【正文】 階段，形成一串孢子，成熟后孢子就單個(gè)釋放，孢子的形狀、顏色和孢子表面狀況等也是菌種鑒定的重要依據(jù)。多數(shù)為致病菌。體外組織細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常被支原體污染；原體有感染性、始體無感染性。1） 球狀真菌：酵母（單細(xì)胞）2） 絲狀真菌：霉菌（多細(xì)胞） [基本要求]1．了解：真菌的分類、細(xì)胞結(jié)構(gòu)與培養(yǎng)特征。酵母菌進(jìn)行一系列的芽殖后，如果長大的子細(xì)胞與母細(xì)胞不立即分離，其間以狹小的面積相連，這種藕節(jié)狀細(xì)胞串稱為假絲。無性孢子(二) 壁、膜、質(zhì)、核、細(xì)胞器、液泡（真核）3.包膜(envelope)=脂質(zhì)（宿主）+蛋白質(zhì)（病毒基因編碼）。線狀、單正鏈、二倍體HIV第四節(jié)2．溫和性噬菌體、溶源菌和前噬菌體噬菌體感染宿主細(xì)胞后，并不立即引起宿主細(xì)胞裂解，噬菌體與細(xì)胞建立穩(wěn)定的共存關(guān)系，噬菌體DNA整合(integration)至細(xì)菌染色體中，并隨宿主細(xì)胞的分裂而傳代，這類噬菌體稱為溫和性噬菌體(temperate phage)或溶源噬菌體（lysogenic phage）。167。溶解循環(huán)中，以雙鏈環(huán)狀閉合DNA為模板復(fù)制核酸和生物合成蛋白質(zhì)，然后自身裝配起來，產(chǎn)生完整的病毒顆粒，最后細(xì)胞破裂，成熟的噬菌體釋放出來。噬菌體可用于細(xì)菌的鑒定和分型。252。且HA，NA易變異，而引起大流行。表為HBV抗原抗體檢測(cè)結(jié)果的臨床分析HBsAgHBeAg抗HBs抗HBe抗HBc臨床判斷+感染HBV，結(jié)合肝功能判斷病情++急慢性乙肝或無癥狀攜帶者，傳染性強(qiáng)+++同上（大三陽）+++乙肝恢復(fù)期（小三陽）++微生物的營養(yǎng)與代謝營養(yǎng)（nutrition）：指生物體從外部環(huán)境中攝取對(duì)其生命活動(dòng)必需的能量和物質(zhì)，通過吸收利用以滿足正常生長和繁殖需要的一種最基本的生理功能。252。（5）兼性厭氧菌：有氧無氧均能生長，但有氧時(shí)生長較好，大多數(shù)病原性細(xì)菌屬于此類。 生長曲線：少量菌種接種到恒定容積的液體培養(yǎng)基中，提供最適培養(yǎng)條件培養(yǎng)，定時(shí)測(cè)定培養(yǎng)液中的細(xì)胞數(shù)，以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo)，以細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)或生長速率為縱座標(biāo)作圖。167。167。 同步生長：一個(gè)細(xì)胞群體中各個(gè)細(xì)胞都在同一時(shí)間進(jìn)行分裂的狀態(tài)，稱為同步生長（synchronous growth），進(jìn)行同步分裂的細(xì)胞稱為同步細(xì)胞。 無菌（asepsis）：不含活菌； 無菌技術(shù)（aseptic technique）：在進(jìn)行外科手術(shù)或分離轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)時(shí)防止其它微生物污染實(shí)驗(yàn)材料或?qū)嶒?yàn)材料污染環(huán)境的操作方法。3．重點(diǎn)掌握：質(zhì)粒的概念、基本特性及重要質(zhì)粒；基因突變的概念，特性，分子機(jī)制；轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念、條件和過程；營養(yǎng)缺陷突變株及應(yīng)用。表型飾變：相同基因型的微生物在不同環(huán)境下表現(xiàn)不同的表型，是暫時(shí)的、非遺傳性的改變。遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)一、核物質(zhì)——染色質(zhì)、染色體真核生物的遺傳物質(zhì)：DNA→核小體→纖絲→螺線管→超螺旋體→染色體①核小體由約200bp DNA（2nm）和5種組蛋白構(gòu)成；②核小體排列成串珠狀染色質(zhì)纖絲（10nm）；③染色質(zhì)纖絲形成30nm的螺線管（solennoid）；④螺線管組成伸展的大環(huán)狀結(jié)構(gòu)（300nm）；⑤大環(huán)狀結(jié)構(gòu)構(gòu)成復(fù)雜的染色質(zhì)形態(tài)。攜帶F質(zhì)粒的菌株稱為F+菌株（相當(dāng)于雄性），無F質(zhì)粒的菌株稱為F菌株（相當(dāng)于雌性）。包括插入序列IS，Tn轉(zhuǎn)座子，轉(zhuǎn)座噬菌體。 表型：所需營養(yǎng)物的前三個(gè)英文字母，但第1個(gè)字母大寫，且不用斜體：HisC在具體使用時(shí)多用hisC和hisC+ ，分別表示缺陷型和野生型。條件致死突變型（conditional lethal mutant）某菌株或病毒經(jīng)基因突變后，在某種條件下可正常地生長、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型，而在另一種條件下卻無法生長、繁殖，這種突變類型稱為條件致死突變型。 第三節(jié)Ca2＋、Mg2＋。不含F(xiàn)因子，沒有性菌毛，但可以通過252。溫和噬菌體感染細(xì)胞后使之發(fā)生溶源化，因噬菌體的基因整合到宿主染色體上，而使后者獲得了新性狀的現(xiàn)象。能將一個(gè)細(xì)菌宿主的部分染色體或質(zhì)粒DNA帶到另一個(gè)細(xì)菌的噬菌體稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體。F因子獨(dú)立存在，細(xì)胞表面有性菌毛。（三）接合（conjugation，mating）供體菌和受體菌通過細(xì)胞直接接觸，遺傳物質(zhì)自供體菌轉(zhuǎn)移入受體菌，使后者獲得前者的部分遺傳性狀，這種基因轉(zhuǎn)移方式稱為接合。一、原核生物的基因重組（一）轉(zhuǎn)化（transformation）受體菌（recipient cell）直接吸收供體菌（donor cell）的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為轉(zhuǎn)化。5.表示方法：strr基因突變和誘變育種1.（3）Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細(xì)菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株（抑制近親），而宿主不受其產(chǎn)生的細(xì)菌素的影響。定義和特點(diǎn)質(zhì)粒：一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物細(xì)胞中。 遺傳型（genotype）：又稱基因型，生物個(gè)體含有的全部遺傳基因所攜帶的遺傳信息。（50% lethal dose,LD50)：評(píng)定某化學(xué)藥物毒性強(qiáng)弱的指標(biāo)，指在一定條件下，某化學(xué)藥劑殺死50%試驗(yàn)動(dòng)物的劑量。測(cè)定結(jié)果為總菌數(shù)。167。）——稱為遲效碳源（或氮源）。）芽胞于對(duì)數(shù)生長期末期開始形成、穩(wěn)定期大量形成、衰亡期釋放，有利于菌種保藏。 在細(xì)菌個(gè)體生長里，每個(gè)細(xì)菌分裂繁殖一代所需的時(shí)間為代時(shí)（Generation time），代時(shí)通常以G表示。（1）專性需氧菌：枯草芽胞桿菌。 吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式：一、 簡單擴(kuò)散 ( simple diffusion) eg：H2O，O2，CO2，甘油，乙醇，脂肪酸等。熱不穩(wěn)定，對(duì)消毒劑和去污劑敏感。HBeAg：可溶性蛋白，MW大約19000 Da，游離于血清中。噬菌體表達(dá)的產(chǎn)物存在于噬菌體表面，將噬菌體用于基因工程抗體庫的建立。252。溶源性細(xì)菌對(duì)同源的或其本身的噬菌體不敏感，這種特性稱為“免疫性”，即這些噬菌體進(jìn)入溶源性細(xì)胞后，既不能增殖，也不導(dǎo)致細(xì)胞裂解。噬菌體轉(zhuǎn)換為前噬菌體，細(xì)菌細(xì)胞則溶源化。167。為了判斷噬菌體數(shù)目的多少，可通過連續(xù)稀釋法在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行測(cè)定，以最大稀釋度還能溶解相應(yīng)細(xì)菌判為該噬菌體的效價(jià)。252。2．?dāng)M病毒（Virusoid）：只含不具單獨(dú)侵染性的RNA組分，依靠輔助病毒的存在才能復(fù)制，丁型肝炎病毒3．朊病毒（prion不完全環(huán)狀雙鏈HBVRNAssRNA線狀、單正鏈脊髓灰質(zhì)炎病毒、TMV（2）螺旋對(duì)稱型：如煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus)、狂犬病毒(Rabies virus)等。病毒：一類納米(nm)級(jí)，體積微小，結(jié)構(gòu)簡單（能通過細(xì)菌濾器），含一種類型核酸（DNA or RNA），具有感染性，必須在活細(xì)胞內(nèi)才能生長增殖（宿主特異性）的非細(xì)胞型微生物 。有性繁殖（經(jīng)過兩性細(xì)胞結(jié)合產(chǎn)生新個(gè)體）：質(zhì)配→核配→減數(shù)分裂→有性孢子經(jīng)過兩性細(xì)胞結(jié)合而形成的孢子稱為有性孢子，包括卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子霉菌的有性繁殖分為三個(gè)階段，即質(zhì)配、核配和減數(shù)分裂。第二節(jié) 霉菌（Mold）霉菌：是絲狀真菌的一個(gè)俗稱，意即“會(huì)引起物品霉變的真菌”，通常指那些菌絲體較發(fā)達(dá)又不產(chǎn)生大型柔質(zhì)子實(shí)體結(jié)構(gòu)的真菌。無性繁殖（budding）：主要，成熟細(xì)胞長出小芽，到一定程度后脫離母體繼續(xù)長成新個(gè)體。啤酒酵母（Saccharomyces167。2.人工培養(yǎng)營養(yǎng)要求苛刻，需膽固醇252。 可透過細(xì)菌過濾器：支原體、立克次體、衣原體252。 對(duì)溶菌酶和抗生素敏感167。伴胞晶體（parasporal crystal）：在形成芽孢的同時(shí)，在芽孢旁形成一個(gè)菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體（即δ內(nèi)毒素）。 細(xì)菌芽胞的結(jié)構(gòu)由芽胞外壁、芽胞殼、皮層、和核心組成。帶有性菌毛的細(xì)菌具有致育性，稱F+菌株，它在細(xì)菌的接合中與遺傳物質(zhì)的傳遞有關(guān)；同時(shí)，性菌毛也是某些噬菌體吸附的受體。252。有的莢膜物質(zhì)具抗原性，可用于細(xì)菌分型，作為鑒定細(xì)菌的依據(jù)之一。 莢膜對(duì)細(xì)胞的功能①252。核質(zhì)(nuclear material)由大型環(huán)狀雙鏈DNA纖絲不規(guī)則地折疊或纏繞而構(gòu)成的無核膜、核仁的區(qū)域。又稱迂回體(volutin)，主要成分為多聚磷酸鹽，用藍(lán)色染科(甲苯胺藍(lán)、美藍(lán))可染成紫紅色，用特殊染色法可染成與細(xì)菌其它部位不同的顏色，故名。細(xì)胞膜是細(xì)菌鞭毛的著生點(diǎn)，為細(xì)菌鞭毛的運(yùn)動(dòng)提供能量。 革蘭染色的原理(二)細(xì)胞膜（cell membrane）252。 G中脂多糖LPS的結(jié)構(gòu)：類脂A（內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ)，致熱作用）+核心多糖+多糖O抗原。脂類含量少，1%~4%多，11%~22%）252。 ◆溶菌酶處理后的菌細(xì)胞應(yīng)保存在弱高滲（ ）蔗糖液中。復(fù)染色法：初染、脫色、復(fù)染（鑒別