【文章內容簡介】 、 非特異性的細胞毒性細胞 非特異性的細胞毒性細胞是一類與哺乳動物的 自然殺傷細胞 相等的免疫細胞。這類細胞在細胞與細胞接觸之后，通過 壞死或主動死亡 可以溶解靶細胞 。在腎臟和腹腔中的這類細胞最多，血中較少。魚類的這類細胞與哺乳動物的 自然殺傷細胞 相比，小且無顆粒，它的靶細胞包括 腫瘤細胞系 、 寄生原生動物 等。 吞噬細胞 吞噬細胞 在免疫應答中起著重要的作用。 吞噬細胞 受病原或宿主產生的 趨化因子 的作用而接近抗原。宿主產生的化學引誘因子包括 補體成分 和 二十碳酸 如 三烯酸 和 脂素 。 魚類的 粒細胞 、 巨噬細胞 和 單核細胞 都具有吞噬功能。 依據(jù)染色特征，魚類的 粒細胞 可分為 嗜堿性 、 嗜酸性 和 中性粒細胞 。 但并不是所有的魚類都具有 這三種粒細胞 ，如 鮭鱒魚類 循環(huán)系統(tǒng)中只有 中性細胞 ，但有的鮭鱒類組織中的一種可被曙紅染色的粒細胞被稱作 嗜酸性顆粒細胞 ，是一種與哺乳動物 肥大細胞 相似的免疫細胞。在炎癥反應中，通常表現(xiàn)為雙相反應，即 粒細胞 先于 巨噬細胞 接近病原 。 三、免疫分子 指機體內參與調節(jié)免疫應答的各種蛋白分子 。 (一 )畜禽免疫分子 免疫細胞膜上分子 體液中免疫分子 免疫球蛋白 補體系統(tǒng) 細胞因子 TCR BCR(如SmIgM) 白細胞分化抗原 MHC分子 機體各種細胞分化不同群時在成熟不同階段、活化不同時期時出現(xiàn)于膜上的蛋白質分子不同，以 cluster of differtiation,CD命名，例如成熟 T細胞都有 CD CD3，分化成 TH則有 CD4， Tc有 CD8等， CD分子在細胞發(fā)揮功能時起作用 其中 補體系統(tǒng) （ plement） 是由存在于人和脊椎動物血清及組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶樣活性的蛋白質 ，以及其調節(jié)蛋白和相關膜蛋白 (受體 )共同組成 。 補體包含： （ 1）固有成分： C1(C1q， C1r， C1s)－ C B、 D、 P 因子、 MBL、絲氨酸蛋白酶。 （ 2）調節(jié)分子： ① 可溶性調節(jié)因子。 ② 膜結合性調節(jié)分子。 （ 3）受體成分： C1qR, CR1, CR2, CR3, C3aR, C5aR等 。 (二 )魚類免疫分子 存在于魚類血液或粘液中的具有非特異性抵抗作用的分子包括 溶菌酶 、 抗蛋白酶 （如 α 巨球蛋白 )、 轉移因子 、 補休 、 C反應性蛋白 、 幾丁質酶 和 Ⅰ 型干擾素 等。這些物質可以 直接分解細菌 (如 溶菌酶、補體 )或 真菌 (如 幾丁質酶 )，或 抑制細菌 (如 轉移因子 )或 病毒 (如 干擾素 )的復制，或作為 調理素 增加 吞噬細胞的吞噬量 (C反應性蛋白、補休 )，乃至 中和細菌 (如 α 巨球蛋白 )。 具有非特異性抵抗作用的分子 具有特異性抵抗作用的分子：抗體 溶菌酶 四、魚類非特異性免疫因素 （一）魚類皮膚保護性屏障 粘液和表皮 是魚類防御第一線，這些屏障的保護作用是極為有效的。有表皮粘液細胞產生的粘液、碎屑易與微生物粘結在一起而將微生物清除。鱗片、表皮 和 真皮 對于物理性侵襲，也起著 象保護盾 一樣的作用，以阻止暴露創(chuàng)傷和防止可能導致的感染。 (1) 粘液 ： 粘液 是魚最外的防御線，含有能抑制寄生物在外表區(qū)生長和寄生的 一些因子 。雖對粘液的抗病原體活性機理的研究不多，但對表皮粘液細胞產物的重要性是普遍承認。 從魚類粘液與其他高等動物分泌物的比較研究，獲得了相類似之處。 人的 眼淚、鼻分泌物和唾液 已知含有 溶菌酶 和能破壞許多細菌細胞壁中 粘肽層 (mucopeptide layer)(即肽聚糖層 )的 一些酶 。這些因子也可能存在于 魚的粘液 中。粘液的不斷脫落和補充，可能對阻止細菌的增殖有了穩(wěn)定的基礎，從而給予魚體以一定的保護作用。魚粘液中自動非特異性防御機制的另一些可能性，包括存在的 蛋白水解酶 （ proteolytic enzyme)和對病原體生長不利的 pH值 。 （ 2）鱗： 魚類鱗片的基部下達真皮結締組織并伸出于皮膚表面外。有些魚的鱗片穿透粘液層，而另一些魚類的鱗片，仍保持著為表皮和真皮所覆蓋。表面的擦傷，有時鱗片脫落，都能使魚體留下易受病原體侵襲的創(chuàng)傷。在這些情況下，無例外地出現(xiàn)炎癥和表面感染。在池塘孵化場，已證明一個傷口是多么易受侵襲性病原體的攻擊。 （ 3）真皮： 真皮位于基底膜下，是皮膚的另一保護屏障，這層的皮膚是由散布著 黑色素細胞（ melanocyte） 即黑色素細胞的纖維結締組織所組成。有血管的真皮組織，散布著毛細血管，這些對體液防御系統(tǒng)是有用的。真皮或經(jīng)由骨膜固定于骨，或與肌肉組織相連。 （ 4）表皮： 皮膚橫切片的顯微觀察，顯示表皮層位于粘液層下。外層是由扁平的 鱗狀上皮細胞 所組成；第二層由 紡錘形細胞 組成；這兩層都散布著球形的 粘液分泌細胞 。第三層細胞較圓，而第四層是由基底膜上伸長的 柱形細胞 所組成。貫穿整個表皮，有時見有游走的 嗜中性白細胞 。魚的表皮區(qū)別于哺乳動物的一個特點是，魚表皮通常是在較下層中可見到 有絲分裂 。這是因為哺乳動物需要堅硬的皮膚層，以防止脫水作用，而魚在水環(huán)境中，不需要這樣的保護作用。 (二 )魚類炎癥反應 無論是由刨傷引起的損害或由某種侵襲性病原體引起的損害，都在損害部位產生一種 速發(fā)型反應或炎癥應答 。人類急性炎癥典型特征包括紅、腫、熱、痛。 前節(jié)中所述的皮膚保護性系統(tǒng)是靜止的，如鱗片是常備的不活動的屏障。而炎癥應答則可說成是一種 警報系統(tǒng) 。當侵害發(fā)生后，機體為了要修復開始的損傷和防止進一步損害，炎癥即為此而起作用。 。 。 。 。 。 。 第三節(jié)復習思考題 第四節(jié) 抗體 (antibody) 一 基本概念 二 免疫球蛋白結構 三 免疫球蛋白生物活性 四 五類免疫球蛋白特性 五 魚類免疫球蛋白特點 一、基本概念 免疫球蛋白 (Immunoglobulin, Ig) 是指存在于人和動物血液 (血清 )、組織液及其它外分泌液中的一類具有抗體活性或與抗體具有相似結構的球蛋白。 抗體 (Antibody) 是指人和動物受到抗原物質刺激后，由 B淋巴細胞轉化為漿細胞后產生的，能與相應抗原發(fā)生特異性結合反應的免疫球蛋白。 抗體是動物機體對抗原物質產生免疫應答的重要物質，主要存在于人和動物血液 (血清 )、組織液及其它外分泌液中，因此將抗體介導的免疫稱為體液免疫 (humoral immunity)。 免疫球蛋白與抗體的關系 抗體是免疫學和功能上的概念，是抗原的對立面，是具有針對性，其 本質就是免疫球蛋白 。而免疫球蛋白是結構和化學本質上的概念，它們并不都具有抗體活性。 也就是說 抗體一定是免疫球蛋白，而免疫球蛋白不一定是抗體。 另外，從分子多樣性上看，抗體具有多樣性，即動物機體可產生針對各種抗原物質的抗體；而免疫球蛋白就其化學結構的差異，只可分為 IgG、 IgA、 IgM、IgD和 IgE。 二、免疫球蛋白結構 基本結構 (1) 四肽鏈結構 兩條重鏈 (heavvy chain, H鏈 ) 兩條輕鏈 (Light chain, L鏈 ) 每條重鏈和輕鏈都有 氨基端 (N端 )和 羧基端 (C端 )。 在 N端，含輕鏈 1/2和重鏈1/4的區(qū)域，其氨基酸排列順序隨抗體特異性不同而有所變化，故稱為可變區(qū) (variable region, V區(qū) )；而 C端，含輕鏈 1/2和重鏈3/4的區(qū)域，其氨基酸較穩(wěn)定，稱為恒定區(qū) (constant region, C區(qū) )。 (2)接合鏈（ Joining chain, J鏈） 使 Ig單體結合在一起的多肽鏈，起穩(wěn)定多聚體的作用。 (3)分泌片（ secretory piece, SP） 是 IgA分子上的一條分子量為 6070kD的多肽鏈，其功能是保護 IgA不受環(huán)境中酶破壞，并介導 IgA轉運 。 Ig的功能區(qū) (1) 抗原結合部位 ： VH和 VL； (2) 遺傳標記區(qū)域 ： CH1； (3) 補體結合位點 ： CH2； (4) Fc受體結合位點 ： CH3。 Ig水解片段 木瓜水解酶可將 Ig水解成 2個 Fab段和 1個 Fc段 胃蛋白酶可將 Ig水解成一個含 雙價抗體活性 的 F(ab”)段和若干小分子多肽碎片。 三、 Ig生物學活性 與抗原特異性結合 激活補體 結合 Fc受體 免疫調節(jié)作用 抗體的免疫原性 四、 Ig分類 Ig結構 IgG、 IgD和 IgE為單體結構； IgA為二聚體； IgM為五聚體 。 Ig類別 (class) 根據(jù) Ig重鏈恒定區(qū) 的結構差異 (γ、 α、 μ、 δ及 ε)，可將 Ig分為 IgG、 IgA、 IgM、 IgD和IgE五類。 五、魚類免疫球蛋白特點 魚類產生的抗體主要是 IgM； 軟骨魚類 IgM為 五倍體 ，而 硬骨魚 為 四倍體 ； 其特性與哺乳動物相似，但比哺乳動物 多一條 J鏈 ； 抗體除存在于 血液 外，還存在于 皮膚粘膜、腸道黏液和膽汁 中。 影響魚類抗體產生的因素 A、魚種 B、抗原物質 C、溫度： Cushing