【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 eliminaiton ratio (%)化合物 (100 181。mol/L) 在混合的正常人肝微粒體（ mg protein/mL）中孵育 4 h后的 II相代謝消除率 (mean) 27 0 5 10 15 2004812T1 / 2= 3 . 8 2 h 。 Tm a x= 1 hCm a x= 1 0 . 6 ? g / m LF = 9 5 . 2 %T i m e ( h )Concentration (?g/mL)pl asmahear tl iverspl eenki dney040801200 . 5 h4hConcentration（?g/g） 大鼠灌胃 67 mg/kg YP128后平均血漿藥物濃度 時(shí)間曲線 大鼠灌胃 67 mg/kg YP128后組織中 YP128的濃度 28 非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究 創(chuàng)新藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究 1 2 非創(chuàng)新藥物動(dòng)物生物利用度與生物等效性評(píng)價(jià) 3 特殊注射劑的非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究 29 化學(xué)藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究 技術(shù)指導(dǎo)原則 藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究 技術(shù)指導(dǎo)原則 (第二稿 ) 二 0一三年四月 30 研究目的 ? 通過(guò)動(dòng)物體內(nèi) 、 外和人體外的研究方法 ， 揭示新藥在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律 ? 獲得新藥的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) , 闡明藥物的吸收 、 分布 、 代謝和排泄的過(guò)程和特點(diǎn) ? 闡明藥效或毒性大小的基礎(chǔ) ， 和提供藥物對(duì)靶器官的效應(yīng) （ 藥效或毒性 ） 的依據(jù) ? 提供評(píng)價(jià)藥物制劑特性和質(zhì)量的重要依據(jù)； ? 為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床研究給藥方案提供有關(guān)信息 ? 為藥物結(jié)構(gòu)改造和設(shè)計(jì)提供結(jié)構(gòu)與動(dòng)力學(xué)關(guān)系的信息 31 研究的基本原則 非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究 ， 要遵循以下基本原則： ?試驗(yàn)?zāi)康拿鞔_ ?分析方法可靠 ?試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理 ?所得參數(shù)全面 ， 滿足評(píng)價(jià)要求 ?對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析與評(píng)價(jià) ?具體問(wèn)題具體分析 32 試驗(yàn)設(shè)計(jì)的總體要求 1 試驗(yàn)藥品 ? 應(yīng)提供受試藥物的名稱 、 劑型 、 批號(hào) 、 來(lái)源 、 純度 ? 保存條件及配制方法 ? 使用的受試藥物及劑型應(yīng)盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究使用的一致 ? 研制單位應(yīng)提供質(zhì)檢報(bào)告 33 試驗(yàn)動(dòng)物 一般采用成年和健康的動(dòng)物 。 常用動(dòng)物種屬有小鼠 、 大鼠 、 兔 、豚鼠 、 犬 、 小型豬和猴等 。 選擇動(dòng)物的原則如下 : ? 首選動(dòng)物： 盡可能與藥效學(xué)和毒理學(xué)研究一致 ? 盡量在清醒狀態(tài)下試驗(yàn) ， 動(dòng)力學(xué)研究最好從同一動(dòng)物多次采樣 ? 創(chuàng)新藥應(yīng)選用兩種或兩種以上的動(dòng)物 ， 其中一種為嚙齒類動(dòng)物；另一種為非嚙齒類動(dòng)物 （ 如犬 、 小型豬或猴等 ） 。 其它類型的藥物 ， 可選用一種動(dòng)物 ， 建議首選非嚙齒類動(dòng)物 ? 經(jīng)口給藥不宜選用兔等食草類動(dòng)物 試驗(yàn)設(shè)計(jì)的總體要求 2 藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)前先進(jìn)行體外篩選，選擇與人代謝情況比較接近的動(dòng)物進(jìn)行體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn) 代謝穩(wěn)定性研究 34 代謝穩(wěn)定性研究 35 36 3 劑量選擇 試驗(yàn)劑量 ? 動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)設(shè)置至少三個(gè)劑量組 ， 其高劑量最好接近最大耐受劑量 ， 中 、 小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范圍選取 。 ? 主要考察在所試劑量范圍內(nèi) ， 藥物的體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程是屬于線性還是非線性 ， 以所得結(jié)果有利于解釋藥效學(xué)和毒理學(xué)研究中的發(fā)現(xiàn) ， 并為新藥的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和研究提供信息 ? 盡可能與臨床用藥一致 給藥途徑 試驗(yàn)設(shè)計(jì)的總體要求 3 37 研究項(xiàng)目?jī)?nèi)容 ?血藥濃度 時(shí)間曲線 ?藥物的吸收 ?藥物的分布 ?藥物的排泄 （ 物質(zhì)平衡 ） ?藥物與血漿蛋白的結(jié)合 ?藥物的生物轉(zhuǎn)化 ?對(duì)藥物代謝酶活性的影響 ?藥代動(dòng)力學(xué)與毒代動(dòng)力學(xué) 38 1 血藥濃度 時(shí)間曲線 受試動(dòng)物數(shù) ? 以血藥濃度 時(shí)間曲線的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)有不少于 6個(gè)數(shù)據(jù)為限計(jì)算所需動(dòng)物數(shù) 。 最好從 同一動(dòng)物多次取樣 。 如由多只動(dòng)物的數(shù)據(jù)共同構(gòu)成一條血藥濃度 時(shí)間曲線 ， 應(yīng)相應(yīng)增加動(dòng)物數(shù) ， 以反映個(gè)體差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響 。 ? 建議受試動(dòng)物采用 雌雄各半 ， 如發(fā)現(xiàn)動(dòng)力學(xué)存在明顯的性別差異 ， 應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)以便 認(rèn)識(shí)試驗(yàn)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)的性別差異 。 ? 單一性別用藥 ， 可選擇與臨床用藥一致的性別 39 ? 給藥前需采血作為為空白樣品 ? 給藥后的一個(gè)完整的血藥濃度 時(shí)間曲線，采樣時(shí)間點(diǎn)的設(shè)計(jì)應(yīng)兼顧藥物的吸收相、平衡相（或峰濃度附近）和消除相 ? 一般在吸收相至少需要 23個(gè)采樣點(diǎn)，平衡相在峰濃度附近至少需要 3個(gè)采樣點(diǎn)，消除相需要 46個(gè)采樣點(diǎn)。對(duì)于吸收快的藥物，應(yīng)盡量避免第一個(gè)點(diǎn)是 Cmax ? 整個(gè)采樣時(shí)間至少應(yīng)持續(xù)到 35個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的 1/101/20 ? 正式試驗(yàn)前，選擇 23只動(dòng)物進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)以確定合理的采血點(diǎn) 采樣點(diǎn)的確定 口服給藥：一般在給藥前應(yīng)禁食 12小時(shí)以上，以排除食物對(duì)藥物吸收的影響。在試驗(yàn)中應(yīng)注意根據(jù)具體情況統(tǒng)一給藥后禁食時(shí)間，以避免由此帶來(lái)的數(shù)據(jù)波動(dòng)及食物的影響 40 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算 ? 將試驗(yàn)中測(cè)得的 各受試動(dòng)物 的血藥濃度 時(shí)間數(shù)據(jù) 分別 進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算，求得受試物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。 ? 靜脈注射給藥，應(yīng)提供 t1/2（消除半衰期）、 Vd（表觀分布容積）、 AUC（血藥濃度 時(shí)間曲線下面積）、 CL或 CL/f（清除率）等參數(shù)值； ? 血管外給藥， 除提供上述參數(shù)外 , 尚應(yīng)提供 Cmax和 Tmax等參數(shù)，以反映藥物吸收的規(guī)律。 ? 提供一些統(tǒng)計(jì)矩參數(shù)，如 :MRT、 AUC(0t)和 AUC(0∞)等，對(duì)于描述藥物藥代動(dòng)力學(xué)特征的描述也有意義 一般需要 AUC(0t) ≥80%AUC(0∞) 41 應(yīng)提供的數(shù)據(jù) ? 單次給藥 ? 各個(gè)（和各組）受試動(dòng)物的血藥濃度 時(shí)間數(shù)據(jù)（列表）及曲線和其平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。 ? 各個(gè)（和各組）受試動(dòng)物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。 ? 對(duì)受試物單次給藥非臨床藥代動(dòng)力學(xué)的規(guī)律和特點(diǎn)進(jìn)行討論和評(píng)價(jià)。 ? 多次給藥 ? 各個(gè)（和各組）受試動(dòng)物首次給藥后的血藥濃度 時(shí)間數(shù)據(jù)及曲線和主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) ? 各個(gè)（和各組）受試動(dòng)物的 3次穩(wěn)態(tài)谷濃度數(shù)據(jù)及平均值、標(biāo)準(zhǔn)差 ? 各個(gè)（和各組）受試動(dòng)物血藥濃度達(dá)穩(wěn)態(tài)后末次給藥的血藥濃度 時(shí)間數(shù)據(jù)和曲線，及其平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和曲線 ? 比較首次與末次給藥的血藥濃度 時(shí)間曲線和有關(guān)參數(shù) ? 各個(gè)（和各組） 平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度及標(biāo)準(zhǔn)差 42 大鼠灌胃不同劑量的菊花提取物后后血漿中 Luteolin及 Apigenin的濃度 時(shí)間曲線 中國(guó)藥學(xué)雜志， 2022,46(3)： 214218. 43 2 藥物的吸收 ?對(duì)于經(jīng)口給藥的新藥 ， 應(yīng)進(jìn)行整體動(dòng)物試驗(yàn) ， 盡可能同時(shí)進(jìn)行血管內(nèi)給藥的試驗(yàn) ， 提供絕對(duì)生物利用度 ?如有必要 ， 可進(jìn)行體外吸收模型 （ 如 Caco2細(xì)胞模型 ） 、在體或離體腸道吸收試驗(yàn)以闡述藥物吸收特性 ?對(duì)于其它血管外給藥的藥物及某些改變劑型的藥物 ， 應(yīng)根據(jù)立題目的 ， 盡可能提供絕對(duì)生物利用度 44 3 藥物的分布 ? 選用大鼠或小鼠做組織分布試驗(yàn)較為方便 ? 選擇一個(gè)劑量 （ 一般有效劑量 ） 給藥后 ， 至少測(cè)定藥物在心 、 肝 、脾 、 肺 、 腎 、 胃腸道 、 生殖腺 、 腦 、 體脂 、 骨骼肌等組織的濃度 ，以了解藥物在體內(nèi)的主要分布組織 ? 特別注意藥物濃度高 、 蓄積時(shí)間長(zhǎng)的組織和器官 ， 以及在藥效或毒性靶器官的分布 （ 如對(duì)造血系統(tǒng)有影響的藥物 ， 應(yīng)考察在骨髓的分布 ） ? 參考血藥濃度 時(shí)間曲線的變化趨勢(shì) ， 選擇 至少 3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表吸收相 、 平衡相和消除相的藥物分布 ? 若某組織的藥物濃度較高 ， 應(yīng)增加觀測(cè)點(diǎn) ， 進(jìn)一步研究該組織中藥物消除的情況 ? 每個(gè)時(shí)間點(diǎn) ， 至少應(yīng)有 5個(gè)動(dòng)物的數(shù)據(jù) 抗腫瘤藥物的組織分布研究中，藥物在腫瘤組織內(nèi)的分布研究也十分必要 45 ?做組織分布試驗(yàn)，必須注意取樣的代表性和一致性 ?同位素標(biāo)記物的組織分布試驗(yàn)，應(yīng)提供標(biāo)記藥物的放化純度、標(biāo)記率（比活性）、標(biāo)記位置、給藥劑量等參數(shù)；提供放射性測(cè)定所采用的詳細(xì)方法，如分析儀器、本底計(jì)數(shù)、計(jì)數(shù)效率、校正因子、樣品制備過(guò)程等；提供采用放射性示蹤生物學(xué)試驗(yàn)的詳細(xì)過(guò)程，以及對(duì)生物樣品測(cè)定時(shí)對(duì)放射性衰變所進(jìn)行的校正方程等 ?盡可能提供給藥后不同時(shí)相的整體放射自顯影圖像 46 4 藥物的排泄 ?尿和糞的藥物排泄：一般采用小鼠或大鼠 ， 將動(dòng)物放入代謝籠內(nèi) ， 選定一個(gè)有效劑量給藥后 ， 按一定的時(shí)間間隔分段收集尿或糞的全部樣品 ， 測(cè)定藥物濃度 ?糞樣品按一定比例制成勻漿 ， 記錄總體積 ， 取部分樣品進(jìn)行藥物含量測(cè)定 ?計(jì)算藥物經(jīng)此途徑排泄的速率及排泄量 ， 直至收集到的樣品測(cè)定不到藥物為止 ?每個(gè)時(shí)間點(diǎn)至少有 5只動(dòng)物的試驗(yàn)數(shù)據(jù) 注意：收集過(guò)程中需考慮是否采用一定措施以免藥物或代謝物降解 47