【文章內(nèi)容簡介】 eliminaiton ratio (%)化合物 (100 181。mol/L) 在混合的正常人肝微粒體（ mg protein/mL）中孵育 4 h后的 II相代謝消除率 (mean) 27 0 5 10 15 2004812T1 / 2= 3 . 8 2 h 。 Tm a x= 1 hCm a x= 1 0 . 6 ? g / m LF = 9 5 . 2 %T i m e ( h )Concentration (?g/mL)pl asmahear tl iverspl eenki dney040801200 . 5 h4hConcentration（?g/g） 大鼠灌胃 67 mg/kg YP128后平均血漿藥物濃度 時間曲線 大鼠灌胃 67 mg/kg YP128后組織中 YP128的濃度 28 非臨床藥代動力學(xué)研究 創(chuàng)新藥物非臨床藥代動力學(xué)研究 1 2 非創(chuàng)新藥物動物生物利用度與生物等效性評價 3 特殊注射劑的非臨床藥代動力學(xué)研究 29 化學(xué)藥物非臨床藥代動力學(xué)研究 技術(shù)指導(dǎo)原則 藥物非臨床藥代動力學(xué)研究 技術(shù)指導(dǎo)原則 (第二稿 ) 二 0一三年四月 30 研究目的 ? 通過動物體內(nèi) 、 外和人體外的研究方法 ， 揭示新藥在體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律 ? 獲得新藥的基本藥代動力學(xué)參數(shù) , 闡明藥物的吸收 、 分布 、 代謝和排泄的過程和特點 ? 闡明藥效或毒性大小的基礎(chǔ) ， 和提供藥物對靶器官的效應(yīng) （ 藥效或毒性 ） 的依據(jù) ? 提供評價藥物制劑特性和質(zhì)量的重要依據(jù)； ? 為設(shè)計和優(yōu)化臨床研究給藥方案提供有關(guān)信息 ? 為藥物結(jié)構(gòu)改造和設(shè)計提供結(jié)構(gòu)與動力學(xué)關(guān)系的信息 31 研究的基本原則 非臨床藥代動力學(xué)研究 ， 要遵循以下基本原則： ?試驗?zāi)康拿鞔_ ?分析方法可靠 ?試驗設(shè)計合理 ?所得參數(shù)全面 ， 滿足評價要求 ?對試驗結(jié)果進行綜合分析與評價 ?具體問題具體分析 32 試驗設(shè)計的總體要求 1 試驗藥品 ? 應(yīng)提供受試藥物的名稱 、 劑型 、 批號 、 來源 、 純度 ? 保存條件及配制方法 ? 使用的受試藥物及劑型應(yīng)盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究使用的一致 ? 研制單位應(yīng)提供質(zhì)檢報告 33 試驗動物 一般采用成年和健康的動物 。 常用動物種屬有小鼠 、 大鼠 、 兔 、豚鼠 、 犬 、 小型豬和猴等 。 選擇動物的原則如下 : ? 首選動物： 盡可能與藥效學(xué)和毒理學(xué)研究一致 ? 盡量在清醒狀態(tài)下試驗 ， 動力學(xué)研究最好從同一動物多次采樣 ? 創(chuàng)新藥應(yīng)選用兩種或兩種以上的動物 ， 其中一種為嚙齒類動物；另一種為非嚙齒類動物 （ 如犬 、 小型豬或猴等 ） 。 其它類型的藥物 ， 可選用一種動物 ， 建議首選非嚙齒類動物 ? 經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類動物 試驗設(shè)計的總體要求 2 藥動學(xué)實驗前先進行體外篩選，選擇與人代謝情況比較接近的動物進行體內(nèi)藥動學(xué)實驗 代謝穩(wěn)定性研究 34 代謝穩(wěn)定性研究 35 36 3 劑量選擇 試驗劑量 ? 動物體內(nèi)藥代動力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少三個劑量組 ， 其高劑量最好接近最大耐受劑量 ， 中 、 小劑量根據(jù)動物有效劑量的上下限范圍選取 。 ? 主要考察在所試劑量范圍內(nèi) ， 藥物的體內(nèi)的動力學(xué)過程是屬于線性還是非線性 ， 以所得結(jié)果有利于解釋藥效學(xué)和毒理學(xué)研究中的發(fā)現(xiàn) ， 并為新藥的進一步開發(fā)和研究提供信息 ? 盡可能與臨床用藥一致 給藥途徑 試驗設(shè)計的總體要求 3 37 研究項目內(nèi)容 ?血藥濃度 時間曲線 ?藥物的吸收 ?藥物的分布 ?藥物的排泄 （ 物質(zhì)平衡 ） ?藥物與血漿蛋白的結(jié)合 ?藥物的生物轉(zhuǎn)化 ?對藥物代謝酶活性的影響 ?藥代動力學(xué)與毒代動力學(xué) 38 1 血藥濃度 時間曲線 受試動物數(shù) ? 以血藥濃度 時間曲線的每個時間點有不少于 6個數(shù)據(jù)為限計算所需動物數(shù) 。 最好從 同一動物多次取樣 。 如由多只動物的數(shù)據(jù)共同構(gòu)成一條血藥濃度 時間曲線 ， 應(yīng)相應(yīng)增加動物數(shù) ， 以反映個體差異對試驗結(jié)果的影響 。 ? 建議受試動物采用 雌雄各半 ， 如發(fā)現(xiàn)動力學(xué)存在明顯的性別差異 ， 應(yīng)增加動物數(shù)以便 認識試驗藥物的藥代動力學(xué)的性別差異 。 ? 單一性別用藥 ， 可選擇與臨床用藥一致的性別 39 ? 給藥前需采血作為為空白樣品 ? 給藥后的一個完整的血藥濃度 時間曲線，采樣時間點的設(shè)計應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相（或峰濃度附近）和消除相 ? 一般在吸收相至少需要 23個采樣點，平衡相在峰濃度附近至少需要 3個采樣點，消除相需要 46個采樣點。對于吸收快的藥物，應(yīng)盡量避免第一個點是 Cmax ? 整個采樣時間至少應(yīng)持續(xù)到 35個半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的 1/101/20 ? 正式試驗前，選擇 23只動物進行預(yù)試驗以確定合理的采血點 采樣點的確定 口服給藥：一般在給藥前應(yīng)禁食 12小時以上，以排除食物對藥物吸收的影響。在試驗中應(yīng)注意根據(jù)具體情況統(tǒng)一給藥后禁食時間，以避免由此帶來的數(shù)據(jù)波動及食物的影響 40 藥代動力學(xué)參數(shù)的估算 ? 將試驗中測得的 各受試動物 的血藥濃度 時間數(shù)據(jù) 分別 進行藥代動力學(xué)參數(shù)的估算，求得受試物的主要藥代動力學(xué)參數(shù)。 ? 靜脈注射給藥，應(yīng)提供 t1/2（消除半衰期）、 Vd（表觀分布容積）、 AUC（血藥濃度 時間曲線下面積）、 CL或 CL/f（清除率）等參數(shù)值； ? 血管外給藥， 除提供上述參數(shù)外 , 尚應(yīng)提供 Cmax和 Tmax等參數(shù)，以反映藥物吸收的規(guī)律。 ? 提供一些統(tǒng)計矩參數(shù)，如 :MRT、 AUC(0t)和 AUC(0∞)等，對于描述藥物藥代動力學(xué)特征的描述也有意義 一般需要 AUC(0t) ≥80%AUC(0∞) 41 應(yīng)提供的數(shù)據(jù) ? 單次給藥 ? 各個（和各組）受試動物的血藥濃度 時間數(shù)據(jù)（列表）及曲線和其平均值、標準差。 ? 各個（和各組）受試動物的主要藥代動力學(xué)參數(shù)及平均值、標準差。 ? 對受試物單次給藥非臨床藥代動力學(xué)的規(guī)律和特點進行討論和評價。 ? 多次給藥 ? 各個（和各組）受試動物首次給藥后的血藥濃度 時間數(shù)據(jù)及曲線和主要藥代動力學(xué)參數(shù) ? 各個（和各組）受試動物的 3次穩(wěn)態(tài)谷濃度數(shù)據(jù)及平均值、標準差 ? 各個（和各組）受試動物血藥濃度達穩(wěn)態(tài)后末次給藥的血藥濃度 時間數(shù)據(jù)和曲線，及其平均值、標準差和曲線 ? 比較首次與末次給藥的血藥濃度 時間曲線和有關(guān)參數(shù) ? 各個（和各組） 平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度及標準差 42 大鼠灌胃不同劑量的菊花提取物后后血漿中 Luteolin及 Apigenin的濃度 時間曲線 中國藥學(xué)雜志， 2022,46(3)： 214218. 43 2 藥物的吸收 ?對于經(jīng)口給藥的新藥 ， 應(yīng)進行整體動物試驗 ， 盡可能同時進行血管內(nèi)給藥的試驗 ， 提供絕對生物利用度 ?如有必要 ， 可進行體外吸收模型 （ 如 Caco2細胞模型 ） 、在體或離體腸道吸收試驗以闡述藥物吸收特性 ?對于其它血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物 ， 應(yīng)根據(jù)立題目的 ， 盡可能提供絕對生物利用度 44 3 藥物的分布 ? 選用大鼠或小鼠做組織分布試驗較為方便 ? 選擇一個劑量 （ 一般有效劑量 ） 給藥后 ， 至少測定藥物在心 、 肝 、脾 、 肺 、 腎 、 胃腸道 、 生殖腺 、 腦 、 體脂 、 骨骼肌等組織的濃度 ，以了解藥物在體內(nèi)的主要分布組織 ? 特別注意藥物濃度高 、 蓄積時間長的組織和器官 ， 以及在藥效或毒性靶器官的分布 （ 如對造血系統(tǒng)有影響的藥物 ， 應(yīng)考察在骨髓的分布 ） ? 參考血藥濃度 時間曲線的變化趨勢 ， 選擇 至少 3個時間點分別代表吸收相 、 平衡相和消除相的藥物分布 ? 若某組織的藥物濃度較高 ， 應(yīng)增加觀測點 ， 進一步研究該組織中藥物消除的情況 ? 每個時間點 ， 至少應(yīng)有 5個動物的數(shù)據(jù) 抗腫瘤藥物的組織分布研究中，藥物在腫瘤組織內(nèi)的分布研究也十分必要 45 ?做組織分布試驗，必須注意取樣的代表性和一致性 ?同位素標記物的組織分布試驗，應(yīng)提供標記藥物的放化純度、標記率（比活性）、標記位置、給藥劑量等參數(shù)；提供放射性測定所采用的詳細方法，如分析儀器、本底計數(shù)、計數(shù)效率、校正因子、樣品制備過程等；提供采用放射性示蹤生物學(xué)試驗的詳細過程，以及對生物樣品測定時對放射性衰變所進行的校正方程等 ?盡可能提供給藥后不同時相的整體放射自顯影圖像 46 4 藥物的排泄 ?尿和糞的藥物排泄：一般采用小鼠或大鼠 ， 將動物放入代謝籠內(nèi) ， 選定一個有效劑量給藥后 ， 按一定的時間間隔分段收集尿或糞的全部樣品 ， 測定藥物濃度 ?糞樣品按一定比例制成勻漿 ， 記錄總體積 ， 取部分樣品進行藥物含量測定 ?計算藥物經(jīng)此途徑排泄的速率及排泄量 ， 直至收集到的樣品測定不到藥物為止 ?每個時間點至少有 5只動物的試驗數(shù)據(jù) 注意：收集過程中需考慮是否采用一定措施以免藥物或代謝物降解 47