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正文內(nèi)容

動物組織培養(yǎng)細胞培養(yǎng)的基本條(編輯修改稿)

2025-06-17 09:11 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 制度: 1)必須取得實驗室相關實驗技能考試合格方可進入層流凈化室; 2)在本室工作的實驗人員應嚴格遵守本室工作守則,外來人員在進入凈化室工作之前,必須接受培訓; 3)沒有經(jīng)過培訓的人員不得單獨進入凈化室工作; 4)進入凈化室后要保持安靜,不得大聲喧嘩。 安全制度: 1)層流凈化室內(nèi)必須注意安全用電; 2)謹慎使用酒精燈,不能在有明火的情況下加、換酒精; 3)實驗人員自覺維護室內(nèi)設備的安全使用,對室內(nèi)的儀器如 CO2孵箱等要經(jīng)常注意機器運轉(zhuǎn)情況,發(fā)現(xiàn)問題及時檢修或報告請人檢修; 4) 離開層流凈化室必須斷開必要的儀器電源; 5)對不符合層流凈化室安全規(guī)定的行為主動報告主管老師。 衛(wèi)生消毒制度: 1)一般情況下細胞間每日消毒一次(包括兩個緩沖間),方法為紫外線消毒(每次 30分鐘至 1小時)一次,另外每周用 10%乳酸在緊閉門窗下熏蒸30分鐘; 2)實驗完畢應及時清理所用物品,注意臺面整潔; 3)及時清洗所用隔離衣,并高壓滅菌后存放于指定位置(每日一次); 4)除實驗必須的用品外,其它物品不得帶入凈化室; 5)層流凈化室內(nèi)所用儀器及附屬設備均應在指定范圍內(nèi)使用,不得隨意轉(zhuǎn)移地點,以便他人順利使用; 6)層流凈化室實施值日生負責制,值班人員負責檢查室內(nèi)是否保持清潔整齊,督促違反規(guī)定者改正錯誤。 出入制度: 總體原則為進出凈化室應按次序開、關門,只有將前面打開的門關閉后才允許打開下一個門,出入線路絕對不能逆行,使緩沖間起到應有的作用。 1)層流凈化細胞培養(yǎng)室共有兩個緩沖間,進入每個緩沖間必須更換指定消毒的拖鞋; 2)穿戴好消毒的鞋、帽、口罩后不得逆行離開層流凈化室; 3)人流:打開細胞培養(yǎng)室外門,進入第一緩沖間,開燈,關閉細胞培養(yǎng)室外門 , 穿戴專用的潔凈隔離衣、工作鞋帽、口罩等;打開第一緩沖間內(nèi)側門,進入第二緩沖間,新潔爾滅泡手 1分鐘,烘干,關閉第二緩沖間外側門;打開第二緩沖間內(nèi)側門,進入層流凈化細胞培養(yǎng)室 , 關閉層流凈化細胞培養(yǎng)室外門。 4)物流:所有進出層流凈化細胞培養(yǎng)室的物品均應通過傳遞窗進行;物品進入層流凈化細胞培養(yǎng)室時,應先打開傳遞窗外側門,將物品放入傳遞窗,關閉傳遞窗外側門,打開紫外燈照射15分鐘;人員進入層流凈化細胞培養(yǎng)室后,關閉紫外燈,打開傳遞窗內(nèi)側門,取出物品;物品出室次序與以上進室次序相反,但不需紫外線照射。 培養(yǎng)細胞生長的條件 ? 1 細胞的營養(yǎng)需要 ? 2 細胞的生存環(huán)境 ? 溫度 : 37 ℃ , O2 ? CO2: 5%, CO2 +H2O ← →H 2CO3 ← →H + + HCO3 ? pH: ? 滲透壓 ? 3 無污染 ? 4 無毒 細胞培養(yǎng)用液的配制 水:新鮮配置的三蒸水或去離子水 平衡鹽溶液:無 Ca2+、 Mg2+的緩沖液 PBS: NaCl g
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