植物組織培養(yǎng)第四章胚胎培養(yǎng)和離體授粉(編輯修改稿)
2025-02-03 04:58 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 替 溫度 2426℃ 二、影響因素 （三）胚的影響 帶胚的胚乳產(chǎn)生愈傷組織比不帶胚的高。 當(dāng)愈傷組織形成后，除去胚并不影響胚乳組織的增殖。胚對(duì)胚乳培養(yǎng)的影響與胚乳的生理狀態(tài)或年齡有關(guān)。處在旺盛生長(zhǎng)期的未成熟胚，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上無(wú)胚存在時(shí)，可形成愈傷組織。對(duì)成熟胚乳，特別是干種子的胚乳進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，由于其生理活動(dòng)十分微弱，在誘導(dǎo)其脫分化前，必須借助于原位胚的萌發(fā)使其活化。胚對(duì)胚乳的增殖作用， 有人認(rèn)為是某種 “ 胚性因子 ”在起作用，這種胚性因子可能是赤霉素 。 二、影響因素 （四）胚乳發(fā)生類(lèi)型和發(fā)育程度 發(fā)生類(lèi)型： 核型： 精核與極核受精后，只以核的分裂方式增殖。占 61% 細(xì)胞型： 受精后，以細(xì)胞分裂方式增殖。 混生目型： 兩種方式混生增殖。 發(fā)育時(shí)期： 早期： 愈傷組織誘導(dǎo)率低 旺盛生長(zhǎng)期： 最容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織 成熟期： 誘導(dǎo)率很低。水稻和桑寄生科的一些木本植物例外 胚乳培養(yǎng)中，旺盛生長(zhǎng)期是取材的最適時(shí)期。 三、再生植株的染色體倍數(shù) 穩(wěn)定型 繼代培養(yǎng)后染色體無(wú)變化，植株三倍體 畸變型 細(xì)胞染色體異常，植株為多倍體，且不一致，形成多種倍性細(xì)胞組成的嵌合體。 四、胚乳培養(yǎng)的應(yīng)用 培養(yǎng)胚乳的首要目的是為了直接獲得三倍體植株。 三倍體 —— 六倍體 —— 生產(chǎn) 倍性多樣性 —— 篩選非整倍體植株 雜種胚乳 — 附加系和換代系 — 遺傳育種 第三節(jié) 胚珠和子房培養(yǎng) 一、胚珠培養(yǎng) 將胚珠從母株中分離出來(lái)，放在無(wú)菌的人工環(huán)境條件下，讓其進(jìn)一步生長(zhǎng)發(fā)育，以致形成幼苗的過(guò)程。 根據(jù)胚珠是否受精分為兩類(lèi)： 受精胚珠的培養(yǎng) 未受精胚珠的培養(yǎng) （一）胚珠培養(yǎng)的過(guò)程 胚珠的獲取 ⑴培養(yǎng)受精胚珠，摘取授粉時(shí)間合適的子房，如培養(yǎng)未受精胚珠，則在授粉前摘取子房。 ⑵表面滅菌 ⑶剖開(kāi)子房壁，取出胚珠或帶胚珠的胎座接種。 培養(yǎng)條件 固體培養(yǎng)基， White， Nitsch（普遍使用）， MS培養(yǎng)基。附加天然有機(jī)物和氨基酸。 蔗糖濃度：幼嫩胚珠 410%，胚珠內(nèi)含有合子和少數(shù)胚乳核 56%，剛受精的胚珠 8% 室溫 26℃ ， 5060%相對(duì)濕度，光照 18h， 受精胚珠的發(fā)育 胚珠 —— 種子 胚珠 —— 愈傷組織 二、子房培養(yǎng) 將子房從母株上摘下，放在無(wú)菌的人工環(huán)境條件下，讓其進(jìn)一步生長(zhǎng)發(fā)育，以至形成幼苗的過(guò)程。 根據(jù)培養(yǎng)的子房是否授粉分為： 授粉子房培養(yǎng) 未授粉子房培養(yǎng) （一）子房培養(yǎng)的過(guò)程 子房的獲取 未授粉子房在開(kāi)花前 15天摘取子房，授粉子房在授粉后摘取子房。 滅菌：禾谷類(lèi)幼穗表面用 70%酒精擦拭即可，雙子葉花蕾漂白粉液滅菌，其他植株暴露的子房須嚴(yán)格消毒，無(wú)菌濾紙吸干。 撥開(kāi)幼花，子房接種到培養(yǎng)基上。 子房的培養(yǎng) 固體和液體培養(yǎng)基均可， 26℃ ， 5060%相對(duì)濕度，光照 16h。 N6， MS， BN， Nitsch培養(yǎng)基 （二）培養(yǎng)子房的發(fā)育 子房性細(xì)胞 —— 愈傷組織或胚狀體 —— 單倍體植株 子房體細(xì)胞 —— 愈傷組織或胚狀體 —— 二倍體植株 三、胚珠和子房培養(yǎng)的應(yīng)用 胚珠 受精胚珠培養(yǎng)目的 —— 打破種子的休眠 挽救胚的發(fā)育以獲得雜交種 未受精胚珠培養(yǎng)目的 —— 獲得單倍體細(xì)胞發(fā)育而來(lái) 的植株 子房 授粉子房培養(yǎng)目的 —— 挽救子房?jī)?nèi)雜種胚的發(fā)育 未授粉子房培養(yǎng)目的 —— 獲得單倍體植株
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