檢驗(yàn)科微生物室(編輯修改稿)
2024-09-05 15:40 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 后將痰塊打碎 ， 或加入等量 10g/L的胰蛋白酶將痰塊消化后再接種 。 合格標(biāo)本 外觀為膿痰 、 粘液 、 血 ， 涂片鏡檢 10個(gè)上皮細(xì)胞 /LP、 25個(gè) WBC/LP 為合格標(biāo)本 。 呼吸道標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng) ? 標(biāo)本留取質(zhì)量的好壞直接影響到對(duì)呼吸道病原學(xué)的診斷 ? 標(biāo)本的采集要盡量減少上呼吸道正常菌群干擾 ? 應(yīng)在用藥前或停藥 1天后留取標(biāo)本 。 泌尿道標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng) ? 應(yīng)在用藥前或停藥 5天后留取標(biāo)本 , 并使尿液在膀胱內(nèi)停留 6～ 8h以上 。 ? 盡量避免或減少尿道口正常菌群干擾 。 ? 清潔中段尿 、 導(dǎo)尿?qū)Ч苣?、 經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液 ， 送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳 ? 尿量不宜太多 ， 試管塞子與尿液不應(yīng)直接接觸 ? 留取導(dǎo)尿管尿要排空導(dǎo)尿管內(nèi)陳舊尿液 ， 倘留置尿管超過(guò)三天應(yīng)避免采用 。 ? 標(biāo)本采集后立即送檢 ， 不能立即送檢者 ， 可暫存 4℃ 冰箱 ， 但保存不超過(guò) 8h 糞便標(biāo)本的培養(yǎng) ? 應(yīng)在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集 ， 稀便不少于 1ml， 固體便不少于 1克 ，無(wú)便患者可用直腸拭子采集標(biāo)本 。 ? 要挑取含膿 、 黏液 、 血等病理改變或水樣糞便送檢 。 直腸拭子采樣量要足夠 ， 拭子上肉眼應(yīng)可見(jiàn)糞便 。 ? 注意事項(xiàng)： ⑴ 雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無(wú)菌容器 。 ⑵ 厭氧細(xì)菌 （ 難辯梭菌 ） 培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量減少與空氣接觸 。 ⑶ 注意挑取膿血便或粘液便做培養(yǎng) ⑷ 要進(jìn)行分區(qū)劃線 。 如圖所示 。 分泌物的培養(yǎng) 1. 對(duì)開(kāi)放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物 、 扁桃體 、 外耳道 、 手術(shù)后切口 、 導(dǎo)管治療感染 、 瘺管內(nèi)膿液 、 生殖道分泌物等均屬于開(kāi)放性病灶 。 應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌 ， 去除舊的分泌物 ， 用滅菌拭子采集病灶深部的分泌物 ， 也可取感染部位下的組織送檢 。 2. 閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫 、 肺膿腫 、 肝膿腫 、 腹腔膿腫 、 盆腔膿腫等 ， 對(duì)封閉的膿腫常采用穿刺或引流的的方法采樣 ， 應(yīng)在用藥前采集 ， 應(yīng)注意膿液的氣味 、 性狀 、 顏色注意厭氧菌存在的可能 。 不能及時(shí)送檢應(yīng)應(yīng)用輸送培養(yǎng)基 。 膿液標(biāo)本 要盡量避免病灶表面細(xì)菌污染 。 開(kāi)放性膿腫 ， 采樣前無(wú)菌鹽水沖洗傷口 ， 拭去表面污染膿液 ， 挑取病灶深部膿液；封閉性膿液 ， 嚴(yán)格病灶皮膚或黏膜表面的消毒后用無(wú)菌干燥注射器穿刺抽取 ， 置無(wú)菌試管內(nèi)送檢 ， 或切開(kāi)排膿時(shí)用無(wú)菌拭子采集深部膿液 。 厭氧菌和傷口標(biāo)本 ? 厭氧菌標(biāo)本 隔絕空氣 氧對(duì)厭氧菌有毒性作用 液狀標(biāo)本應(yīng)用注射器抽取密封送檢 分泌物標(biāo)本最好床邊采集床邊接種；另置厭氧環(huán)境送檢（輸送培養(yǎng)基） ? 傷口標(biāo)本 在傷口切開(kāi)排膿時(shí)留取標(biāo)本 不能在傷口消毒清洗后留取標(biāo)本 盡量采集傷口深部的膿汁送檢 腦脊液標(biāo)本 ? 直接涂片：革蘭染色、抗酸染色、印度墨汁染色 ? 無(wú)菌采集技術(shù)：避免標(biāo)本污染及患者被感染 ? 病毒培養(yǎng)標(biāo)本：置 4 ℃ 保存 ? 分枝桿菌培養(yǎng)標(biāo)本： 2mL以上，置 4 ℃ 保存 ? 細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本置 35 ℃ 保存 ? 種類和環(huán)節(jié)多 （ 細(xì)菌鑒定 、 藥敏 、 培養(yǎng)基 、 生化管 、 儀器 、 稀釋液 ） ? 涉及知識(shí)面廣 ? 復(fù)雜性高 ? 需要強(qiáng)烈的責(zé)任感 四、微生物試驗(yàn)分析中質(zhì)量控制 常規(guī)試驗(yàn)的質(zhì)量控制 天天做（質(zhì)控菌株） ? 觸酶試驗(yàn)： 3％ H2O2每三天更換一次 ? 血漿凝固酶試驗(yàn)：人血漿或商品乳膠試劑 ? 氧化酶試驗(yàn)： 1％鹽酸四甲基對(duì)苯胺水溶液浸泡厚濾紙，室溫吹干壓成小紙片，置含干燥劑容器－ 20℃ 保存，或買商品制劑 ? β －內(nèi)酰胺酶：頭孢硝噻吩 (Nitrocefin)為底物，適于測(cè)試嗜血桿菌、淋球菌、卡他莫拉菌、腸球菌 ? 革蘭染色：革蘭陽(yáng)性菌染成紫色；革蘭陰性菌染成紅色；另涂片厚度、染色和脫色時(shí)間、染料沉渣等也影響染色質(zhì)量 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 ? 一般性狀：① 外觀： 透明、清亮、無(wú)混濁、無(wú)沉淀，顏色符合要求，表面濕潤(rùn)但無(wú)水汽、平整、光潔無(wú)凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻。 ② 厚度 ： 一般厚度在 3mm，但 MH平板厚度 ≥ 4mm。斜面的長(zhǎng)度 ≤ 試管長(zhǎng)度的 2/3。 ③ pH是細(xì)菌生長(zhǎng)的重要條件之一，合格培養(yǎng)基的 pH應(yīng)在規(guī)定值上下 。 ? 無(wú)菌試驗(yàn)： 新制備或新買的培養(yǎng)基在使用前要隨機(jī)抽取一定數(shù)量的樣品作無(wú)菌試驗(yàn)。 購(gòu)買的培養(yǎng)基要有質(zhì)量保證如合格證明等文件；若無(wú)質(zhì)量保證需檢測(cè)相應(yīng)的性能。 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 ? 細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)： 所有的培養(yǎng)基在使用前還必須做細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)以測(cè)定培養(yǎng)基性能是否符合要求。標(biāo)準(zhǔn)菌株分 2種：一種是已知的可在某種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并產(chǎn)生典型生物學(xué)性狀的，對(duì)培養(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)的菌株；另一種是用已知的不能在某種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)或?qū)ε囵B(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陰性生化反應(yīng)的菌株。如血瓊脂平板：乙型溶血性鏈球菌生長(zhǎng)， β 溶血；甲型鏈球菌， a溶血；巧克力瓊脂平板：流感嗜血桿菌生長(zhǎng)良好；中國(guó)藍(lán)瓊脂平板和 SS瓊脂平板：革蘭陰性菌生長(zhǎng)，革蘭陽(yáng)性菌不生長(zhǎng)。 試劑質(zhì)控 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室常用的試劑包括染色液 、 診斷血清以及各種生化反應(yīng)試劑等 。 染色液及染色方法質(zhì)量控制： 購(gòu)買的或配置的染色液 ， 每次需做好相關(guān)的記錄 ， 如操作者和開(kāi)瓶日期等；還要進(jìn)行染色步驟質(zhì)控 ， 如革蘭染色在一張玻片上同時(shí)涂有金葡菌和大腸桿菌 ， 以保證染色性判斷準(zhǔn)確無(wú)誤 。 常用生化試劑的質(zhì)控： 隨著細(xì)菌鑒定儀和快速微量生化鑒定板條的普及 ， 臨床微生物檢驗(yàn)常用的生化試劑種類日趨減少 ， 應(yīng)注意在用試劑在貯存時(shí)的避光 、 冷藏等要求 ， 保證試劑的穩(wěn)定性 。 不要使用過(guò)期的試劑 。 診斷血清的質(zhì)控： 診斷血清是一種重要的細(xì)菌鑒定試劑 ， 應(yīng)從有資質(zhì)的生產(chǎn)單位購(gòu)買 。驗(yàn)收時(shí)必須看清生產(chǎn)批號(hào) 、 血清效價(jià) 、 透明度與色澤 。 試驗(yàn)中應(yīng)注意無(wú)菌操作 ，避免細(xì)菌污染 。 要經(jīng)常檢查貯存在 4℃ 冰箱中的各種血清 ， 若發(fā)現(xiàn)混濁 ， 出現(xiàn)絮狀 ，應(yīng)停止使用 。 為保證血清凝集反應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)確 ， 應(yīng)每 3個(gè)月對(duì)血清進(jìn)行一次質(zhì)控 。 不要使用過(guò)期的血清 。 紙片藥敏試驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控 ? 基礎(chǔ)質(zhì)控：連續(xù)做 30天，如失控超過(guò) 3次還需繼續(xù)，如失控低于 3次可改為每周 1
研究報(bào)告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1