免疫組化技術(shù)-免疫組化在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-02-11 04:42 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 征 ? 以下情況可干擾免疫組化標(biāo)記結(jié)果的觀察和判斷：（ 1）抗體交叉反應(yīng)： 是由于該抗原決定簇同時(shí)存在于多種組織細(xì)胞，如 GFAP可同時(shí)存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞和唾液腺肌上皮。 S100蛋白則更為嚴(yán)重，可表達(dá)于多種組織細(xì)胞。因此，應(yīng)全面了解和認(rèn)識該抗體的功能和標(biāo)記范圍。故抗體交叉反應(yīng)只要應(yīng)用得當(dāng)仍有助于診斷。 ? （ 2）腫瘤細(xì)胞異常表達(dá) ： 可選用多種標(biāo)記去證實(shí)或排除，鑒別其真正組織來源或向某一組織細(xì)胞分化。 ? （ 3）腫瘤細(xì)胞吞噬組織抗原： 是由于某些惡性腫瘤細(xì)胞攝入周圍正常組織細(xì)胞成分，雖然后者也存在某些抗原，但不屬于瘤細(xì)胞固有成分，胞漿內(nèi)抗原定位較模糊，因此應(yīng)該區(qū)別。 ? （ 4）非特異性染色 是指抗原無明確定位，腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞與間質(zhì)均為黃色，相互累及一片，色度無深淺之分。這種標(biāo)記組織片不能作為免疫組織標(biāo)記結(jié)果判斷依據(jù)。 ? 非特異性染色的原因常為組織標(biāo)本固定不佳、抗體質(zhì)量問題或稀釋度不合理及操作方法不規(guī)范等。因此，免疫組化特異性染色定位非常重要，如前所述，陽性顆粒應(yīng)位于細(xì)胞胞膜、胞漿或胞核，陽性細(xì)胞與陰性細(xì)胞相互交雜，陽性染色強(qiáng)度深淺不一。如果缺乏細(xì)胞間的不均一性染色，即是呈陽性染色，常提示為非特異性染色。另組織片邊緣反應(yīng) 和 出血壞死灶周圍 陽性反應(yīng)不能作為診斷依據(jù)。 免疫組化結(jié)果的判斷原則及 對假陰性和假陽性的認(rèn)識 ? 一 、 免疫組化結(jié)果的判斷原則 免疫組化具有特異性強(qiáng)、敏感性高及定位正確等優(yōu)點(diǎn)，但隨著免疫組化應(yīng)用的普及和深入，越來越多的問題也隨之出現(xiàn)。因此，掌握對免疫組化結(jié)果的判斷原則是很重要的。 ? 每批染色都要以特異性的陽性對照和陰性對照為基礎(chǔ)，才能對染色結(jié)果做出正確的判斷。沒有陽性對照，就不能做出真正陰性結(jié)果的判斷；同理，沒有陰性對照，也就不能做出真正陽性結(jié)果的判斷。因而，沒有對照的免疫組化染色，即使做出了判斷也是不可信的。 ? 陽性表達(dá)必須在細(xì)胞和組織特定的抗原部位才能視為陽性，如 LCA在細(xì)胞膜上、 Keratin在細(xì)胞漿內(nèi)、 S100蛋白在胞漿和胞核內(nèi)，EMA在細(xì)胞膜上。不在抗原所在部位的陽性表達(dá)一概不能視為陽性。 即陰性結(jié)果不能認(rèn)為具有否定意義；陽性表達(dá)有強(qiáng)弱、多少之分，哪怕是只是有少數(shù)細(xì)胞陽性（但要在抗原所在部位）也要視為陽性表達(dá)，不能認(rèn)為個(gè)別細(xì)胞陽性而不作陽性看待。 HE切片診斷應(yīng)以 HE切片診斷為準(zhǔn) 當(dāng)免疫組化診斷結(jié)果與 HE切片診斷不一致時(shí)，應(yīng)再結(jié)合臨床資料、 X線等影像學(xué)及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果綜合分析，不能用免疫組化檢查結(jié)果推翻 HE切片診斷。 二、引起假陰性和假陽性結(jié)果的原因 ： （ 1） 抗體已失活或濃度不當(dāng)或抗體本身達(dá)不到應(yīng)有的敏感度； （ 2） 由于組織自溶，抗原擴(kuò)散而導(dǎo)致抗原消失，特別在長期固定的標(biāo)本中因抗原漏出而致假陰性，因此應(yīng)多用新鮮固定之標(biāo)本； （ 3） 操作步驟不當(dāng)，如反應(yīng)時(shí)間
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