【文章內容簡介】 ， 未確診 1855例 （ %） ， 誤診 58例 （ %） ，Roger等報告 ， 1414例中確診 1350例 （ %） ，未確診 52例 （ %） ， 誤診 11例 （ %） 。 河南省腫瘤醫(yī)院 302例乳腺冰凍切片 ， 確診 292例（ %） ， 誤診 5例 （ %） ， 未確診 5例（ %） 。 溫州醫(yī)學院附二院 1100例中確診1085（ %） ， 未確診 4例 （ %） ， 誤診 8例 （ %） ， 漏診 3例 （ %） 。 諸暨市人民醫(yī)院 1058例中確診 1034例 （ %） ， 未確診 16例 （ %） ， 誤診 8例 （ %） 。 天津第二中心醫(yī)院 1070例中確診 1045例 （ %） ， 未確診 14例 （ %） ， 誤診 6例 （ %） ， 漏診 5例（ %） ? 3． 冷凍切片診斷出現(xiàn)誤診或不能確診的原因 ? ① 冷凍切片技術本身的不足：無論什么方法制備出的冷凍切片與石蠟切片相比 ， 其厚度 、 著色和清晰度等都不如后者 。 組織不易切全而出現(xiàn)細胞空隙 ， 細胞輪廓不清晰 ， 容易出現(xiàn)組織折疊和厚薄不均 ， 染色失真等； ? ② 取材局限與取材不準：一方面與手術醫(yī)生切取的組織是否包含了腫瘤實質 、 病變組織的大小有關 ， 另一方面與病理醫(yī)生肉眼判斷病變的能力和取材經驗有關 。 術中冷凍切片病理檢查時因時間關系 ， 不允許反復取材 ， 特別是當手術醫(yī)生切取的組織未切到腫瘤實質或組織太少 ，或病理醫(yī)生經驗不足 ， 大標本取材時 ， 未取到腫瘤成分 ，這種情況下就容易造成誤診 。 ? ③ 病理醫(yī)生的判斷能力和經驗不足或偏差：對冷凍切片觀察不夠仔細 ， 遺漏可能存在的病變 ， 或一些增生顯著的病變因異型性明顯而誤判為惡性 。 二 、 細胞病理學診斷 細胞病理學診斷最突出的特點是簡單易行 、 安全 、 對設備要求不高 、 費用低 ， 而且對患者很少造成痛苦或根本無痛苦 。 診斷迅速 、 準確性高 ，能夠反復檢查 。 因此在許多國家和地區(qū)已將細胞學技術推向臨床診斷的前沿 。 ? 腫瘤脫落細胞的采集 1. 乳頭排液或出血 2. 宮頸刮片、涂片 3. 痰脫落細胞 4. 胸腹腔積液穿刺涂片 5. 穿刺組織涂片 脫落細胞涂片的制作 標本要新鮮，實驗人員收到標本后應立即制片，因故不能立即制片時應置于低溫下或加入適量酒精或福爾馬林短時間固定保存。涂片須厚薄適宜而均勻，涂片后待其稍干或干燥后固定 動物實驗 ? 在適宜動物身上復制某些人類疾病的模型，進行任何方式的觀察研究，了解疾病的病理發(fā)展過程和發(fā)病機制，藥效評價等。如：炎癥、腫瘤、傳染病、寄生蟲 … 等 如小鼠、大鼠、兔、狗、猴、猩猩等。最近研究表明：鼠與人類共享 90%以上的基因 組織培養(yǎng)與細胞培養(yǎng) ? 用組織或單細胞用適當培養(yǎng)基培養(yǎng)，觀察組織細胞的發(fā)生發(fā)展，如腫瘤細胞生長，細胞癌變，病毒復制，染色體變異等。 ? 特點：方便地進行體外觀察疾病過程，研究加以影響因素后的變化，周期短、見效快，省時間。但不能將體外研究結果與體內過程等同看待。 用組織或單細胞用適當培養(yǎng)基培養(yǎng)，觀察組織細胞的發(fā)生發(fā)展，如腫瘤細胞生長，細胞癌變，病毒復制，染色體變異等。特點：方便地進行體外觀察疾病過程，研究加以影響因素后的變化，周期短、見效快，省時間。但不能將體外研究結果與體內過程等同看待。二氧化碳培養(yǎng)箱 ? 如： ? 腫瘤細胞株的建立、耐藥實驗、誘癌實驗、基因導入、基因檢測等。 ? 干細胞的定向誘導分化等。 超微結構觀察 ? 觀察細胞內結構： 對于細胞超微結構的研究，目前已積累了大量資料，闡明了許多過去無法了解的現(xiàn)象。 ? 病理學應用方面主要是有關腫瘤的研究。遺憾的是，雖然深入研究，迄今未能發(fā)現(xiàn)可以診斷為惡性腫瘤的超微結構特征，特別是在低度惡性或處于良惡性之間的交界性腫瘤，即使應用最先進的電鏡技術，亦難以制定出鑒別良惡性腫瘤的客觀標準。 ? 在病理診斷中選擇性地作電鏡檢查，對疑難腫瘤診斷 ﹑ 鑒別和探討其發(fā)生有一定幫助， 尤其是在癌和肉瘤、鱗癌與腺癌以及黑色素瘤的診斷上能起一定作用。 ? 一． 瘤細胞膜及其結構異常 ? ㈠ .質膜： 細胞膜可足樣突起，惡性腫瘤細胞發(fā)生浸潤時，可伸出偽足穿破基板，插入到間質內。 ? ㈡ .微絨毛： 腺上皮起源的腫瘤細胞表面游離緣常可見到微絨毛 ； 瘤細胞表面微絨毛可出現(xiàn)方向雜亂，長短、粗細不一，胃癌中出現(xiàn)腸型微絨毛 ,肝細胞癌面向狄斯隙 (Disse‘s space)，表面可出現(xiàn)長微 絨毛，一些腺癌癌細胞內出現(xiàn)帶微絨毛的微囊腔。 ? ㈢ .纖毛： 間皮瘤、 室管膜瘤細胞表面可見纖毛。也可在異常部位出現(xiàn)，如瘤細胞胞漿內偶爾出現(xiàn)纖毛。 ? ㈣ .基板：上皮組織和間皮來源的腫瘤細胞周圍常見基板 。 間葉腫瘤細胞中有的也可出現(xiàn)基板 ， 如神經鞘瘤 、滑膜肉瘤 。 ? ㈤ .細胞連接 :上皮來源的腫瘤常有細胞連接結構 ， 但惡性腫瘤細胞間連接減少 、 幼稚化或消失 ， 故癌細胞易發(fā)生脫落轉移 。 例如橋粒在癌細胞間通常是減少的 ， 也可異常增多 ， 或成串出現(xiàn)形成巨形橋粒 。 間葉組織來源的腫瘤細胞間一般不出現(xiàn)連接 ， 但少數(shù)腫瘤例外 ， 如滑膜肉瘤 、 上皮樣肉瘤 、 腦膜瘤 、 平滑肌肉瘤等 。 ? 二 ． 腫瘤細胞核超微結構異常 ? ㈠ .細胞核異型 ? ㈡ . 染色質：常染色質明顯增多 ? ㈢ .核仁 : 核仁內有核糖體的前體物質 ， 癌瘤細胞核內不僅核仁肥大 ， 且可有多種形式 ， ? 三 .腫瘤細胞的細胞器形態(tài)及數(shù)量異常 ? ㈠ . 線粒體： 在涎腺 ﹑ 甲狀腺嗜酸細胞腺瘤中線粒體大量增多 ﹑ 密集 。 癌細胞線粒體數(shù)量常較少 ， 有時線粒體形態(tài)異常 ， 如出現(xiàn)細長 、 圈狀 、 嵴與線粒體長軸平行的線粒體以及巨大線粒體等 。 ? ㈡ . 粗面內質網： 肝細胞癌 ﹑ 腎上腺腫瘤及漿細胞瘤的粗面內質網最豐富 。 粗面內質網異常時可出現(xiàn)呈同心圓排列 ， 即同心圓膜性小體 ， 指紋樣排列或呈扁池內隔離 .惡 性 腫 瘤 細 胞 內 多 聚 核 糖 體 明 顯 增 加 。 ㈢ .中間絲：界于粗細肌絲之間 ， 直徑 10nm左右 ， 可分為張力細絲 、 膠質細絲 、 神經細絲 、 波形蛋白細絲等 。 ? ㈣ .分泌顆粒 粘液顆粒、糖元顆粒、神經分泌顆粒（ NSG），神經內分泌顆粒見于 APUD腫瘤，如類癌 ﹑胰島細胞瘤 ﹑嗜鉻細胞瘤 ﹑垂體腺瘤 ﹑甲狀腺髓樣癌 ﹑神經內分泌癌以及神經母細胞瘤等 ? ㈤ ．胞漿內其他結構 : 微管常見于膠質細胞瘤 ﹑室管膜瘤 ﹑神經母細胞瘤；肌原性腫瘤細胞內可見肌微絲 。晶體見于腺泡狀軟組織肉瘤和睪丸間質細胞瘤； 黑色素小體見于惡性黑色素瘤 ﹑透明細胞肉瘤；低分化腺癌細胞間有原始腺腔或細胞內帶微絨毛的微囊腔 (胞質內腺腔 )。 新技術應用 ? 一． 免疫組織化學 ? 二． 流式細胞分析術 三． 分子病理學技術 四． 圖像分析技術 五． 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察 ? 免疫組化染色 免疫組織化學標記在病理診斷和臨床病理的一些應用 ⑴ 腫瘤中相關抗原的檢測 ： AFP﹑ CEA﹑ HCG、S!00 ﹑ TG﹑ Calcitolin﹑ PSA﹑ Actin 等。 ⑵ 內分泌腫瘤的功能分類 ： 腦垂體、腎上腺、胰島等 ⑶ 腫瘤組織中受體的測定 ： ER﹑ PR測定對乳腺﹑ 子宮等部位的癌瘤預后的估計和化學藥物的選擇有指導作用 ? (4). 組織中病毒抗原的檢測： 檢測病毒抗原來探討疾病的病因和發(fā)病機理，如對 HBV的檢測來研究肝炎 ﹑ 肝硬化與肝癌的關系； EBV與鼻咽癌﹑ 非洲兒童淋巴瘤的關系； HPV病毒與宮頸癌的關系等