動(dòng)物組織培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的基本條(編輯修改稿)
2025-06-17 09:11 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 制度： 1）必須取得實(shí)驗(yàn)室相關(guān)實(shí)驗(yàn)技能考試合格方可進(jìn)入層流凈化室； 2）在本室工作的實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守本室工作守則，外來(lái)人員在進(jìn)入凈化室工作之前，必須接受培訓(xùn)； 3）沒(méi)有經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的人員不得單獨(dú)進(jìn)入凈化室工作； 4）進(jìn)入凈化室后要保持安靜，不得大聲喧嘩。 安全制度： 1）層流凈化室內(nèi)必須注意安全用電； 2）謹(jǐn)慎使用酒精燈，不能在有明火的情況下加、換酒精； 3）實(shí)驗(yàn)人員自覺(jué)維護(hù)室內(nèi)設(shè)備的安全使用，對(duì)室內(nèi)的儀器如 CO2孵箱等要經(jīng)常注意機(jī)器運(yùn)轉(zhuǎn)情況，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)檢修或報(bào)告請(qǐng)人檢修； 4) 離開(kāi)層流凈化室必須斷開(kāi)必要的儀器電源； 5）對(duì)不符合層流凈化室安全規(guī)定的行為主動(dòng)報(bào)告主管老師。 衛(wèi)生消毒制度： 1）一般情況下細(xì)胞間每日消毒一次（包括兩個(gè)緩沖間），方法為紫外線消毒（每次 30分鐘至 1小時(shí)）一次，另外每周用 10％乳酸在緊閉門(mén)窗下熏蒸３０分鐘； 2）實(shí)驗(yàn)完畢應(yīng)及時(shí)清理所用物品，注意臺(tái)面整潔； 3）及時(shí)清洗所用隔離衣，并高壓滅菌后存放于指定位置（每日一次）； 4）除實(shí)驗(yàn)必須的用品外，其它物品不得帶入凈化室； 5）層流凈化室內(nèi)所用儀器及附屬設(shè)備均應(yīng)在指定范圍內(nèi)使用，不得隨意轉(zhuǎn)移地點(diǎn)，以便他人順利使用； 6）層流凈化室實(shí)施值日生負(fù)責(zé)制，值班人員負(fù)責(zé)檢查室內(nèi)是否保持清潔整齊，督促違反規(guī)定者改正錯(cuò)誤。 出入制度： 總體原則為進(jìn)出凈化室應(yīng)按次序開(kāi)、關(guān)門(mén)，只有將前面打開(kāi)的門(mén)關(guān)閉后才允許打開(kāi)下一個(gè)門(mén)，出入線路絕對(duì)不能逆行，使緩沖間起到應(yīng)有的作用。 1）層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室共有兩個(gè)緩沖間，進(jìn)入每個(gè)緩沖間必須更換指定消毒的拖鞋； 2）穿戴好消毒的鞋、帽、口罩后不得逆行離開(kāi)層流凈化室； 3）人流：打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)室外門(mén)，進(jìn)入第一緩沖間，開(kāi)燈，關(guān)閉細(xì)胞培養(yǎng)室外門(mén) , 穿戴專用的潔凈隔離衣、工作鞋帽、口罩等；打開(kāi)第一緩沖間內(nèi)側(cè)門(mén)，進(jìn)入第二緩沖間，新潔爾滅泡手 1分鐘，烘干，關(guān)閉第二緩沖間外側(cè)門(mén)；打開(kāi)第二緩沖間內(nèi)側(cè)門(mén)，進(jìn)入層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室 , 關(guān)閉層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室外門(mén)。 4）物流：所有進(jìn)出層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室的物品均應(yīng)通過(guò)傳遞窗進(jìn)行；物品進(jìn)入層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室時(shí)，應(yīng)先打開(kāi)傳遞窗外側(cè)門(mén)，將物品放入傳遞窗，關(guān)閉傳遞窗外側(cè)門(mén)，打開(kāi)紫外燈照射１５分鐘；人員進(jìn)入層流凈化細(xì)胞培養(yǎng)室后，關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)傳遞窗內(nèi)側(cè)門(mén)，取出物品；物品出室次序與以上進(jìn)室次序相反，但不需紫外線照射。 培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的條件 ? 1 細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需要 ? 2 細(xì)胞的生存環(huán)境 ? 溫度 : 37 ℃ ， O2 ? CO2: 5%， CO2 +H2O ← →H 2CO3 ← →H + + HCO3 ? pH: ? 滲透壓 ? 3 無(wú)污染 ? 4 無(wú)毒 細(xì)胞培養(yǎng)用液的配制 水：新鮮配置的三蒸水或去離子水 平衡鹽溶液：無(wú) Ca2+、 Mg2+的緩沖液 PBS： NaCl g
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