各種表達(dá)載體(編輯修改稿)
2024-09-01 04:11 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 L L L A A Q P Nco1 Msc1 BamH1 EcoR1 Sal1GCC ATG GCC aaggatcctaagtaagtagaattctgagtaggtaagtcgacaatcgcgtctagagccc cgacgcgctggg A M A * * * * * *3. 表達(dá)載體特點(diǎn): 該原核表達(dá)質(zhì)粒含有噬菌體的重疊λPRPL熱誘導(dǎo)啟動(dòng)子和編碼熱敏感抑制子的C1857基因，可使宿主細(xì)胞在合成蛋白前獲得高密度的宿主細(xì)菌，進(jìn)行高水平目的蛋白表達(dá)，并對(duì)蛋白合成提供緊密控制。PelB分泌信號(hào)肽能指引合成的外源蛋白通過(guò)胞漿膜進(jìn)入胞質(zhì)。特別提示: 在進(jìn)行重組質(zhì)粒時(shí)，最好在N未端用Nco1或Msc1位點(diǎn)，C末端則可用BamHEcoR1位點(diǎn)進(jìn)行拼接。圖示為啟動(dòng)子、PelB分泌信號(hào)肽和多克隆位點(diǎn)區(qū)域 Xho1λPRPL 啟動(dòng)子ggggtgtgtgatacgaaacgaagcattggcgcctcgagtaatttaccaacactactacgttttaactgaaacaa RBS Nde1 actggagact catATG AAA TAC CTA TTG CCT ACG GCA GCC GCT GGA TTG TTA TTA CTC GCG M K Y L L P T A A A G L L L L A Nco1 Msc1 BamH1 EcoR1 Sal1GCC CAG GGC GCC ATG GCC aaggatcctaagtaagtagaattctgagtaggtaagtcgacaatcgcgtctagagccc A Q P A M A * * * * * *說(shuō)明: RBS 為核糖體結(jié)合位點(diǎn)。 * 為終止密碼子 二、真核細(xì)胞表達(dá)載體1. pCMVpNEOBAN載體特點(diǎn): 該真核細(xì)胞表達(dá)載體分子量為6600堿基對(duì)，主要由CMVp啟動(dòng)子、兔β球蛋白基因內(nèi)含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗
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