【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 物計(jì)算）。所以： c = α100/[α]tDl 方法：精密量取本品適量（約相當(dāng)于葡萄糖10g），置100mL容量瓶中，（10%或10%以下規(guī)格的本品可直接取樣測(cè)定），用水稀釋至刻度，搖勻，靜置10分鐘，測(cè)定旋光度。176。并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)，先用水校正零點(diǎn)，再將測(cè)定管（長(zhǎng)度為1dm）用供試溶液沖洗數(shù)次，緩緩注入供試溶液適量（注意勿使發(fā)生氣泡），置于旋光計(jì)內(nèi)檢測(cè)讀數(shù)，記錄旋光度，同法操作讀取旋光度3次，取3次的平均值作為樣品的旋光度。，即得100mL供試溶液中含有C6H12O6H2O的質(zhì)量（g）。測(cè)定后再用水核對(duì)零點(diǎn)，若零點(diǎn)變動(dòng)，應(yīng)重測(cè)。 四、注意事項(xiàng) 1． 旋光儀接通電源后需預(yù)熱5～20分鐘。每次測(cè)定前后應(yīng)用溶劑作空白校正。配制溶液及測(cè)定時(shí)，均應(yīng)調(diào)節(jié)溫度至20℃177?！妫ǔ碛幸?guī)定外）。供試溶液應(yīng)澄清，如顯渾濁或含有混懸的小粒，應(yīng)預(yù)先濾過，并棄去初濾液。測(cè)定管裝樣時(shí)應(yīng)注意光路中不應(yīng)有氣泡，使用后應(yīng)立即用水洗凈晾干，切勿用刷子刷，也不能用高溫烘烤。 2． 標(biāo)示量=規(guī)格=處方量——表示單位制劑內(nèi)（例如：每片，每丸、每毫升、每瓶等）所含主藥的量。 五、思考題1.　葡萄糖旋光度法測(cè)定含量時(shí)，為什么要加氨試液并放置后進(jìn)行測(cè)定？2.　實(shí)驗(yàn)二附錄1. 堿性酒石酸銅試液　(1)，加水使溶解成100mL。 (2)，加水使溶解成100mL。用時(shí)將兩液等量混合，即得。 2. 中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅵ E 旋光度測(cè)定法 平面偏振光通過含有某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時(shí)，能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。旋轉(zhuǎn)的度數(shù)，稱為旋光度。偏振光透過長(zhǎng)1dm并每1mL中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，在一定波長(zhǎng)與溫度下測(cè)得的旋光度稱為比旋度。測(cè)定比旋度（或旋光度）可以區(qū)別或檢查某些藥品的純雜程度，亦可用以測(cè)定含量。 本藥典系用鈉光譜的D線()測(cè)定旋光度，除另有規(guī)定外，測(cè)定管長(zhǎng)度為1dm(如使用其他管長(zhǎng)，應(yīng)進(jìn)行換算)，測(cè)定溫度為20℃。 測(cè)定旋光度時(shí)，176。并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)。將測(cè)定管用供試液體或溶液（取固體供試品，按各藥品項(xiàng)下的方法制成）沖洗數(shù)次，緩緩注入供試液體或溶液適量（注意勿使發(fā)生氣泡），置于旋光計(jì)內(nèi)檢測(cè)讀數(shù)，即得供試液的旋光度。使偏振光向右旋轉(zhuǎn)者（順時(shí)針方向）為右旋，以“＋”符號(hào)表示；使偏振光向左旋轉(zhuǎn)者(反時(shí)針方向)為左旋，以“－”符號(hào)表示。用同法讀取旋光度3次,取3次的平均數(shù)，照下列公式計(jì)算,　即得供試品的比旋度。 對(duì)液體供試品 對(duì)固體供試品 式中 [α]為比旋度； D為鈉光譜的D線； t為測(cè)定時(shí)的溫度； l為測(cè)定管長(zhǎng)度, dm； α為測(cè)得的旋光度； d為液體的相對(duì)密度； c為每100mL溶液中含有被測(cè)物質(zhì)的重量g（按干燥品或無(wú)水物計(jì)算）。 旋光計(jì)的檢定，可用標(biāo)準(zhǔn)石英旋光管進(jìn)行，讀數(shù)誤差應(yīng)符合規(guī)定。 【注意事項(xiàng)】 (1) 每次測(cè)定前應(yīng)以溶劑作空白校正，測(cè)定后，再校正1次,以確定在測(cè)定時(shí)零點(diǎn)有無(wú)變動(dòng)；如第2次校正時(shí)發(fā)現(xiàn)零點(diǎn)有變動(dòng)，則應(yīng)重新測(cè)定旋光度。 (2) 配制溶液及測(cè)定時(shí)，均應(yīng)調(diào)節(jié)溫度至20℃177?！?或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的溫度)。(3)供試的液體或固體物質(zhì)的溶液應(yīng)不顯渾濁或含有混懸的小粒。如有上述情形時(shí), 應(yīng)預(yù)先濾過，并棄去初濾液。實(shí)驗(yàn)三 異煙肼的溴酸鉀法含量測(cè)定一、目的要求 1. 掌握溴酸鉀法測(cè)定異煙肼含量的方法。 2. 掌握氧化還原滴定法的原理。 二、主要儀器與試劑 25mL滴定管，100mL容量瓶，25mL移液管，研缽，5cm20cm硅膠G薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備），層析缸，1. 異煙肼片（規(guī)格100mg）2. 溴酸鉀固體3. 硫代硫酸鈉滴定液()4. 丙醇5. 丙酮6. 鹽酸7. 乙醇制對(duì)二氨基苯甲醛試液（參見附錄）8. 甲基橙指示液（參見附錄）9. 碘化鉀固體10. 稀硫酸 11. 淀粉指示液12. 濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）13. 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）14. 1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄15，學(xué)生臨用時(shí)制備）15. 比色用重鉻酸鉀液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄3）16. 比色用硫酸銅液（參見實(shí)驗(yàn)一附錄4）三、實(shí)驗(yàn)方法、步驟 　　　異煙肼（Isoniazid ）（C6H7N3O，　FW＝） 本品為4吡啶甲酰肼。按干燥品計(jì)算，%~%。1． 性狀　本品為無(wú)色結(jié)晶，或白色至類白色的結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，味微甜后苦；遇光漸變質(zhì)。2. 檢查　溶液的澄清度與顏色　，加水10mL溶解后，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液（中國(guó)藥典2005版二部附錄Ⅸ B，參見實(shí)驗(yàn)一附錄15）比較，不得更濃；如顯色，與同體積的對(duì)照液（，加水稀釋至250mL）比較，不得更深。游離肼　取本品，加水制成每1mL中含50mg的溶液，作為供試品溶液。（相當(dāng)于游離肼50μg）的溶液，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅴ　B）試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μL與對(duì)照溶液2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3：2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15分鐘后檢視。在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。干燥失重　取本品，在105℃干燥至恒重，%（中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅷ　L，參見實(shí)驗(yàn)一附錄23）。3. 含量測(cè)定原理： 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（），置100mL量瓶中，加水適量，振搖使異煙肼溶解并稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液25mL，加水50mL、鹽酸20mL與甲基橙指示液1滴，用溴酸鉀滴定液（）緩緩滴定（溫度保持在18～25℃）至粉紅色消失。每1mL溴酸鉀滴定液（）。 四、注意事項(xiàng) 1. 指示劑褪色是不可逆的，滴定過程中必須充分振搖，以避免滴定劑局部過濃而引起指示劑提前褪色，可補(bǔ)加1滴指示劑以驗(yàn)證終點(diǎn)是否真正到達(dá)。 2. 過濾前必須充分振搖，使異煙肼完全溶解。 3. 過濾用漏斗、燒杯必須干燥，棄去初濾液。 五、思考題 。，對(duì)測(cè)定有何影響？實(shí)驗(yàn)三附錄 1. 中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅴ　B 薄層色譜法 薄層色譜法，系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開后，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法。 (1) 玻板 除另有規(guī)定外，用5cm20cm，10cm20cm或20cm20cm的規(guī)格,要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。 (2) 固定相或載體 最常用的有硅膠G、硅膠GF254 、硅膠H、 硅膠HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、 微晶纖維素F254等。 其顆粒大小,一般要求直徑為10～40μm。薄層涂布，一般可分無(wú)黏合劑和含黏合劑兩種，前者系將固定相直接涂布于玻板上, 后者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用10％～15％煅石膏(℃加熱4小時(shí))，混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液(％～％)適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻板上。也有含一定固定相或緩沖液的薄層。 (3) 涂布器 應(yīng)能使固定相或載體在玻板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。(4) 點(diǎn)樣器 同紙色譜法項(xiàng)下。 (5) 展開室 應(yīng)使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴(yán)密的蓋子，除另有規(guī)定外，底部應(yīng)平整光滑，應(yīng)便于觀察。 2.　操作方法 (1) 薄層板制備 除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,　去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（～），取下涂好薄層的玻板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。(2) 點(diǎn)樣 除另有規(guī)定外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。 (3) 展開 展開缸如需預(yù)先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封缸頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,～（切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中）,密封缸蓋,待展開至規(guī)定距離(一般為10～15cm),　取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。(4) 如需用薄層掃描儀對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。 薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及使用說(shuō)明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對(duì)照品在同一塊薄層上展開后掃描，進(jìn)行比較并計(jì)算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。2. 乙醇制對(duì)二氨基苯甲醛試液　取對(duì)二甲氨基苯甲醛1g，再加乙醇至100mL，即得。甲基橙指示液　 ，加水100mL使溶解，即得。變色范圍 ～（紅→黃）。3. 溴酸鉀滴定液 () KBrO3= →1000mL 【配制】 ，加水適量使溶解成1000mL，搖勻。 【標(biāo)定】 精密量取本液25mL，置碘瓶中， ，密塞，搖勻，在暗處放置5分鐘后，加水100mL稀釋，用硫代硫酸鈉滴定液()滴定至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液2mL，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。根據(jù)硫代硫酸鈉滴定液()的消耗量，算出本液的濃度，即得。室溫在25℃以上時(shí)，應(yīng)將反應(yīng)液及稀釋用水降溫至約20℃。4. 稀硫酸 取硫酸57mL，加水稀釋至1000mL，即得。％。 5. 淀粉指示液　，加水5mL攪勻后，緩緩傾入100mL沸水中，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2分鐘，放冷，傾取上層清液，即得。本液應(yīng)臨用新制。實(shí)驗(yàn)四 雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定復(fù)方制劑含量一、目的要求：掌握雙波長(zhǎng)分光光度法消除干擾的原理和波長(zhǎng)選擇原則。 掌握紫外標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法測(cè)定藥物含量及計(jì)算方法。 熟悉紫外分光光度儀的構(gòu)造和使用操作。 二、主要儀器與試劑 紫外分光光度儀，石英比色皿，100mL容量瓶，移液管1. 磺胺嘧啶對(duì)照品2. 甲氧芐啶對(duì)照品3. 復(fù)方磺胺嘧啶片4. 氫氧化鈉溶液 %5. 鹽酸溶液（9→1000）6. 冰醋酸三、實(shí)驗(yàn)方法、步驟 復(fù)方磺胺嘧啶片（Compound Sulfadiazine Tablets） 本品每片中含磺胺嘧啶（C10H10N4O2S）~；含甲氧芐啶（C14H18N4O3）~。處方 　　　　　　　 磺胺嘧啶　　400g　　　　　甲氧芐啶　　50g 制　成　1000片1. 原理： 復(fù)方磺胺嘧啶片系由磺胺嘧啶和甲氧芐啶組成的復(fù)方制劑。兩者在紫外區(qū)有較強(qiáng)的吸收（見圖25）。在鹽酸溶液（9→1000）中，磺胺嘧啶在308nm處有吸收，而甲氧芐啶在此波長(zhǎng)處無(wú)吸收，故可在此波長(zhǎng)處直接測(cè)定磺胺嘧啶的吸收度而求得含量。，308nm為參比波長(zhǎng)，測(cè)定甲氧芐啶在該兩波長(zhǎng)處的ΔA（ΔA=A277nmA308nm）值來(lái)計(jì)算含量。 2. 測(cè)定步驟： 磺胺嘧啶 取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（），置100mL量瓶中，%氫氧化鈉溶液適量，振搖使磺胺嘧啶溶解，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2mL，置另一100mL容量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄Ⅳ A），在308nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另取105℃干燥至恒重的磺胺嘧啶對(duì)照品適量，精密稱定，加鹽酸溶液（9→1000）溶解并定量稀釋制成每1mL中約含40μg的溶液，同法測(cè)定；計(jì)算，即得。 甲氧芐啶 精密稱取上述研細(xì)的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于甲氧芐啶40mg），置100mL容量瓶中，加冰醋酸30mL振搖使甲氧芐啶溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；，分置100mL容量瓶中，各加冰醋酸30mL溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，前者作為對(duì)照品溶液（1），后者濾過，取續(xù)濾液作為對(duì)照品溶液（2）。精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液（1）、（2）各5mL，分置100mL容量瓶中，各加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法測(cè)定。取對(duì)照品溶液（2）的稀釋液，（）選擇等吸收點(diǎn)波長(zhǎng)為測(cè)定波長(zhǎng)（λ2），