農藥殘留快速檢測doc(編輯修改稿)
2025-08-11 04:51 本頁面
【文章內容簡介】 了異硫氰酸熒光黃(FITC)，它既易與免疫球蛋白形成穩(wěn)定的結合物，又不影響抗體的活性，從而使得免疫熒光分析技術得到了迅速推廣，幾經改進簡化，又出現了吖啶橙免疫熒光法(AOFA)和熒光標記 A 蛋白(FITCSPA)檢測等方法。 化學化學發(fā)光免疫分析(CLIA)1977年，以色列Halmann等[15]通過探索非放射性免疫診斷技術，利用化學發(fā)光的基礎，先后將固相酶聯免疫法與化學發(fā)光法結合起來，建立了化學發(fā)光免疫分析法(CLIA)。CLIA 具有靈敏度高、特異性強、線性范圍寬、操作簡便、不需要十分昂貴的儀器設備等特點。CLIA 應用范圍較廣，既可檢測不同分子大小的抗原、半抗原和抗體，又可用于核酸探針的檢測。CLIA與放射免疫分析(RIA)、熒光免疫分析(IFA)及酶免疫分析(EIA)相比，具有無輻射、標記物有效期長并可實現全自動化等優(yōu)點。CLIA 為獸醫(yī)、醫(yī)學及食品分析檢測和科學研究提供了一種痕量或超痕量的非同位素免疫檢測手段?；瘜W發(fā)光免疫分析法根據標記物的不同可分為三大類，即化學發(fā)光免疫分析、化學發(fā)光酶免疫分析和電化學發(fā)光免疫分析法。不同化學發(fā)光物質的發(fā)光機理和發(fā)光性能不同。不同類型的化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)原理和方法各異，都要求方法、儀器、試劑三位一體，故在研究和生產上的應用難度較大。盡管如此，CLIA 在近 10 年來仍得到迅速發(fā)展，在很多環(huán)境監(jiān)測研究中得到應用。但這種分析方法在農藥快速檢測中尚未得到廣泛應用。生物傳感器是將生物分子識別元件（敏感元件）和信號轉換元件（換能器）緊密結合，從而檢測目標化合物的分析裝置。其基本原理為：待測物質和分子識別元件特異性結合，發(fā)生生物化學反應，產生的生物學信息通過信號轉換器轉化為可以定量處理的電、光等信號，再經儀表放大和輸出，從而達到分析檢測的目的。 酶生物傳感器（enzymesensor）酶傳感器是發(fā)展最早，也是目前最成熟的一類生物傳感器。它是在固定化酶的催化作用下，生物分子發(fā)生化學變化后，通過換能器記錄變化從而間接測定出待測物濃度。此類傳感器中以乙酰膽堿酯酶(AChE)的催化活性為基礎的抑制型酶電極和有機磷水解酶(OPH)為基礎的直接酶電極已大量用于有機磷的檢測[1618]。為了提高乙酰膽堿酯酶生物傳感器的靈敏度，使其更有效地應用于有機磷農藥的快速檢測，可以選擇雞腦中的乙酰膽堿酯酶作為此類生物傳感器的酶源[19]。（immunosensor）免疫傳感器是利用抗原和抗體之間的高度特異性，將抗原或抗體結合在生物敏感膜上，來測定抗體或抗原的濃度。免疫生物傳感器包括三個基本部分，固定有抗原或抗體的基體的生物芯片部分，將抗體與被測物特異性結合產生的光、熱、壓力等物理化學信號轉換為電信號的轉換器部分，以及將轉換器產生的電信號進行放大和數字化的電部分。在農藥檢測中應用的轉換器有光學轉換器（如折射儀或反射儀）、電化學轉換器（電阻、電流、電壓）、聲波轉換器和壓力轉換器等[20]。許園園等[21]制備的一種以金為電極根據抗體與抗原之間特異反應前后電極電位的變化定量測定甲基對硫磷的免疫傳感器，—15μg/ml，并可以再生、重復利用。分子印跡技術（molecular imprinting）使為獲得在空間結構和結合點位上與某一分子（通常稱為模板分子）完全匹配的聚合物的實驗制備技術。其制備過程是先用功能單體和模板分子以共價鍵或非共價鍵形成復合物，再加入交聯劑、引發(fā)劑和有機溶劑，在一定的條件下聚合，使之生成聚合物，最后通過洗脫的方法，將模板分子從聚合物中除去，這樣就在聚合物上留下了和模板分子在空間結構、結合點位完全匹配的三維空穴，這個三維空穴可以重新專一地、高選擇地再和模板分子結合，從而使改聚合物對模板分子具有專一的識別功能[22]。分子印跡聚合物（molecular imprinting polymers，MIPs）是分子印跡技術的核心，國內就分子印跡聚合物的制備進行了相關研究[23]，為分子印記技術在這些農藥品種的殘留檢測奠定了理論基礎。分子印跡聚合物具有特異的選擇性和親和力，可以為樣品中農藥殘留的分析提供方便，在樣品前處理上應用研究最多，形式主要為特異性固相萃取[21, 22]和膜分離[24]，農藥中研究最多的是三嗪類[25]?？偟膩碚f，分子印跡技術在農藥殘留檢測中的應用還處于起步發(fā)展階段，其核心技術——分子印跡聚合物的制備技術尚未成熟和標準化，
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