人的外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(編輯修改稿)
2025-08-28 12:32 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 4d， 沉淀物逐漸變得干硬 。 將沉淀物研磨成粉末 ， 以 ％ NaCl液配成 1％ 的溶液 ， 此 PHA溶液經(jīng)細(xì)菌濾器過濾后分裝在小瓶中 ， 冰凍保存 。 使用時每 5ml培養(yǎng)物加 可 。 如果在得到沉淀物后的干燥及研磨等過程中充分保持滅菌操作 ， 那么配成的 PHA溶液便無需用細(xì)菌濾器過濾 。 三、實(shí)驗(yàn)材料： (5)抗菌素 青霉素 (以每瓶 40萬 U為例 ): 以 4ML生理鹽水 (或培養(yǎng)基 )稀釋 ， 則每 ML含 10萬 U。 取 1ml加入 100ml培養(yǎng)基中 ， 則最終濃度為 100U／ ml。 鏈霉素 (以每瓶 50萬 U為例 )：以 2ml生理鹽水 (或培養(yǎng)基 )稀釋 ， 則每 ml含 25萬 U。 取 (含 10U)加入 1000ml培養(yǎng)基中 ， 則每 ml 含 100U( 即 100μg) 。 (100 萬 U=lg ，lg=1 106μg)。 (6)姬姆薩染液： ，加 33ml純甘油，在研缽中研細(xì)，放在 56℃ 恒溫水浴鍋中保溫 90min，再加入33ml甲醇，充分?jǐn)嚢?，用濾紙過濾，收集在棕色細(xì)口瓶中保存，作為原液。用時以磷酸緩沖液 ()1： 10稀釋。 三、實(shí)驗(yàn)材料： (7)／ L磷酸緩沖液： — A. Na2HPO412H20 KH2PO4(無水 ) 溶解于 1000ml雙蒸水中 。 B. Na2HPO47H20 NaH2PO42H20 溶解于 1000ml雙蒸水中 。 四、操作步驟： 1． 培養(yǎng)液的分裝： 在無菌室或接種罩內(nèi) ， 用移液管將培養(yǎng)液和其它各試劑分裝入培養(yǎng)瓶 ， 每瓶量為： 培養(yǎng)液 (RPMIl640或 M199) 4ml 小牛血清 lml PHA 肝
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