動物組織培養(yǎng)細胞培養(yǎng)的基本條(編輯修改稿)
2025-06-17 09:11 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 制度： 1）必須取得實驗室相關實驗技能考試合格方可進入層流凈化室； 2）在本室工作的實驗人員應嚴格遵守本室工作守則，外來人員在進入凈化室工作之前，必須接受培訓； 3）沒有經(jīng)過培訓的人員不得單獨進入凈化室工作； 4）進入凈化室后要保持安靜，不得大聲喧嘩。 安全制度： 1）層流凈化室內(nèi)必須注意安全用電； 2）謹慎使用酒精燈，不能在有明火的情況下加、換酒精； 3）實驗人員自覺維護室內(nèi)設備的安全使用，對室內(nèi)的儀器如 CO2孵箱等要經(jīng)常注意機器運轉(zhuǎn)情況，發(fā)現(xiàn)問題及時檢修或報告請人檢修； 4) 離開層流凈化室必須斷開必要的儀器電源； 5）對不符合層流凈化室安全規(guī)定的行為主動報告主管老師。 衛(wèi)生消毒制度： 1）一般情況下細胞間每日消毒一次（包括兩個緩沖間），方法為紫外線消毒（每次 30分鐘至 1小時）一次，另外每周用 10％乳酸在緊閉門窗下熏蒸３０分鐘； 2）實驗完畢應及時清理所用物品，注意臺面整潔； 3）及時清洗所用隔離衣，并高壓滅菌后存放于指定位置（每日一次）； 4）除實驗必須的用品外，其它物品不得帶入凈化室； 5）層流凈化室內(nèi)所用儀器及附屬設備均應在指定范圍內(nèi)使用，不得隨意轉(zhuǎn)移地點，以便他人順利使用； 6）層流凈化室實施值日生負責制，值班人員負責檢查室內(nèi)是否保持清潔整齊，督促違反規(guī)定者改正錯誤。 出入制度： 總體原則為進出凈化室應按次序開、關門，只有將前面打開的門關閉后才允許打開下一個門，出入線路絕對不能逆行，使緩沖間起到應有的作用。 1）層流凈化細胞培養(yǎng)室共有兩個緩沖間，進入每個緩沖間必須更換指定消毒的拖鞋； 2）穿戴好消毒的鞋、帽、口罩后不得逆行離開層流凈化室； 3）人流：打開細胞培養(yǎng)室外門，進入第一緩沖間，開燈，關閉細胞培養(yǎng)室外門 , 穿戴專用的潔凈隔離衣、工作鞋帽、口罩等；打開第一緩沖間內(nèi)側門，進入第二緩沖間，新潔爾滅泡手 1分鐘，烘干，關閉第二緩沖間外側門；打開第二緩沖間內(nèi)側門，進入層流凈化細胞培養(yǎng)室 , 關閉層流凈化細胞培養(yǎng)室外門。 4）物流：所有進出層流凈化細胞培養(yǎng)室的物品均應通過傳遞窗進行；物品進入層流凈化細胞培養(yǎng)室時，應先打開傳遞窗外側門，將物品放入傳遞窗，關閉傳遞窗外側門，打開紫外燈照射１５分鐘；人員進入層流凈化細胞培養(yǎng)室后，關閉紫外燈，打開傳遞窗內(nèi)側門，取出物品；物品出室次序與以上進室次序相反，但不需紫外線照射。 培養(yǎng)細胞生長的條件 ? 1 細胞的營養(yǎng)需要 ? 2 細胞的生存環(huán)境 ? 溫度 : 37 ℃ ， O2 ? CO2: 5%， CO2 +H2O ← →H 2CO3 ← →H + + HCO3 ? pH: ? 滲透壓 ? 3 無污染 ? 4 無毒 細胞培養(yǎng)用液的配制 水：新鮮配置的三蒸水或去離子水 平衡鹽溶液：無 Ca2+、 Mg2+的緩沖液 PBS： NaCl g
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