3植物組織培養(yǎng)技術(shù)[1](編輯修改稿)
2025-02-02 01:58 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 0分鐘 。 ②放入 70﹪ 酒精中搖動 2~3次 ,持續(xù) 6~7秒 ,無菌水沖洗 2~3次，用無菌吸水紙吸干 。 ③ 放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %氯化汞溶液中浸泡1～ 2分鐘 ,無菌水沖洗 2~3次，無菌吸水紙吸干。 （ 3）接種 常用滅菌劑使用濃度及效果比較表 植物組織培養(yǎng)消毒與接種示意圖 接種注意事項(xiàng) ①每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為 75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種 ②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜 3－4塊，菊的莖或葉 6－ 8塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件 ③插入時應(yīng)注意方向，不要倒插。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分 思考：你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)嗎？ 答：每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。 （ 4）培養(yǎng) 愈傷組織的培養(yǎng) 從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過 2周時間。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。 首次培養(yǎng)愈傷組織時，見不見光因不同植物而異，菊花在見光條件下愈傷組織長的更快。胡蘿卜無光才長得好。 2周后，培養(yǎng)基成分接近耗盡，必須更換培養(yǎng)基，進(jìn)行繼代培養(yǎng)，約 20d 試管苗的培養(yǎng) 當(dāng)愈傷組織長到一定大小后，可以更換培養(yǎng)基，進(jìn)行試管苗 培養(yǎng) （五）移栽 打開封口膜 清洗轉(zhuǎn)移 （六）栽培 移栽 材料的移栽及溫室培養(yǎng)： 煉苗：先在外界環(huán)境閉瓶鍛煉 3天，再開瓶鍛煉 3天（以培養(yǎng)基上開始長出菌為宜）。 移栽：去凈培養(yǎng)基，可先在滅過菌的珍珠巖或蛭石上培養(yǎng)使根系發(fā)達(dá)再轉(zhuǎn)移到土壤中。 菊花煉苗 菊花移栽苗 外植體帶菌 培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底 接種操作時帶入 環(huán)境不清潔 植物組培污染途徑 污染的預(yù)防措施 （一）防止外植體帶菌 （二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌 （三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程 （四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔 培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌） 外植體的消毒（酒精、氯化汞） 接種的無菌操作（酒精、酒精燈 —— 灼燒） 無菌箱中的培養(yǎng)； 移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。 思考：在整個操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán) 境的？ 組織培養(yǎng) 原理 過程 意義 利用植物細(xì)胞的全能性 快速繁殖，培育無毒植株，培育作物新品種 根芽 植物體 離體植物器官、組織或細(xì)胞 (脫分化 ) 愈傷組織 (再分化 ) 植物組織培養(yǎng)小結(jié) : 操作條件 含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的 PH、適時光照等 ? 練習(xí) ? ：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的
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