發(fā)酵工藝原理第六章(編輯修改稿)
2025-02-03 11:21 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 26 1，培養(yǎng)基 ? 營養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要 – 選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長的培養(yǎng)基； – 營養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用； – 營養(yǎng)成分要適當(dāng)豐富和完全，氮源和維生素含量要高 ? 營養(yǎng)成分要盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基相近。 27 2，培養(yǎng)條件 （ 1）溫度 （ 2）通氣量 在種子罐中培養(yǎng)的種子除保證供給易被利用的培養(yǎng)基外，有足夠的通氣量可以提高種子質(zhì)量。例如，青霉素的生產(chǎn)菌種在制備過程中將通氣充足和不足兩種情況下得到的種子分別接入發(fā)酵罐內(nèi)，它們的發(fā)酵單位可相差 1倍。但也有例外，例如土霉素生產(chǎn)菌，一級種子罐的通氣量小對發(fā)酵有利。 28 3，種齡 ? 種齡：是指種子罐中培養(yǎng)的菌絲體開始移入下一級種子罐或發(fā)酵罐時的培養(yǎng)時間。 ? 通常種齡是以處于生命力極旺盛的對數(shù)生長期，菌體量還未達(dá)到最大值時的培養(yǎng)時間較為合適。時間太長，菌種趨于老化，生產(chǎn)能力下降，菌體自溶；種齡太短，造成發(fā)酵前期生長緩慢。 ? 不同菌種或同一菌種工藝條件不同，種齡是不一樣的，一般需經(jīng)過多種實驗來確定。嗜堿性芽孢桿菌生產(chǎn)堿性蛋白酶，12小時最好。 29 4，接種量 ? 接種量：是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。 ? 接種量的大小決定于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵罐中生長繁殖的速度，采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖達(dá)到高峰的時間，使產(chǎn)物的形成提前到來，并可減少雜菌的生長機會。但接種量過大或者過小，均會影響發(fā)酵。過大會引起溶氧不足，影響產(chǎn)物合成；而且會過多移入代謝廢物，也不經(jīng)濟(jì)；過小會延長培養(yǎng)時間，降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。 ? 通常接種量，細(xì)菌 1~5%，酵母菌 5~10%，霉菌 7~15%，有時20~25% 30 三、種子質(zhì)量的控制措施 ? 種子質(zhì)量的最終指標(biāo)是考察其在發(fā)酵罐中所表現(xiàn)出來的生產(chǎn)能力。因此首先必須保證生產(chǎn)菌種的穩(wěn)定性，其次是提供種子培養(yǎng)的適宜環(huán)境保證無雜菌侵入，以獲得優(yōu)良種子。 – 菌種穩(wěn)定性的檢查 – 無（雜菌）檢查 31 四、種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 1，細(xì)胞或菌體 ? 菌絲形態(tài)、菌絲濃度和培養(yǎng)液外觀（色素、顆粒等） – 單細(xì)胞：菌體健壯、菌形一致、均勻整齊，有的還要求有一定的排列或形態(tài)； – 霉菌、放線菌：菌絲粗壯、對某些染料著色力強、生長旺盛、菌絲分枝情況和內(nèi)含物情況好。 32 2，生化指標(biāo) ? 種子液的糖、氮、磷的含量和 pH變化。 33 3，產(chǎn)物生成量 ? 在抗生素發(fā)酵中，產(chǎn)物生成量是考察種子質(zhì)量的重要指標(biāo)，因為種子液中產(chǎn)物生成量的多少間接反映種子的生產(chǎn)能力和成熟程度。 34 4，酶活力 ? 種子液中某種酶的活力，與目的產(chǎn)物的產(chǎn)量有一定的關(guān)聯(lián)。 35 第三節(jié) 實例 一、谷氨酸發(fā)酵的菌種擴大培養(yǎng) 斜面菌種 → 一級種子培養(yǎng) → 二級種子培養(yǎng) → 發(fā)酵罐 1，斜面菌種的培養(yǎng) ? 菌種的斜面培養(yǎng)必須有利于菌種生長而不產(chǎn)酸，并要求斜面菌種絕對純，不得混有任何雜菌和噬菌體，培養(yǎng)條件應(yīng)有利于菌種繁殖，培養(yǎng)基以多含有機氮而不含或少含糖為原則。 (1) 斜面培養(yǎng)基組成 葡萄糖 ％ 蛋白陳 ％ 牛肉膏 ％ 氯化鈉 ％ 瓊脂 ~％ PH ~ （傳代和保藏斜面不加葡萄糖） (2) 培養(yǎng)條件： 33~34℃ ，培養(yǎng) 18~24h 36 2， 一級種子培養(yǎng) ? 一級種子培養(yǎng)的目的在于大量繁殖活力強的菌體，培養(yǎng)基組成應(yīng)以少含糖分，多含有機氮為主，培養(yǎng)條件從有利于長菌考慮。 (1) 培養(yǎng)基組成 葡萄糖 ％ 尿素 ％ 硫酸鎂 ％ 磷酸氫二鉀 ％ 玉米漿 ~％ (按質(zhì)增減 ) 硫酸亞鐵、硫酸錳 各 2ppm
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1