【文章內(nèi)容簡介】 、 非特異性的細(xì)胞毒性細(xì)胞 非特異性的細(xì)胞毒性細(xì)胞是一類與哺乳動物的 自然殺傷細(xì)胞 相等的免疫細(xì)胞。這類細(xì)胞在細(xì)胞與細(xì)胞接觸之后，通過 壞死或主動死亡 可以溶解靶細(xì)胞 。在腎臟和腹腔中的這類細(xì)胞最多，血中較少。魚類的這類細(xì)胞與哺乳動物的 自然殺傷細(xì)胞 相比，小且無顆粒，它的靶細(xì)胞包括 腫瘤細(xì)胞系 、 寄生原生動物 等。 吞噬細(xì)胞 吞噬細(xì)胞 在免疫應(yīng)答中起著重要的作用。 吞噬細(xì)胞 受病原或宿主產(chǎn)生的 趨化因子 的作用而接近抗原。宿主產(chǎn)生的化學(xué)引誘因子包括 補(bǔ)體成分 和 二十碳酸 如 三烯酸 和 脂素 。 魚類的 粒細(xì)胞 、 巨噬細(xì)胞 和 單核細(xì)胞 都具有吞噬功能。 依據(jù)染色特征，魚類的 粒細(xì)胞 可分為 嗜堿性 、 嗜酸性 和 中性粒細(xì)胞 。 但并不是所有的魚類都具有 這三種粒細(xì)胞 ，如 鮭鱒魚類 循環(huán)系統(tǒng)中只有 中性細(xì)胞 ，但有的鮭鱒類組織中的一種可被曙紅染色的粒細(xì)胞被稱作 嗜酸性顆粒細(xì)胞 ，是一種與哺乳動物 肥大細(xì)胞 相似的免疫細(xì)胞。在炎癥反應(yīng)中，通常表現(xiàn)為雙相反應(yīng)，即 粒細(xì)胞 先于 巨噬細(xì)胞 接近病原 。 三、免疫分子 指機(jī)體內(nèi)參與調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的各種蛋白分子 。 (一 )畜禽免疫分子 免疫細(xì)胞膜上分子 體液中免疫分子 免疫球蛋白 補(bǔ)體系統(tǒng) 細(xì)胞因子 TCR BCR(如SmIgM) 白細(xì)胞分化抗原 MHC分子 機(jī)體各種細(xì)胞分化不同群時在成熟不同階段、活化不同時期時出現(xiàn)于膜上的蛋白質(zhì)分子不同，以 cluster of differtiation,CD命名，例如成熟 T細(xì)胞都有 CD CD3，分化成 TH則有 CD4， Tc有 CD8等， CD分子在細(xì)胞發(fā)揮功能時起作用 其中 補(bǔ)體系統(tǒng) （ plement） 是由存在于人和脊椎動物血清及組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶樣活性的蛋白質(zhì) ，以及其調(diào)節(jié)蛋白和相關(guān)膜蛋白 (受體 )共同組成 。 補(bǔ)體包含： （ 1）固有成分： C1(C1q， C1r， C1s)－ C B、 D、 P 因子、 MBL、絲氨酸蛋白酶。 （ 2）調(diào)節(jié)分子： ① 可溶性調(diào)節(jié)因子。 ② 膜結(jié)合性調(diào)節(jié)分子。 （ 3）受體成分： C1qR, CR1, CR2, CR3, C3aR, C5aR等 。 (二 )魚類免疫分子 存在于魚類血液或粘液中的具有非特異性抵抗作用的分子包括 溶菌酶 、 抗蛋白酶 （如 α 巨球蛋白 )、 轉(zhuǎn)移因子 、 補(bǔ)休 、 C反應(yīng)性蛋白 、 幾丁質(zhì)酶 和 Ⅰ 型干擾素 等。這些物質(zhì)可以 直接分解細(xì)菌 (如 溶菌酶、補(bǔ)體 )或 真菌 (如 幾丁質(zhì)酶 )，或 抑制細(xì)菌 (如 轉(zhuǎn)移因子 )或 病毒 (如 干擾素 )的復(fù)制，或作為 調(diào)理素 增加 吞噬細(xì)胞的吞噬量 (C反應(yīng)性蛋白、補(bǔ)休 )，乃至 中和細(xì)菌 (如 α 巨球蛋白 )。 具有非特異性抵抗作用的分子 具有特異性抵抗作用的分子：抗體 溶菌酶 四、魚類非特異性免疫因素 （一）魚類皮膚保護(hù)性屏障 粘液和表皮 是魚類防御第一線，這些屏障的保護(hù)作用是極為有效的。有表皮粘液細(xì)胞產(chǎn)生的粘液、碎屑易與微生物粘結(jié)在一起而將微生物清除。鱗片、表皮 和 真皮 對于物理性侵襲，也起著 象保護(hù)盾 一樣的作用，以阻止暴露創(chuàng)傷和防止可能導(dǎo)致的感染。 (1) 粘液 ： 粘液 是魚最外的防御線，含有能抑制寄生物在外表區(qū)生長和寄生的 一些因子 。雖對粘液的抗病原體活性機(jī)理的研究不多，但對表皮粘液細(xì)胞產(chǎn)物的重要性是普遍承認(rèn)。 從魚類粘液與其他高等動物分泌物的比較研究，獲得了相類似之處。 人的 眼淚、鼻分泌物和唾液 已知含有 溶菌酶 和能破壞許多細(xì)菌細(xì)胞壁中 粘肽層 (mucopeptide layer)(即肽聚糖層 )的 一些酶 。這些因子也可能存在于 魚的粘液 中。粘液的不斷脫落和補(bǔ)充，可能對阻止細(xì)菌的增殖有了穩(wěn)定的基礎(chǔ)，從而給予魚體以一定的保護(hù)作用。魚粘液中自動非特異性防御機(jī)制的另一些可能性，包括存在的 蛋白水解酶 （ proteolytic enzyme)和對病原體生長不利的 pH值 。 （ 2）鱗： 魚類鱗片的基部下達(dá)真皮結(jié)締組織并伸出于皮膚表面外。有些魚的鱗片穿透粘液層，而另一些魚類的鱗片，仍保持著為表皮和真皮所覆蓋。表面的擦傷，有時鱗片脫落，都能使魚體留下易受病原體侵襲的創(chuàng)傷。在這些情況下，無例外地出現(xiàn)炎癥和表面感染。在池塘孵化場，已證明一個傷口是多么易受侵襲性病原體的攻擊。 （ 3）真皮： 真皮位于基底膜下，是皮膚的另一保護(hù)屏障，這層的皮膚是由散布著 黑色素細(xì)胞（ melanocyte） 即黑色素細(xì)胞的纖維結(jié)締組織所組成。有血管的真皮組織，散布著毛細(xì)血管，這些對體液防御系統(tǒng)是有用的。真皮或經(jīng)由骨膜固定于骨，或與肌肉組織相連。 （ 4）表皮： 皮膚橫切片的顯微觀察，顯示表皮層位于粘液層下。外層是由扁平的 鱗狀上皮細(xì)胞 所組成；第二層由 紡錘形細(xì)胞 組成；這兩層都散布著球形的 粘液分泌細(xì)胞 。第三層細(xì)胞較圓，而第四層是由基底膜上伸長的 柱形細(xì)胞 所組成。貫穿整個表皮，有時見有游走的 嗜中性白細(xì)胞 。魚的表皮區(qū)別于哺乳動物的一個特點是，魚表皮通常是在較下層中可見到 有絲分裂 。這是因為哺乳動物需要堅硬的皮膚層，以防止脫水作用，而魚在水環(huán)境中，不需要這樣的保護(hù)作用。 (二 )魚類炎癥反應(yīng) 無論是由刨傷引起的損害或由某種侵襲性病原體引起的損害，都在損害部位產(chǎn)生一種 速發(fā)型反應(yīng)或炎癥應(yīng)答 。人類急性炎癥典型特征包括紅、腫、熱、痛。 前節(jié)中所述的皮膚保護(hù)性系統(tǒng)是靜止的，如鱗片是常備的不活動的屏障。而炎癥應(yīng)答則可說成是一種 警報系統(tǒng) 。當(dāng)侵害發(fā)生后，機(jī)體為了要修復(fù)開始的損傷和防止進(jìn)一步損害，炎癥即為此而起作用。 。 。 。 。 。 。 第三節(jié)復(fù)習(xí)思考題 第四節(jié) 抗體 (antibody) 一 基本概念 二 免疫球蛋白結(jié)構(gòu) 三 免疫球蛋白生物活性 四 五類免疫球蛋白特性 五 魚類免疫球蛋白特點 一、基本概念 免疫球蛋白 (Immunoglobulin, Ig) 是指存在于人和動物血液 (血清 )、組織液及其它外分泌液中的一類具有抗體活性或與抗體具有相似結(jié)構(gòu)的球蛋白。 抗體 (Antibody) 是指人和動物受到抗原物質(zhì)刺激后，由 B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞后產(chǎn)生的，能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白。 抗體是動物機(jī)體對抗原物質(zhì)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要物質(zhì)，主要存在于人和動物血液 (血清 )、組織液及其它外分泌液中，因此將抗體介導(dǎo)的免疫稱為體液免疫 (humoral immunity)。 免疫球蛋白與抗體的關(guān)系 抗體是免疫學(xué)和功能上的概念，是抗原的對立面，是具有針對性，其 本質(zhì)就是免疫球蛋白 。而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)和化學(xué)本質(zhì)上的概念，它們并不都具有抗體活性。 也就是說 抗體一定是免疫球蛋白，而免疫球蛋白不一定是抗體。 另外，從分子多樣性上看，抗體具有多樣性，即動物機(jī)體可產(chǎn)生針對各種抗原物質(zhì)的抗體；而免疫球蛋白就其化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異，只可分為 IgG、 IgA、 IgM、IgD和 IgE。 二、免疫球蛋白結(jié)構(gòu) 基本結(jié)構(gòu) (1) 四肽鏈結(jié)構(gòu) 兩條重鏈 (heavvy chain, H鏈 ) 兩條輕鏈 (Light chain, L鏈 ) 每條重鏈和輕鏈都有 氨基端 (N端 )和 羧基端 (C端 )。 在 N端，含輕鏈 1/2和重鏈1/4的區(qū)域，其氨基酸排列順序隨抗體特異性不同而有所變化，故稱為可變區(qū) (variable region, V區(qū) )；而 C端，含輕鏈 1/2和重鏈3/4的區(qū)域，其氨基酸較穩(wěn)定，稱為恒定區(qū) (constant region, C區(qū) )。 (2)接合鏈（ Joining chain, J鏈） 使 Ig單體結(jié)合在一起的多肽鏈，起穩(wěn)定多聚體的作用。 (3)分泌片（ secretory piece, SP） 是 IgA分子上的一條分子量為 6070kD的多肽鏈，其功能是保護(hù) IgA不受環(huán)境中酶破壞，并介導(dǎo) IgA轉(zhuǎn)運(yùn) 。 Ig的功能區(qū) (1) 抗原結(jié)合部位 ： VH和 VL； (2) 遺傳標(biāo)記區(qū)域 ： CH1； (3) 補(bǔ)體結(jié)合位點 ： CH2； (4) Fc受體結(jié)合位點 ： CH3。 Ig水解片段 木瓜水解酶可將 Ig水解成 2個 Fab段和 1個 Fc段 胃蛋白酶可將 Ig水解成一個含 雙價抗體活性 的 F(ab”)段和若干小分子多肽碎片。 三、 Ig生物學(xué)活性 與抗原特異性結(jié)合 激活補(bǔ)體 結(jié)合 Fc受體 免疫調(diào)節(jié)作用 抗體的免疫原性 四、 Ig分類 Ig結(jié)構(gòu) IgG、 IgD和 IgE為單體結(jié)構(gòu)； IgA為二聚體； IgM為五聚體 。 Ig類別 (class) 根據(jù) Ig重鏈恒定區(qū) 的結(jié)構(gòu)差異 (γ、 α、 μ、 δ及 ε)，可將 Ig分為 IgG、 IgA、 IgM、 IgD和IgE五類。 五、魚類免疫球蛋白特點 魚類產(chǎn)生的抗體主要是 IgM； 軟骨魚類 IgM為 五倍體 ，而 硬骨魚 為 四倍體 ； 其特性與哺乳動物相似，但比哺乳動物 多一條 J鏈 ； 抗體除存在于 血液 外，還存在于 皮膚粘膜、腸道黏液和膽汁 中。 影響魚類抗體產(chǎn)生的因素 A、魚種 B、抗原物質(zhì) C、溫度： Cushing