【文章內(nèi)容簡介】
擇: EDTA( 1224h)、 肝素 (4872h) ? 樣本洗滌 (wash or nowash) ? 樣 本濃度 ? 細(xì)胞活率 ? 染色步驟(胞外 → 胞內(nèi)) 影響流式結(jié)果的參數(shù)設(shè)置 –閾值 /觸發(fā)信號( Threshold/Triger) –電壓( Voltage) / 增益( Gain) –熒光干擾(補償 Compensate) –圈門 amp。設(shè)門( Gate) –統(tǒng)計( Statistics) ? 閾值 /觸發(fā)信號( Threshold / Triger) – 數(shù)據(jù)采集的前提條件所選擇的信號被稱為閾值或觸發(fā)信號 – 閾值可以量化,大于 該閾值的細(xì)胞信號才會被收集 ,以排除 不必要 雜質(zhì)的干擾 ? 電壓 amp。增益 – 目的:調(diào)節(jié)檢測器的信號擴增程度,信號隨著電壓或增益的增加而增強。 – 作用:通過電壓及增益的調(diào)節(jié)區(qū)分信號強弱不同的細(xì)胞。 – 電壓 amp。增益增加,信號變強;反之,信號變?nèi)酢? ※ 電壓調(diào)節(jié) ? 陰性 對照(同型對照,空白對照 ) : 以陰性群完全出現(xiàn),以正態(tài)分布為標(biāo)準(zhǔn) ,調(diào)節(jié)電壓使陰性對照的本底熒光處于比較低的水平。 ? 熒光 干擾( 補償 Compensate) – 當(dāng)細(xì)胞攜帶兩種或兩種以上的熒光素時 ,受到 激光激發(fā)會發(fā)射出兩種或以上波長的 熒光。 – 由于 目前所使用的 熒光染料發(fā)射譜較寬, 雖然他們之間各自發(fā)射峰值各不相同,彈發(fā)射譜范圍有一定的重疊,會對其他通道上的數(shù)值產(chǎn)生影響。 S I L E N T U N T O U C H A B L E U N T O U C H A B L E Untouchable = 其他染料沒有干擾 (clean row) Silent = 不會漏進其他通道 (clean colu