植物組織培養(yǎng)技術(shù)傳授(編輯修改稿)
2025-02-03 05:05 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 芽能力誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種子的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種子，可以解決，可以解決 有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題難或發(fā)芽率低等問(wèn)題人工種子人工種子二、實(shí)驗(yàn)操作二、實(shí)驗(yàn)操作（一）制備（一）制備 MS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基包括培養(yǎng)基包括 20多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室一般多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室一般使用使用 4。 C保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備配置各種母液、配置各種母液①① 無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮 10倍，微量元素濃倍，微量元素濃縮縮 100倍，常溫保存倍，常溫保存②② 激素類(lèi)、維生素類(lèi)以及用量較小的有機(jī)物一激素類(lèi)、維生素類(lèi)以及用量較小的有機(jī)物一般可按般可按 1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液③③ 用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量配置培養(yǎng)基、配置培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中，每瓶分裝分裝到錐形瓶中，每瓶分裝 50ml或或 100ml① 配制培養(yǎng)液配制培養(yǎng)液② 調(diào)調(diào) PH③③ 培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素不必添加植物激素滅菌、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌汽滅菌選材：、選材： 菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝（二）外植體消毒（二）外植體消毒消毒、消毒①① 流水沖洗流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗 20min左右左右② 酒精處理酒精處理用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為積分?jǐn)?shù)為 70％的酒精中搖動(dòng)％的酒精中搖動(dòng) 2－－ 3次，持續(xù)次，持續(xù) 6－－7s，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗 ③③ 消毒液處理消毒液處理取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 ％的氯化汞溶液中％的氯化汞溶液中 1－－ 2min，取出后在無(wú)菌水中至少清洗，取出后在無(wú)菌水中至少清洗 3次，漂凈次，漂凈 消毒液消毒液（三）接種（三）接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用室消毒是至關(guān)重要的。用 70％的酒精噴霧使空％的酒精噴霧使空氣消毒，氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線(xiàn)照射線(xiàn)照射 20分鐘分鐘接種室消毒、接種室消毒無(wú)菌操作要求、無(wú)菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。蓋。材料的切取和接種、材料的切取和接種接種注意事項(xiàng)、接種注意事項(xiàng)①① 每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為數(shù)為 75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種②② 外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜 3－－4塊，菊的莖或葉塊，菊的莖或葉 6－－ 8塊，也不要太少，以充塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件分利用培養(yǎng)
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