【正文】 三 、免疫分子 四 、非特異性免疫因素 一、免疫器官 中樞免疫器官 (免疫細(xì)胞產(chǎn)生 與成熟場所 ) 骨髓 (bone marrow) 胸腺 (thymus) 禽法氏囊 (bursa) 外周免疫器官 (免疫細(xì)胞分布 及應(yīng)答場所 ) 脾臟 (spleen ) 淋巴結(jié) (lymph node) 淋巴樣組織 (lymphoid tissue) 免 疫 器 官 魚類免疫器官 主要包括提供 T細(xì)胞分化環(huán)境的 胸腺 以及次級(jí)淋巴組織即 腎臟 和 脾臟 。 然而， 硬骨魚類 的脾臟無此分化，是 淋巴系統(tǒng)組織 發(fā)生中最后一個(gè)發(fā)生的器官 。掃描電鏡顯示腹腔巨噬細(xì)胞粘附于玻璃表面（右）。在腎臟和腹腔中的這類細(xì)胞最多，血中較少。在炎癥反應(yīng)中，通常表現(xiàn)為雙相反應(yīng)，即 粒細(xì)胞 先于 巨噬細(xì)胞 接近病原 。這些物質(zhì)可以 直接分解細(xì)菌 (如 溶菌酶、補(bǔ)體 )或 真菌 (如 幾丁質(zhì)酶 )，或 抑制細(xì)菌 (如 轉(zhuǎn)移因子 )或 病毒 (如 干擾素 )的復(fù)制，或作為 調(diào)理素 增加 吞噬細(xì)胞的吞噬量 (C反應(yīng)性蛋白、補(bǔ)休 )，乃至 中和細(xì)菌 (如 α 巨球蛋白 )。這些因子也可能存在于 魚的粘液 中。 （ 3）真皮： 真皮位于基底膜下，是皮膚的另一保護(hù)屏障，這層的皮膚是由散布著 黑色素細(xì)胞（ melanocyte） 即黑色素細(xì)胞的纖維結(jié)締組織所組成。這是因?yàn)椴溉閯?dòng)物需要堅(jiān)硬的皮膚層，以防止脫水作用，而魚在水環(huán)境中，不需要這樣的保護(hù)作用。 。而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)和化學(xué)本質(zhì)上的概念，它們并不都具有抗體活性。 Ig水解片段 木瓜水解酶可將 Ig水解成 2個(gè) Fab段和 1個(gè) Fc段 胃蛋白酶可將 Ig水解成一個(gè)含 雙價(jià)抗體活性 的 F(ab”)段和若干小分子多肽碎片。 2．圖解 Ig單體的分子結(jié)構(gòu)。 (1) 致敏階段 又稱 感應(yīng)階段 ，是 抗原物質(zhì) 進(jìn)入體內(nèi)， 抗原遞呈細(xì)胞 對(duì)其識(shí)別、捕獲、加工處理和提呈，以及 抗原特異性淋巴細(xì)胞 (T、 B淋巴細(xì)胞 )對(duì)抗原的識(shí)別階段。 完全變應(yīng)原 ： 如異種血清、蛋白質(zhì)、花粉、微生物、寄生蟲等 不完全變應(yīng)原 ： 如藥物、青霉素等 2. 變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生過程 (1)致敏階段 ：變應(yīng)原初次進(jìn)入機(jī)體 初次免疫應(yīng)答 ， 產(chǎn)生免疫物質(zhì) (Ab或 TDTH) 機(jī)體致敏狀態(tài) (2)發(fā)敏階段 ：變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體 作用到 Ab或 TDTH 發(fā)生癥狀 根據(jù)變態(tài)反應(yīng)發(fā)生的機(jī)理和臨床特點(diǎn)，可分為 4個(gè)類型： Ⅰ 型變態(tài)反應(yīng) (過敏反應(yīng) ) Ⅱ 型變態(tài)反應(yīng) (細(xì)胞溶解型或細(xì)胞毒型 ) Ⅲ 型變態(tài)反應(yīng) (免疫復(fù)合物型或血管炎型 ) Ⅳ 型變態(tài)反應(yīng) (遲發(fā)型超敏反應(yīng) ) 4. 變態(tài)反應(yīng)的特點(diǎn)： A. 四型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生比較快，可由抗體介導(dǎo)，并通過血清中的抗體被動(dòng)轉(zhuǎn)移給正常動(dòng)物。 3. 免疫耐受產(chǎn)生的條件 (1) 抗原方面 A. 抗原理化性狀： 一般而言，小分子、可溶性的非聚合單體物質(zhì)常為耐受原； B. 抗原劑量： 一般抗原量越大或動(dòng)物年齡越小，越容易誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫耐受； C. 抗原注射途徑 ：靜脈注射易誘導(dǎo)免疫耐受，皮下和肌肉注射最難產(chǎn)生耐受性； D. 有無免疫佐劑： 不加免疫佐劑的抗原較易誘生免疫耐受 (2) 機(jī)體方面 A. 機(jī)體發(fā)育程度或年齡： 胚胎期最易誘導(dǎo)耐受性 B. 動(dòng)物品種或品系： 一般 在胚胎期易誘導(dǎo)耐受性。 第五節(jié)復(fù)習(xí)思考題 一 、 免疫學(xué)診斷 二 、 免疫預(yù)防 三 、 免疫治療 第六節(jié) 免疫學(xué)應(yīng)用 一 、 免疫學(xué)診斷 (一 )免疫診斷試劑 免疫學(xué)診斷是應(yīng)用已知診斷試劑 (抗體或抗原 )，對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行抗原或抗體的測定，從而診斷疾病。 由于沉淀反應(yīng)抗原多系膠體溶液。 原理 : 熒光素在超低濃度時(shí)可被短波光源激發(fā)，在熒光顯微鏡下可觀察到熒光。 包括： 疫苗、診斷試劑 和 免疫血清 。 E. 多聯(lián)苗 不同種病原微生物聯(lián)合制成的疫苗。 此種疫苗安全性好 ， 不易返祖；其免疫接種與強(qiáng)毒感染相似 ， 機(jī)體可對(duì)病毒的多種抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答；免疫力堅(jiān)實(shí) ， 免疫期長 ， 尤其是適于局部接種 ， 誘導(dǎo)產(chǎn)生黏膜免疫力 ，因而是較理想的疫苗 。 5．熒光抗體技術(shù)的原理及常用熒光素。 用弱毒疫苗緊急接種治療病毒病 原則：早期、大量、重復(fù)應(yīng)用和防止過敏反應(yīng) 第六節(jié)復(fù)習(xí)思考題 1．診斷試劑的種類與應(yīng)用 。 基因工程乙肝疫苗 b. 基因工程活載體苗 是用基因工程技術(shù)將保護(hù)性抗原基因 （ 目的基因 ） 轉(zhuǎn)移到載體中 ， 使之表達(dá) 。 特點(diǎn)： （ 1）研制時(shí)間較短，安全，可常溫保存； （ 2）只產(chǎn)生體液免疫，免疫效果比弱毒疫苗差； （ 3）用量較大，須加入適當(dāng)?shù)淖魟?亦可用已知診斷血清或標(biāo)記抗體 ， 檢查動(dòng)物體內(nèi)及排泄物中是否存在特異性抗原 ， 用以檢查病原體的存在 。 B. 沉淀試驗(yàn) C. 酶標(biāo)抗體技術(shù) (Enzymelabelled antibody technique) 是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶催化反應(yīng)的高敏感性而建立起來的免疫檢測技術(shù)。 (二 )常用免疫血清學(xué)診斷技術(shù) 常用免疫血清學(xué)診斷技術(shù)的類型 （ 1） 凝聚性反應(yīng) ：凝集試驗(yàn)和沉淀試驗(yàn) （ 2） 標(biāo)記抗體技術(shù) ：熒光抗體技術(shù)、酶標(biāo)抗體技術(shù)等 （ 3） 有補(bǔ)體參與的反應(yīng) ：如補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng) （ 4） 中和反應(yīng) ：如病毒中和試驗(yàn)、毒素中和試驗(yàn) 凝集試驗(yàn) 酶標(biāo)抗體技術(shù) A. 凝集反應(yīng) 當(dāng)顆粒性抗原與其相應(yīng)抗血清混合時(shí) ， 在一定濃度的電解質(zhì)環(huán)境中 ， 抗原凝集成大小不等的凝集塊 ， 叫 凝集反應(yīng) 。 1．免疫應(yīng)答的概念、特點(diǎn)與類型。 D. 在同一個(gè)體可能同時(shí)存在兩種或兩種以上的變態(tài)反應(yīng) 。這個(gè)階段有多種細(xì)胞間的協(xié)作和多種細(xì)胞因子的參加。 生理性應(yīng)答 (免疫保護(hù) ) 免疫 應(yīng)答 類型 對(duì)非己抗原正應(yīng)答 ， 免受外源抗原侵害 (免疫保護(hù) ) 病理性應(yīng)答 (免疫損傷 ) 對(duì)自身抗原負(fù)應(yīng)答 ， 保護(hù)自身組織不損傷 (免疫耐受 ) 對(duì)非己抗原過高應(yīng)答 ， 引起變態(tài)反應(yīng) 對(duì)非己抗原低應(yīng)答或負(fù)應(yīng)答 ， 導(dǎo)致感染擴(kuò)散或腫瘤發(fā)生 對(duì)自身抗原過應(yīng)答 ， 引起自身免疫性疾病 (二 )免疫應(yīng)答的一般規(guī)律 免疫應(yīng)答的場所 抗原遞呈細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的協(xié)作 ， 是特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì)基礎(chǔ) 。 影響魚類抗體產(chǎn)生的因素 A、魚種 B、抗原物質(zhì) C、溫度： Cushing于加利福尼亞工藝研究所工作期間，曾用干的海膽精液接種養(yǎng)在不同溫度下的鯉魚和鯽魚，隨后在血清中相繼產(chǎn)生凝集抗體。 在 N端，含輕鏈 1/2和重鏈1/4的區(qū)域，其氨基酸排列順序隨抗體特異性不同而有所變化，故稱為可變區(qū) (variable region, V區(qū) )；而 C端，含輕鏈 1/2和重鏈3/4的區(qū)域，其氨基酸較穩(wěn)定，稱為恒定區(qū) (constant region, C區(qū) )。 第三節(jié)復(fù)習(xí)思考題 第四節(jié) 抗體 (antibody) 一 基本概念 二 免疫球蛋白結(jié)構(gòu) 三 免疫球蛋白生物活性 四 五類免疫球蛋白特性 五 魚類免疫球蛋白特點(diǎn) 一、基本概念 免疫球蛋白 (Immunoglobulin, Ig) 是指存在于人和動(dòng)物血液 (血清 )、組織液及其它外分泌液中的一類具有抗體活性或與抗體具有相似結(jié)構(gòu)的球蛋白。而炎癥應(yīng)答則可說成是一種 警報(bào)系統(tǒng) 。外層是由扁平的 鱗狀上皮細(xì)胞 所組成；第二層由 紡錘形細(xì)胞 組成；這兩層都散布著球形的 粘液分泌細(xì)胞 。有些魚的鱗片穿透粘液層，而另一些魚類的鱗片，仍保持著為表皮和真皮所覆蓋。 (1) 粘液 ： 粘液 是魚最外的防御線，含有能抑制寄生物在外表區(qū)生長和寄生的 一些因子 。 （ 2）調(diào)節(jié)分子： ① 可溶性調(diào)節(jié)因子。宿主產(chǎn)生的化學(xué)引誘因子包括 補(bǔ)體成分 和 二十碳酸 如 三烯酸 和 脂素 。 發(fā)現(xiàn)魚類具有這 兩種淋巴細(xì)胞的功能 已有多年，但近幾年才利用抗 IgM單克隆抗體明確地證明 硬骨魚類 有獨(dú)立的淋巴細(xì)胞種群，即相對(duì)于哺乳動(dòng)物的 T和 B淋巴細(xì)胞。 這些分散的淋巴組織在 免疫原的攝取 方面有著重要的作用，因而在養(yǎng)殖魚類的免疫保護(hù)方面有著重要的意義，成為 研究的焦點(diǎn) 。 成魚的頭腎已失去 排泄 的功能，卻保留了 造血和內(nèi)分泌 的功能。 4． 佐劑的作用機(jī)制 ① 改變抗原物理性狀 ， 利于抗原緩慢釋放 ， 延長滯留時(shí)間； ② 利于抗原被巨噬細(xì)胞吞噬 ， 促進(jìn)抗原提呈； ③ 刺激淋巴細(xì)胞增殖和分化 ， 增強(qiáng)和擴(kuò)大免疫應(yīng)答能力 。 2． 動(dòng)物免疫血清 免疫血清 ， 對(duì)本種動(dòng)物具有治療疾病的作用；對(duì)另一種動(dòng)物 ， 則是異種蛋白 ， 具有抗原性 。 一個(gè)抗原分子可具有 一種或幾種不同的抗原決定簇 ， 每種決定簇只有一種抗原特異性 。 另外 ， 還應(yīng)