【文章內(nèi)容簡介】 開展遠程病理會診。第六節(jié)病理科的基本設施一、病理科基本設施的指導原則(一)保證病理科完成基本工作任務。(二)保護病理工作人員免受污染。(三)保護環(huán)境免受污染。二、病理科的基本工作空間(一)病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨立的房間內(nèi)進行：收發(fā)室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發(fā)放，病理資料查詢等）巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的剩余檢材） 常規(guī)切片前的預處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟） 制片室（石蠟切片／冷凍切片／細胞學涂片的制做和染色） 病理組織學診斷室 細胞病理學診斷（酌情附設組織穿刺室） 病理會診室 病理檔案資料室 大體標本制作室和陳列室 儲藏室 (二)病理標本巨檢和取材室 便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 室內(nèi)紫外線消毒設備 室內(nèi)高效通風設施 封閉式高效能通風柜廚(用于巨檢和取材，應便于清洗、消毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設備) 合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池） 流水沖洗裝置 冷水和熱水供給系統(tǒng) 標本儲存柜（安裝排風設備） 隔離服裝（消毒后使用） 其他相關(guān)設備。 (三)常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室 排放有毒物質(zhì)的室內(nèi)高效通風設施（用于組織塊和石蠟切片的人工脫水流程） 符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池） 室內(nèi)紫外線消毒設備 封閉式高效能通風柜廚（用于人工脫水流程） 實驗臺 脫水設備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機 組織塊石蠟包埋機 石蠟切片機 *9．恒溫冷凍切片機 *10．石蠟快速切片機［* 9和10：兩項皆配備或配備一項］ 11．一次性切片刀及其配套部件 12．切片刀和磨刀機［ 11和12：兩項皆配備或配備一項］ 1冰箱 1恒溫箱 1烤箱 1有關(guān)試劑和試劑柜 1天平 1染色用器具 1普通光學顯微鏡（用于染色質(zhì)量控制） 其他相關(guān)設備 (四)特殊染色和免疫組織化學染色實驗室 用于染色的實驗室環(huán)境設施和染色的常規(guī)設備［參見上文：(三)常規(guī)切片的預處理室和制片室］ 微波爐或其他抗原修復設備 有關(guān)試劑和試劑柜 其他相關(guān)設備 (五)病理組織學診斷室和病理會診室 雙筒顯微鏡（每名病理醫(yī)師配備一臺） *雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓示教） *計算機和打印機（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學檢查資料的儲存和調(diào)閱） *4．顯微攝影設備，計算機圖像分析、電子圖像存儲和放映設備 [* 2～4：具有一定規(guī)模的病理科配置] 其他相關(guān)設備 (六)病理檔案資料室 用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具 計算機和打印機（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學檢查資料的儲存和調(diào)閱） 其他相關(guān)設備 (七)必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊（具有一定規(guī)模的病理科應設立圖書資料室） (八)病理大體標本制作室和陳列室 制作病理大體標本的工具 其他相關(guān)設備 (九)辦公室：必要的辦公設備 (十)儲藏室：必要設施 (十一)淋浴室：必備設施 四、細胞病理學檢查工作的基本設施 (一) 腫物穿刺取材室： 便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 室內(nèi)紫外線消毒設備 用于實施穿刺術(shù)的檢查床、椅 穿刺用器械和器械柜 穿刺用、急救用藥物和藥品柜 其他相關(guān)設備 (二)細胞學涂片制片室： 用于染色的實驗室環(huán)境設施和常規(guī)設備［參見本節(jié)的三(三)項：“常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)／快速制片室”］) 可調(diào)速離心機 自動細胞病理學檢查系統(tǒng)（具有一定規(guī)模的病理科，酌情） 其他相關(guān)設備 (三)細胞病理學診斷室：參見本節(jié)的三(五)項（病理組織學診斷室和病理會診室）。第三章病理學基本技術(shù)規(guī)范第一節(jié)病理組織學診斷檢材的制備技術(shù)一、 組織的固定㈠凡需要進行病理組織學檢查的標本（器官或組織），于離體（活體或尸體）后，應盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的5~10倍。置放標本的容器大小視標本和固定液的體積而定，應適當大一些。臨床科室切取的標本置放于容器中固定后，應盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制做切片。 ㈡常規(guī)固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應預先多量配制貯存，以備隨時使用。小標本的固定時間為4——6小時，大標本為18——24小時或更久。 ㈢根據(jù)病理學特殊檢查（特殊染色和組織化學染色、免疫組織化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應選用其他適宜的固定液進行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。 ㈣器官、組織固定的基本方法［另參見本章第四節(jié)（病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術(shù)）］ 食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上（重點暴露黏膜面或內(nèi)表面的病變處），并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。 肝、脾：由器官背面，~，切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊壓。 肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。 腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達于腎盞），再行固定。 淋巴結(jié)：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數(shù)片（厚2 ——3mm），繼續(xù)固定。 骨組織：先鋸成小片（若是長骨應作橫向鋸片），在4%中性甲醛中固定24小時后，再進行脫鈣。 微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或濾紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內(nèi)進行中性4%甲醛固定，以防檢材遺失。 凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號（病理號）。 ㈤多數(shù)固定液對人體有害，需要防護，必須在封閉的通風條件下進行操作。 ㈥組織塊的切取和固定：①由較大標本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應與標本的斷面平行， cm(不應)，面積一般在1——1——。②切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應切片的核對。 ③固定組織塊的固定液量，一般應為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內(nèi)常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。 ㈦常用固定液 4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液 甲醛（40%） 100 ml無水磷酸氫二鈉 磷酸二氫鈉 蒸餾水 900ml 乙醇－甲醛（酒精－福爾馬林，AF）固定液甲醛（40%） 100ml95%乙醇 900ml［說明］一般組織塊經(jīng)乙醇－甲醛固定1～2小時后，即可移入95%乙醇內(nèi)脫水。 Carnoy固定液無水乙醇 60ml氯仿 30ml冰醋酸 10ml［說明］組織化學染色的常用固定液，組織經(jīng)Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。 Zenker固定液升汞 重鉻酸鉀 硫酸鈉 蒸餾水（加至） 100ml［說明］配制本液時，先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40～50℃溶解后，再加入重鉻酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前，需進行脫汞沉淀處理。 Bouin固定液飽和苦味酸水溶液（%）75ml甲醛（40%） 25ml 冰醋酸 5ml［說明］本液臨用時配制。組織塊置于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數(shù)小時）。經(jīng)Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進入乙醇脫水（兼脫色）。不必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色） 過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液： 賴氨酸 蒸餾水 50ml() 50ml B液：8%多聚甲醛水溶液 100ml［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細胞結(jié)構(gòu)和抗原性保存較好。 B5（醋酸鈉－升汞－甲醛）固定液無水醋酸鈉 升汞 蒸餾水 90ml［說明］將以上物質(zhì)混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應進行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液（蒸餾水為100 ml）。 丙酮固定液冷丙酮（4℃）固定液用于酶組織化學染色。細胞標本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。 二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備 ㈠組織塊依序進行：①水洗，②脫水，③透明，④浸蠟，⑤包埋和⑥切片。 ㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應有良好的通風和消防設施。 ㈢常規(guī)切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間） 水洗：用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。 脫水（常溫下）（1）乙醇－甲醛（AF）液固定 60~120min（2）80%乙醇 60~120min（3）95%乙醇Ⅰ 60~120min（4）95%乙醇Ⅱ 60~120min（5）無水乙醇Ⅰ 60~120min（6）無水乙醇Ⅱ 60~120min（7）無水乙醇Ⅲ 60min［注意事項］①未經(jīng)充分固定的組織不得進入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進脫水。④脫水試劑應及時過濾、更換（500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變藍時，提示需要更換）。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應將兩者分開進行脫水。⑥組織置于無水乙醇內(nèi)的時間不宜過長（以免硬化）。⑦丙酮脫水性能強，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以替代無水乙醇。 透明（1）二甲苯Ⅰ 20min（2）二甲苯Ⅱ 20min（3）二甲苯Ⅲ 20min［注意事項］①二甲苯的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應及時過濾、更換。④組織經(jīng)二甲苯適度處理后不顯透明時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應查找原因并妥善處理。 浸蠟 （1）石蠟Ⅰ（4550℃） 60min（2）石蠟Ⅱ（5658℃） 60min（3）石蠟Ⅲ（5658℃） 60min［注意事項］①熔化石蠟必須有專人負責，必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴中（70℃）進行，不得用明火加溫。②熔蠟的容積應為組織塊總體積的5～10倍以上。③組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過程，應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆。⑤熔蠟應及時過濾、更換。 包埋 （1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應將組織塊平正地置放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細小組織應彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。 （2）將與組織塊相關(guān)的病理號小條置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。 （3）待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。 （4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟快），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。 （5）將病理號小