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正文內(nèi)容

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法(編輯修改稿)

2025-05-29 06:18 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 。 囊內(nèi)是微小培養(yǎng)環(huán)境,與液體培養(yǎng)相似,能保護(hù)細(xì)胞少受損傷,故細(xì)胞生長好、密度高。 ③ 結(jié)團(tuán)培養(yǎng): 利用細(xì)胞本身形成結(jié)團(tuán)的特點(diǎn),相互結(jié)團(tuán)后再用懸浮的方法培養(yǎng),操作簡便,節(jié)省了用于微載體的成本 。 二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式 分批式操作 將細(xì)胞和培養(yǎng)基一次性加入反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),此后細(xì)胞不斷增長,產(chǎn)物不斷形成和積累,最后將條件培養(yǎng)基,即經(jīng)培養(yǎng)已含有細(xì)胞產(chǎn)物的培養(yǎng)基,或連同細(xì)胞一并取出,培養(yǎng)結(jié)束。 另一種是先將細(xì)胞和培養(yǎng)基加入反應(yīng)器,待細(xì)胞生長至一定密度后,向反應(yīng)器內(nèi)加入誘導(dǎo)劑或病毒等,經(jīng)一段時(shí)間作用后,將反應(yīng)物取出。 半連續(xù)式操作 當(dāng)細(xì)胞和培養(yǎng)基一起加入反應(yīng)器后,在細(xì)胞增長和產(chǎn)物形成過程中,每間隔一段時(shí)間,取出部分培養(yǎng)物,或單純是條件培養(yǎng)基,或連同細(xì)胞、載體一起,然后補(bǔ)充同樣數(shù)量的新鮮培養(yǎng)基,或另加新鮮載體,繼續(xù)培養(yǎng)。 該操作方式在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和藥品生產(chǎn)中被廣泛采用,它的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,生產(chǎn)效率高,可長期進(jìn)行生產(chǎn),反復(fù)收獲產(chǎn)品,而且可使細(xì)胞密度和產(chǎn)品產(chǎn)量一直保持在較高的水平。 灌流式操作 當(dāng)細(xì)胞和培養(yǎng)基一起加入反應(yīng)器后,在細(xì)胞增長和產(chǎn)物形成過程中,不斷地將部分條件培養(yǎng)基取出,同時(shí)不斷地補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基。 細(xì)胞被固定,在取出部分條件培養(yǎng)基和補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基時(shí),細(xì)胞基本上都被保留在反應(yīng)器內(nèi)。 第六節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器 一、動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器的類型及 其基本結(jié)構(gòu) 攪拌式生物反應(yīng)器 氣升式生物反應(yīng)器 中空纖維式生物反應(yīng)器 透析袋或膜式生物反應(yīng)器 固定床或流化床式生物反應(yīng)器 機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器 ( 1)罐體的高徑比一般采用 : 1,利于增大與空氣的接觸面 ( 2)為防止攪拌產(chǎn)生的切力損傷細(xì)胞,攪拌速度慢,一般在 20100r/min ( 3)采用無氣泡通氣系統(tǒng),防止氣泡破裂時(shí)產(chǎn)生的應(yīng)力對(duì)細(xì)胞的損傷 ( 4)高密度、長時(shí)間培養(yǎng)以及提高反應(yīng)器的生產(chǎn)效率考慮,反應(yīng)器常常需要配備有進(jìn)出液體系統(tǒng),以便進(jìn)行灌流培養(yǎng),并有使細(xì)胞與培養(yǎng)基分離使細(xì)胞保留在反應(yīng)器內(nèi)的裝置。 氣升式生物反應(yīng)器 與攪拌式生物反應(yīng)器相比,具有剪切力小,混合均一,氧和營養(yǎng)的傳遞好,由于沒有了機(jī)械攪拌的結(jié)構(gòu),有利于設(shè)備的密封,降低了造價(jià)。高徑比一般在 10: 1左右。 中空纖維反應(yīng)器 由數(shù)百乃至數(shù)千根中空纖維集束組成的反應(yīng)器,纖維的材料為聚砜或丙烯共聚物,纖維壁厚為 50100?m,呈多孔性,內(nèi)層為超濾膜,內(nèi)腔直徑為200?m,兩端用環(huán)氧樹脂等材料將纖維粘和在一起,并使內(nèi)腔開口于外加的塑料圓筒,使形成兩個(gè)隔開的腔。 ? ①不能重復(fù)使用;②不能耐受高壓滅菌,需用環(huán)氧乙烷或其它消毒劑滅菌;③難以取樣檢測(cè)。 膜式生物反應(yīng)器
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