植物組織培養(yǎng)第四章胚胎培養(yǎng)和離體授粉-wenkub
2023-02-04 04:58:08 本頁面
【正文】 過程 Hanning早在 1904年就培養(yǎng)了蘿卜和辣根菜的胚，發(fā)現(xiàn)離體胚可以充分發(fā)育，并且提前萌發(fā)形成小苗，這是世界上胚培養(yǎng)最早獲得成功的一例。 二、胚胎培養(yǎng)應(yīng)用： 解決育種中實踐中遇到的問題； 研究胚胎發(fā)育過程中與胚發(fā)育有關(guān)的內(nèi)外因素。了解植物胚乳培養(yǎng)過程和培養(yǎng)條件，了解胚乳培養(yǎng)在實踐中的應(yīng)用。認識植物胚珠和子房培養(yǎng)方法及其在生產(chǎn)上應(yīng)用。 三、胚胎培養(yǎng)類型 幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng) 第一節(jié) 胚培養(yǎng) 一、培養(yǎng)類型 所謂胚培養(yǎng)就是采用人工方法把胚從種子、子房、胚珠中分離出來，放在無菌條件下讓其進一步生長發(fā)育、以至形成幼苗的過程。 幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)：取材時期 幼胚剝離 培養(yǎng)條件的控制 （是否需要特殊處理） 成熟或未成熟子房 —— 70%酒精浸數(shù) S—— %升汞或飽和漂白粉浸 1030min—— 無菌水沖洗 ——剖出胚珠 —— 取出完整胚 —— 接種在培養(yǎng)基上。 (2)早熟萌發(fā) 幼胚不再發(fā)育，迅速萌發(fā)成幼苗。 成熟胚培養(yǎng)過程 種子 —— 95%酒精消毒 —— 選取完好種子 —— 70%酒精浸數(shù) S—— %升汞或 10%次氯酸鈉浸泡 —— 無菌水沖洗 —— 種子培養(yǎng)幾天 —— 剝離種胚 —— 接種在培養(yǎng)基上。 除了一般的無機鹽成分外，還要加入微量元素和生長輔助物質(zhì)，不同發(fā)育時期的幼胚對培養(yǎng)基成份要求不同，胚齡越小培養(yǎng)及成份越復(fù)雜。 氨基酸和維生素 加入氨基酸，能刺激胚的生長。 幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵是使加入的生長調(diào)節(jié)劑和植物內(nèi)源激素間保持某中平衡，以維持其胚性生長。一般胚柄較小，很難與胚一起剝離出來，所以 培養(yǎng)的胚都不具備完整的胚柄。 四、胚培養(yǎng)的應(yīng)用 遠緣雜交中應(yīng)用 克服珠心胚的干擾，提高育種效率 縮短育種周期 測定休眠種子的萌發(fā)率 理論研究中應(yīng)用 胚珠及胚囊的發(fā)育 第二節(jié) 胚乳培養(yǎng) 胚乳培養(yǎng) — 將胚乳從母體上分離出來，在無菌條件下人工培養(yǎng)，使其生長發(fā)育成為幼苗的過程。其它有的分化出芽、根、葉等或得到愈傷組織。 培養(yǎng)室溫度 2527℃ ，黑暗或弱光下 桑寄生科 薔薇亞綱的一科。中國，大多數(shù)分布于華南和西南各省區(qū)；有些種類可供藥用，如桑寄生、廣寄生、槲寄生等。 ⑵愈傷組織的再分化 生長旺盛的愈傷組織應(yīng)及時進行分化培養(yǎng)，此時需光。裸子植物的胚乳為是 單倍體 。 當(dāng)愈傷組織形成后，除去胚并不影響胚乳組織的增殖。胚對胚乳的增殖作用， 有人認為是某種 “ 胚性因子 ”在起作用，這種胚性因子可能是赤霉素 。 發(fā)育時期： 早期： 愈傷組織誘導(dǎo)率低 旺盛生長期： 最容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織 成熟期： 誘導(dǎo)率很低。 三倍體 —— 六倍體 —— 生產(chǎn) 倍性多樣性 —— 篩選非整倍體植株 雜種胚乳 — 附加系和換代系 — 遺傳育種 第三節(jié) 胚珠和子房培養(yǎng) 一、胚珠培養(yǎng) 將胚珠從母株中分離出來，放在無菌的人工環(huán)境條件下，讓其進一步生長發(fā)育，以致形成幼苗的過程。附加天然有機物和氨基酸。 撥開幼花，子房接種到培養(yǎng)基上。 三種方式 ： 離體柱頭授粉（授于離體雌蕊的位置） 離體子房授粉 離體胚珠授粉 一般都在 試管內(nèi) 完成的。又稱 子房內(nèi)授粉 。 注射法： 用 100mg/L硼酸將
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