【文章內(nèi)容簡介】 F能對病毒再侵入健康肝細胞加以抑制，所以IL2對肝細胞起著清理污染的潔化作用。IL2對麻風、肺結(jié)核等慢性感染性的疾病也有療效。將小鼠接種TB 5或15天后，每天肌肉注射rIL2共10天，觀察脾臟中TB細菌數(shù)目，結(jié)果rIL2對TB的抑制作用能達到99％，可見rIL2對結(jié)核桿菌(TB)有很強的抑制作用[9]。除此之外，IL2在抗高血壓、抗寄生蟲感染、鎮(zhèn)痛等方面都有著積極的應用。此外，IL2也可用于其他病毒如人類乳頭瘤病毒、皰疹病毒感染的輔助治療。 用于自身免疫性疾病的治療IL2是一種在體內(nèi)具有兩種相對立作用的細胞因子，它既可作為 TCGF 促進 T 細胞的增殖分化外，又能限制 T 細胞的反應并產(chǎn)生免疫耐受[10]。實驗發(fā)現(xiàn)，缺乏IL2或IL2R基因的小鼠非但沒有出現(xiàn)明顯的免疫無能，相反還產(chǎn)生了各種嚴重的T細胞介導的自身免疫性疾病[11]。IL2 在維持機體的免疫耐受方面也起著重要的作用，因而可用于自身免疫性疾病的防治[12]。CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞( CD4+CD25+Treg)是調(diào)節(jié)性T細胞( Treg) 的一種重要亞型，主要由胸腺產(chǎn)生，并進入外周血液和淋巴組織，維持正常免疫反應和免疫耐受的平衡。CD4+CD25+Treg 組成性表達CDCD2Foxp細胞毒 T 淋巴細胞相關抗原4(CTLA4)和糖皮質(zhì)激素誘導腫瘤壞死因子受體(GITR)等分子。正常情況下，CD4+CD25+Treg約占人外周血CD4+T 細胞的5%~10%。CD4+CD25+Treg具有免疫無能性和免疫抑制性兩大特征，其免疫無能性表現(xiàn)在對高濃度 IL2 的單獨刺激、固相包被或可溶性CD3單抗以及CD3和CD8單抗的聯(lián)合作用呈無應答狀態(tài)，也不產(chǎn)生 T 細胞增殖分化所需的IL2，呈現(xiàn)一種免疫惰性狀態(tài)；而免疫抑制性表現(xiàn)在其經(jīng)激活后能抑制 CD4+和CD8+細胞的活化與增殖，且這種抑制作用是非特異性的，不受組織相容性抗原的限制。CD4+CD25+Treg發(fā)揮免疫抑制作用的機制主要有兩種：細胞直接接觸機制和細胞因子調(diào)節(jié)機制，前者主要與 Treg 表面的 CTLA4 和GITR 有關，而后者主要與分泌 IL10 和 TGFβ 等細胞因子有關。因ILIL2Rα 或β 缺失而產(chǎn)生的各種嚴重系統(tǒng)性自身免疫性疾病都與CD4+CD25+Treg 的生成減少有關[13, 14]，而用IL2 單克隆抗體中和IL2，可選擇性減少小鼠體內(nèi)CD4+CD25+Treg 的數(shù)量[12]。另外又發(fā)現(xiàn)，將一定數(shù)量的 CD4+CD25+Treg 轉(zhuǎn)移到 IL2β/小鼠體內(nèi)可以阻止自身免疫性疾病的產(chǎn)生[15]。大量研究證實，IL2 對 CD4+CD25+Treg在胸腺中的發(fā)育、外周功能的維持及其免疫抑制作用的發(fā)揮都起著非常重要的作用[16, 17]。4 lL2的活性檢測IL2產(chǎn)生或表達異常與臨床疾病有密切關系，通過測定人外周血、尿液或人激活淋巴細胞培養(yǎng)上清液中的IL2水平，可作為對腫瘤、心血管病、肝病、紅斑狼瘡、麻風病、艾滋病等疾病診斷、預后及觀察的方法，并用于器官移植后有無排斥反應的早期診斷。IL2含量測定是基礎研究和臨床上應用IL2免疫治療的重要輔助指標之一。 放射免疫分析法利用放射性核素標記抗原或抗體，然后與被測的抗體或抗原結(jié)合，形成抗原抗體復合物的原理來進行分析的。早期的放射免疫技術(shù)是基于競爭性結(jié)合反應原理的放射免疫分析（RIA），該技術(shù)以標記抗原與反應系統(tǒng)中未標記抗原競爭結(jié)合特異性抗體來測定待測樣品中抗原的量。RIA是一種具有高靈敏度(100pg/ml)、精確度和特異性的體外超微量分析法，但技術(shù)要求高，影響因素較多。稍后又發(fā)展了非競爭性結(jié)合的免疫放射分析（IRMA），該技術(shù)則以過量標記抗體與抗原非競爭結(jié)合，采用固相免疫吸附載體分離游離和結(jié)合標記抗體。放射免疫技術(shù)常用的核素有125I和3H，前者采用γ射線，標記方法簡單低廉，后者用β射線，標記方法復雜昂貴。放射免疫分析法廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷領域中各種微量蛋白質(zhì)、激素、小分子藥物和腫瘤標志物的定量分析。 酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）應用抗IL 2的單克隆抗體或多克隆抗體通過酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA )來 檢測人血清，血漿及相關液體樣本中IL2的含量。ELISA是利用酶標記物同抗原抗體復合物的免疫反應與酶催化放大作用相結(jié)合，既保持了酶催化反應的敏感性，又保持了抗原抗體反應的特異性，因而極大提高了靈敏度。hIL2常采用雙抗體夾心法測定。如用純化的人hIL2抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入IL2，再與辣根過氧化物酶（HRP）標記的羊抗人抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB(含四甲基聯(lián)苯胺TMB和過氧化氫H2O2)顯色。H2O2和TMB在HRP酶的催化下，TMB轉(zhuǎn)化成聯(lián)苯醌，聯(lián)苯醌在波長450nm處有最大消光系數(shù)。如果HRP量少，過氧化氫溶液和TMB過量時，則形成藍色的陽離子根。加入終止液降低pH（），即可使藍色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌。終止液可以是HCl、H3PO4 或H2SO4等，其中H2SO4作為終止劑較為理想。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素2（IL2）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人白細胞介素2（IL2）含量，最低檢測濃度。 生物學檢測法根據(jù)IL2對特定的依賴細胞株(CTLLCTLLCTHTLBBDNKCCTLD及MTH等)的促增殖作用，以增殖細胞中的DNA合成或酶活性為指標，間接推算出IL2的活性。DNA合成量的檢測可采用3HTdR摻入法，而酶的活性可采用MTT比色法，該方法酶活性根據(jù)增殖期細胞線粒體中富含的琥珀酸脫氫酶能使黃色的3(439。,539。，二甲噻唑乙基)2，4二苯四唑溴鹽(MTT)分解成藍色結(jié)晶狀甲瓚(formazan)的特性測得，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，DNA的合成量或上述酶的活性與IL2的量成正比。MTT比色法檢測細胞的活性，反映了活細胞特別是增殖的細胞能量代謝水平，而3HTdR法檢測細胞的活性反映了細胞DNA的合成，由于DNA的合成與細胞的能量代謝密切相關，所以兩種方法結(jié)果是一致的。傳統(tǒng)的檢測 IL2活性的方法是 3HTdR摻入法，該方法具有較好的敏感性和重復性，但需要昂貴的特殊檢測儀器，并且具有同位