【文章內容簡介】
L L L A A Q P Nco1 Msc1 BamH1 EcoR1 Sal1GCC ATG GCC aaggatcctaagtaagtagaattctgagtaggtaagtcgacaatcgcgtctagagccc cgacgcgctggg A M A * * * * * *3. 表達載體特點: 該原核表達質粒含有噬菌體的重疊λPRPL熱誘導啟動子和編碼熱敏感抑制子的C1857基因,可使宿主細胞在合成蛋白前獲得高密度的宿主細菌,進行高水平目的蛋白表達,并對蛋白合成提供緊密控制。PelB分泌信號肽能指引合成的外源蛋白通過胞漿膜進入胞質。特別提示: 在進行重組質粒時,最好在N未端用Nco1或Msc1位點,C末端則可用BamHEcoR1位點進行拼接。圖示為啟動子、PelB分泌信號肽和多克隆位點區(qū)域 Xho1λPRPL 啟動子ggggtgtgtgatacgaaacgaagcattggcgcctcgagtaatttaccaacactactacgttttaactgaaacaa RBS Nde1 actggagact catATG AAA TAC CTA TTG CCT ACG GCA GCC GCT GGA TTG TTA TTA CTC GCG M K Y L L P T A A A G L L L L A Nco1 Msc1 BamH1 EcoR1 Sal1GCC CAG GGC GCC ATG GCC aaggatcctaagtaagtagaattctgagtaggtaagtcgacaatcgcgtctagagccc A Q P A M A * * * * * *說明: RBS 為核糖體結合位點。 * 為終止密碼子 二、真核細胞表達載體1. pCMVpNEOBAN載體特點: 該真核細胞表達載體分子量為6600堿基對,主要由CMVp啟動子、兔β球蛋白基因內含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗