產(chǎn)線的清場。所有的 中控試驗結(jié)果 都必須根據(jù) 涵蓋在批記錄 文件中。人員操作的適合性和培訓(xùn)都值得重點(diǎn)審核和考慮。在終端滅菌產(chǎn)品和無菌工藝產(chǎn)品采用相類似的無菌操作的情況下，如果后者的無菌測試失敗率高，將是無菌工藝存在問題的表征。如果比較環(huán)境監(jiān)測和無菌測試結(jié)果，必須是使用的相同方法獲得的鑒別結(jié)果。一旦發(fā)現(xiàn)微