【文章內容簡介】 的依據(jù)。建議在早期非臨床藥代動力學研究時，進行藥物體外（如動物和人肝組織勻漿、原代肝細胞、肝S肝微粒體等）代謝試驗，以預測動物與人體體內代謝有無差異。7. 藥物代謝酶及轉運體研究藥物的有效性及毒性與血藥濃度或靶器官濃度密切相關。一定劑量下的血藥濃度或靶器官濃度取決于該藥物的吸收、分布、代謝及排泄過程（ADME），而代謝酶和轉運體是影響藥物體內過程的兩大生物體系，是藥物ADME的核心機制之一。因此，創(chuàng)新性藥物的研究開發(fā)應該重點關注藥物吸收和主要消除途徑的確定、代謝酶和轉運體對藥物處置相對貢獻的描述、基于代謝酶或轉運體的藥物藥物相互作用的評估等。體外試驗體系是評價藥物代謝酶和轉運體作用機制的有力手段，應結合體內試驗，綜合評價藥物的處置過程。非臨床ADME研究應主要采用人源化材料（如：人肝微粒體、肝S原代肝細胞及P450重組酶等），鑒定藥物是否是代謝酶的底物或抑制劑。P450同工酶之外的藥物代謝酶，如葡萄糖醛酸結合酶、硫酸轉移酶等，也應該在適當?shù)那闆r下進行評估。對細胞色素P450同工酶（CYP1ACYP2BCYP2CCYP2CCYP2C1CYP2DCYP3A4等）抑制的考察可以通過使用類藥性探針底物（Druglike Probe Substrate）完成。抑制試驗應該在酶動力學線性范圍進行，即探針底物藥物的濃度163。Km（米氏常數(shù)），抑制強弱通過IC50或Ki判斷。P450同工酶抑制試驗的思路與方法適用于其他藥物代謝酶和轉運體的研究評價。藥物對P450酶的誘導應該重點對人CYP3A4以及CYP1ACYP2B6進行評估。體外誘導試驗可運用人肝細胞多次給藥后相關mRNA表達和/或酶活性的變化進行評價。具有重要臨床意義的外排和攝入轉運體主要包括Pgp、BCRP、OATP1BOATP1BOATOAT3和OCT2等，建議針對這些轉運體進行研究。除此之外的其他轉運體研究，在必要時也可予以考慮。創(chuàng)新藥物非臨床ADME研究還應該考慮到代謝酶與轉運體之間的相互影響及潛在的相互作用、人特異性代謝產(chǎn)物的評估等。8. 物質平衡在臨床前和臨床早期階段，特別是毒性劑量和有效治療劑量范圍確定的情況下運用放射性標記化合物，可通過收集動物和人體糞、尿以及膽汁以研究藥物的物質平衡。這些研究能夠獲得化合物的排泄途徑和排泄速率等信息，而且有助于代謝產(chǎn)物的性質鑒定，并通過有限的數(shù)據(jù)比較它們的體內吸收和分布特點。通過體外和動物樣品中分離出的代謝產(chǎn)物有時可作為參比品用于臨床和非臨床的定量研究。同時，組織分布研究和動物膽管插管收集的膽汁能夠提供藥物的組織分布數(shù)據(jù)和明確膽汁清除特點。一般應采用放射性同位素標記技術研究物質平衡。有關試驗方法的介紹及相關考慮見附錄（二）?？紤]到每一個化合物及其代謝產(chǎn)物具有各自的理化特性，在開展不同化合物的同位素標記研究時對試驗方法作慎重的調整/修改是很有必要的。四、數(shù)據(jù)處理與分析應有效整合各項試驗數(shù)據(jù)，選擇科學合理的數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計方法。如用計算機處理數(shù)據(jù)，應注明所用程序的名稱、版本和來源，并對其可靠性進行確認。五、試驗結果與評價對所獲取的數(shù)據(jù)應進行科學和全面的分析與評價，綜合論述藥物在動物體內的藥代動力學特點，包括藥物吸收、分布和消除的特點；經(jīng)尿、糞和膽汁的排泄情況；與血漿蛋白結合的情況；藥物在體內蓄積的程度及主要蓄積的器官或組織；如為創(chuàng)新性的藥物，還應闡明其在體內的生物轉化、消除過程及物質平衡情況。在評價的過程中注意進行綜合評價，分析藥代動力學特點與藥物的制劑選擇、有效性和安全性的關系，從體外試驗和動物體內試驗的結果，推測臨床藥代動力學可能出現(xiàn)的情況，為藥物的整體評價和臨床研究提供更多有價值的信息。六、附錄（一）生物樣品分析方法的基本要求1. 基本概念生物樣品分析方法的基本參數(shù)包括：（1）準確度，（2）精密度，（3）特異性，（4）靈敏度，（5）重現(xiàn)性，（6）穩(wěn)定性?，F(xiàn)將相關的概念介紹如下：準確度：在確定的分析條件下，測得值與真實值的接近程度。精密度：在確定的分析條件下，相同基質中相同濃度樣品的一系列測量值的分散程度。特異性：分析方法測量和區(qū)分共存組分中分析物的能力。這些共存組分可能包括代謝產(chǎn)物、雜質、分解產(chǎn)物、基質組分等。靈敏度：生物樣品分析方法的靈敏度主要通過測定定量下限樣品的準確度和精密度來表征。重現(xiàn)性：不同試驗室間測定結果的分散程度，以及相同條件下分析方法在間隔一段短時間后測定結果的分散程度。穩(wěn)定性：一種分析物在確定條件下，一定時間內在給定基質中的化學穩(wěn)定性。標準曲線：試驗響應值與分析物濃度間的關系。應采用適當?shù)募訖嗪徒y(tǒng)計檢驗，用簡單的數(shù)學模型來最適當?shù)孛枋觥藴是€應是連續(xù)的和可重現(xiàn)的，應以回歸計算結果的百分偏差最小為基礎。提取回收率：分析過程的提取效率，以樣品提取和處理過程前后分析物含量百分比表示。定量范圍：包括定量上限（ULOQ）和定量下限（LLOQ）的濃度范圍，在此范圍內采用濃度響應關系能進行可靠的、可重復的定量，其準確度和精密度可以接受。生物基質：一種生物來源物質，能夠以可重復的方式采集和處理。例如全血、血漿、血清、尿、糞、各種組織等。基質效應：由于樣品中存在干擾物質，對響應造成的直接或間接的影響。分析批：包括待測樣品、適當數(shù)目的標準樣品和質控樣品的完整系列。一天內可以完成幾個分析批，一個分析批也可以持續(xù)幾天完成。標準樣品：在生物基質中加入已知量分析物配制的樣品，用于建立標準曲線，計算質控樣品和未知樣品中分析物濃度。質控樣品：即QC樣品，系指在生物基質中加入已知量分析物配制的樣品，用于監(jiān)測生物分析方法的重復性和評價每一分析批中未知樣品分析結果的完整性和正確性。2. 生物樣品分析方法的建立和驗證由于生物樣品取樣量少、藥物濃度低、內源性物質（如無機鹽、脂質、蛋白質、代謝產(chǎn)物）及個體差異等多種因素影響生物樣品測定，所以必須根據(jù)待測物的結構、生物基質和預期的濃度范圍，建立適宜的生物樣品分析方法，并對方法進行驗證。分析方法驗證分為全面驗證和部分驗證兩種情況。對于首次建立的生物樣品分析方法、新的藥物或新增代謝產(chǎn)物定量分析，應進行全面方法驗證。在其他情況下可以考慮進行部分方法驗證，如生物樣品分析方法在試驗室間的轉移、定量濃度范圍改變、生物基質改變、稀少生物基質（動物組織樣品）、證實復方給藥后分析方法的特異性等。應考察方法的每一步驟，確定從樣品采集到分析測試的全過程中，環(huán)境、基質、材料或操作上的可能改變對測定結果的影響。（1）特異性必須證明所測定的物質是預期的分析物，內源性物質和其他代謝產(chǎn)物不得干擾樣品的測定。對于色譜法至少要考察6個不同個體空白生物樣品色譜圖、空白生物樣品外加對照物質色譜圖（注明濃度）及用藥后的生物樣品（注明樣品來源基質、用藥后的時間）色譜圖。對于以軟電離質譜為基礎的檢測方法（LCMS、LCMS/MS等），應注意考察分析過程中的基質效應，如離子抑制等。（2）標準曲線與定量范圍根據(jù)所測定物質的濃度與響應的相關性，用回歸分析方法（如用加權最小二乘法）獲得標準曲線。標準曲線高低濃度范圍為定量范圍，在定量范圍內濃度測定結果應達到試驗要求的精密度