【文章內(nèi)容簡介】 AFU：AFU是溶酶體酶，其作用是分解巖藻糖甘油結(jié)合物。血清αL巖藻糖苷酶（AFU)是肝細胞肝癌診斷的一個新標記物。在甲胎蛋白（AFP)陰性的原發(fā)性肝癌病例中，大約有70％～85％出現(xiàn)AFU陽性結(jié)果，而且小細胞肝癌病人血清AFU的陽性率高于AFP。同時測定AFU與AFP，可使原發(fā)性肝癌的陽性檢出率從單獨測定AFP的70％左右提高到90%～94％。因此，檢測血清AFU活性，對肝癌的早期診斷和肝癌高發(fā)人群的篩查均有重要意義。檢驗原理:2氯4硝基苯酚αL巖藻吡喃糖苷在酶的水解作用下生成2氯4硝基苯酚和αL巖藻糖，可用速率法監(jiān)測2氯4硝基苯酚，405nm波長處的吸光率的上升速率。反應(yīng)速率與αL巖藻糖苷酶的含量成正比，可計算出樣本中αL巖藻糖苷酶的活力。 5’核苷酸5’NT：5’NT是一種特殊的水解酶。能特異性的將次黃嘌呤核苷酸水解為次黃苷和磷酸，此酶廣泛分布在人體和動物的組織中，5’NT經(jīng)肝細胞膜進入膽汁，隨之進入血清中 ，是檢測肝膽疾病的重要指標。肝內(nèi)外膽管阻塞，肝癌和伴隨循環(huán)轉(zhuǎn)移的乳房切除術(shù)后的病人此酶升高明顯。診斷肝膽疾病和肝癌，5’NT較其他酶類更敏感。檢驗原理：次黃嘌呤核苷酸+H2O 5’NT 次黃苷+磷酸次黃苷+磷酸 核苷酸磷酸化酶 次黃嘌呤+核酸1磷酸次黃嘌呤+2 H2O+2 O2 黃嘌呤氧化酶 尿酸+ 2H2O22H2O2+EHSPT+4AA POP 4H2O+紅色醌類 腺苷脫氨酶ADA：ADA活性是反映肝損傷的敏感指標，可作為肝功能常規(guī)檢查項目之一，與ALT或GGT(γGT)等組成肝酶譜，能較全面地反映肝臟病的酶學(xué)改變。血清中ADA活性的測定可①用于判斷急性肝損傷及殘留病變；②協(xié)助診斷慢性肝病；③有助于肝纖維化的診斷④有助于黃疸的鑒別：ADA在良惡性難辨的滲出液鑒別診斷上有重要價值。結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高。⑤此外，腦脊液ADA檢測可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷和鑒別診斷的重要指標，結(jié)核性腦膜炎ADA活性顯著增高，病毒性腦炎不增高，顱內(nèi)腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病稍增高。ADA檢驗原理:本方法原理反應(yīng)方程式如下：PNP腺苷 + H20 次黃苷+ NH3XOD次黃苷+ Pi 次黃嘌呤 + 1－磷酸核苷POD次黃嘌呤+ H20+2O2 尿酸+2H2O22H2O2+4AA+EHSPT 4H2O+醌(550nm) ADA酶解腺苷產(chǎn)生次黃苷，再應(yīng)用嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)酶解次黃苷產(chǎn)生次黃嘌呤，然后通過黃嘌呤氧化酶(XOD)的作用，生成H2O2，再在過氧化物酶(POD)作用下生成醌色素。通過測量550nm處吸光度上升的速度，計算ADA的活性大小。 膽堿酯酶CHE：膽堿酯酶可用于有機磷殺蟲劑和戰(zhàn)爭劑急慢性中毒的診斷。在病情嚴重的肝炎患者中，約有五分之四的病人膽堿酯酶降低至正常的60%，危重病人可降至正常的10%以內(nèi)，甚至完全缺乏。另外，慢性活動型肝炎、肝硬化均可導(dǎo)致膽堿酯酶活力下降。檢驗原理: 膽堿酯酶催化水解丁酰硫代膽堿酯酶形成膽堿酯酶和丁酸鹽。黃色三價鐵氰化鉀轉(zhuǎn)化為無色二價亞鐵氰化鉀，吸光度降低程度與樣本中膽堿酯酶活性成正比關(guān)系。 單胺氧化酶MAO：單氨氧化酶廣泛存在于體內(nèi)各組織中，以肝、腎、腦等組織為最多，臨床上常用來觀察肝臟纖維化的程度。據(jù)報道，在腹腔鏡觀察下肝臟表面的結(jié)節(jié)形成與單氨氧化酶活性相平行，80%以上的肝硬化單氨氧化酶增高。急性肝炎或暴發(fā)性肝炎有壞死時，肝細胞線粒體大量破壞，單氨氧化酶血濃度上升。檢驗原理：基質(zhì)中的芐胺在血清單氨氧化酶（MAO）的作用下，生成氨，生成的氨在GLDH作用下與α酮戊二酸和輔酶反應(yīng)。通過測定輔酶吸光度下降的變化測定血清MAO的活性。 血氨AMM：血氨是正常體內(nèi)代謝產(chǎn)物。來源于腸道產(chǎn)氨、腎臟泌氨、肌肉產(chǎn)氨等。機體可通過合成尿素、谷氨酸、谷氨酰胺，以及經(jīng)腎臟排出、肺臟呼出清除多余的氨來保持體內(nèi)含量穩(wěn)定。肝功能衰竭時，肝合成尿素能力下降，或因門體側(cè)支循環(huán)，腸道產(chǎn)氨增多直接進入體循環(huán)，使血氨增高。增高：見于肝昏迷、重癥肝炎、肝腫瘤、休克、尿毒癥、有機磷中毒、先天性高氨血癥及嬰兒暫時性高氨血癥。 減低：見于低蛋白飲食、貧血等。檢驗原理：αKetoglutarate + NH4+ + NADH GLDH Glutamate + NAD+ + H2O本法測定血漿氨具有特異、簡便、快速等優(yōu)點。通過谷氨酸脫氫酶（GLDH）的作用，還原NADH成為NAD+，從而引起340 nm處吸光度的下降，反應(yīng)所產(chǎn)生的吸光度變化和樣品中氨的含量成正比。測定340 nm處的吸光度變化量，即可計算出樣品中氨的濃度。（9項） ：甘油三酯升高：是冠心病的誘因之一。可引起冠狀動脈粥樣硬化、心肌梗塞、糖尿病、原發(fā)性高血脂癥、肥胖癥、急性胰腺炎、膽道梗阻、極度貧血等。甘油三酯降低：有嚴重營養(yǎng)不良，脂肪消化吸收障礙，甲亢等。檢驗原理:甘油三酯經(jīng)酯酶水解被測定，生成的過氧化氫，4氨基安替比林和4氯酚在過氧化物酶催化下生成醌亞胺。有色物質(zhì)造成吸光度的改變與甘油三酯的濃度成正比。 ：長期的高膽固醇、高飽和脂肪和高熱量飲食，遺傳因素、缺少運動、腦力勞動、精神緊張等可使膽固醇升高；遺傳因素、甲亢、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病等可使膽固醇降低。檢驗原理:膽固醇經(jīng)酶水解和氧化被測定。在酚和過氧化物酶存在情況下，過氧化氫和4氨基安替比林形成有顏色的醌類物質(zhì)。 高密度脂蛋白膽固醇HDLC：高密度脂蛋白膽固醇被視為防止冠心病的一種保護性脂類成分，與低密度脂蛋白膽固醇一起對冠心病的危險因素進行評價。檢驗原理:乳糜微粒，極低密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇通過與抗人β脂蛋白抗體反應(yīng)被特異性消除和破壞，在過氧化氫酶作用下水解。剩余的高密度脂蛋白膽固醇在加入特異性的表面活化劑后經(jīng)膽固醇脂酶(CE)及膽固醇氧化酶(COD)等特異的酶促反應(yīng)被測定。通過對藍色結(jié)合物吸光度的測量對應(yīng)得出HDL的濃度。這種方法要比其它檢測方法更加特異。 低密度脂蛋白膽固醇LDLC：低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)被認為是導(dǎo)致冠心病(CHD）的脂質(zhì)成份,與高密度脂蛋白膽固醇(HDLC）同時檢測，用于冠心病的診斷和風險評估。檢驗原理:本檢測中第一步反應(yīng)通過酶反應(yīng)特異性去除乳糜微粒、極低密度脂蛋白和高密度脂蛋白膽固醇，保護LDL不與酶進行反應(yīng)。第一步：HDL、VLDL、CM +H2O + O2 表面活性劑 膽甾烯酮+脂肪酸+H2O2 2H2O2 過氧化物酶 2H2O+O2第二步：通過酶反應(yīng)和特殊的表面活性劑測定剩下的低密度脂蛋白膽固醇。通過對藍色結(jié)合物吸光度的測量，得出LDL的濃度。LDLC+H2O+O2 表面活性劑 膽甾烯酮+脂肪酸+H2O2H2O2+色原 過氧化物酶 有顏色的醌類物質(zhì)+H2O 載脂蛋白A1 APOA1：載脂蛋白的測定是評價心血管疾病危險因素的指標，對于發(fā)現(xiàn)和診斷載脂蛋白異常，研究載脂蛋白在脂類代謝和動脈粥樣硬化的發(fā)生有重要意義。ApoAⅠ(和ApoAⅡ一起)占HDL蛋白的80%90%，因此，血清中ApoAⅠ可以代表HDL水平，與HDLC呈明顯正相關(guān)。ApoAⅠ降低主要見于高脂血癥、冠心病、腦血管病、ApoAⅠ缺乏癥、家族性低α脂蛋白血癥、魚眼病等。檢驗原理:當樣品與緩沖液和抗體混合，樣品中的載脂蛋白A1與試劑中的抗人載脂蛋白A1抗體特異性結(jié)合,形成濁度增加，通過測定濁度的透光率判斷樣品中的載脂蛋白A1含量。 載脂蛋白B APOB ：載脂蛋白的測定是評價心血管病危險因素的指標，對于發(fā)現(xiàn)和診斷載脂蛋白異常，研究載脂蛋白在脂代謝和動脈粥樣硬化的發(fā)生有重要意義。ApoB是LDL的主要蛋白質(zhì)，因此，血清中ApoB 主要代表LDL水平，與LDL－C成顯著正相關(guān)。高ApoB是冠心病的危險因素，也是較好的動脈粥樣硬化標志物。銀屑病患者ApoB也可升高。檢驗原理:當樣品與緩沖液和抗體混合，樣品中的載脂蛋白B與試劑中的抗人載脂蛋白B抗體特異性結(jié)合,形成濁度增加，通過測定濁度的透光率判斷樣品中的載脂蛋白B含量。 脂蛋白（a）LP（a）：是含有獨自的載脂蛋白(a)的脂蛋白，脂質(zhì)組成結(jié)構(gòu)與LDL極其相似，密度位于低密度脂蛋白和高密度脂蛋白之間。1963年Berg發(fā)現(xiàn)Lp(a)時，因其病理意義不明，未被引起重視。1987年Mclean發(fā)現(xiàn)Lp(a)的一級結(jié)構(gòu)與纖溶酶原部分相同，作為動脈粥樣硬化的獨立因子越來越受到人們的重視。LP（a）水平的差異是由遺傳因素決定的，受生活方式影響并不大。血清中高濃度的LP（a）可用為動脈粥樣硬化和冠心病危險的一種有意義的指標。流行病學(xué)研究表明血清膽固醇正常，而血清脂蛋白（a）水平超過30mg/dl的人患冠心病的危險增加2倍。如果LDL和LP（a）水平同時升高其危險性增加8倍。檢驗原理：當樣品與緩沖液和抗體混合，樣品中的脂蛋白（a）與試劑中的抗人脂蛋白（a）抗體特異性結(jié)合, 生成不溶性的沉淀物，引起濁度的增加，通過測定濁度的透光率判斷樣品中的脂蛋白（a）含量。 游離脂肪酸NEFA：游離脂肪酸簡稱FFA，存在于人體內(nèi)的脂質(zhì)（lipid），它是熱量的直接來源：游離脂肪酸是中性脂肪分解成的物質(zhì)。當肌肉活動所需能源－－肝醣耗盡時，脂肪組織會分解中性脂肪成為游離脂肪酸來充當能源使用。所以，游離脂肪酸可說是進行持久活動所需的物質(zhì)。增高：常見于肥胖、肢端肥大癥、糖尿病、甲狀腺功能亢進、心肌梗死、嚴重肝病等。降低：常見于甲狀腺功能低下、艾迪生病、腦下垂體功能不全等。檢驗原理：游離脂肪酸和輔酶A在乙酰輔酶A合成酶的作用下反應(yīng)生成乙酰輔酶A。乙酰輔酶A在乙酰輔酶A氧化酶的作用下生成H2O2，隨后通過Trinder底物在過氧化物酶的作用下生成有色產(chǎn)物，546nm時紅色染料的吸光度與樣本中游離脂肪酸的濃度成正比。 磷脂PLIP ：人體所有細胞中都含有磷脂，它是維持生命活動的基礎(chǔ)物質(zhì)。磷脂對活化細胞，維持新陳代謝，基礎(chǔ)代謝及荷爾蒙的均衡分泌，增強人體的免疫力和再生力，都能發(fā)揮重大的作用。血清磷脂的增高見于糖尿病、腎病綜合癥、慢性出血性貧血、肝硬化、肝壞死、膽道阻塞、甲狀腺功能減退、原發(fā)性高血壓、梅毒等；降低見于甲狀腺功能亢進、急性感染性發(fā)熱、營養(yǎng)不良性肝硬化等。檢驗原理：磷脂在磷脂酶D的作用下水解生成膽堿和磷脂酸，膽堿被膽堿氧化酶氧化生成過氧化氫，過氧化氫與4氨基安替比林、DAOS反應(yīng)生成藍色染料。此染料在600nm有最大吸收峰，吸收強度與血清中磷脂含量成正比。 (9項) 尿素UREA（GLDH）：血清尿素升高：正常生理狀況下的高蛋白飲食。病理狀況下的原因之一是由于尿素排泄減少，如腎功能損害引起的腎小球濾過率降低，結(jié)石、腫瘤、前列腺肥大引起的尿道或輸尿管阻塞使尿量排出減少，低血壓或腎血流減少所致的尿形成減少。病理狀況下另一原因是蛋白分解代謝的增加、可見于長期發(fā)燒、腎上腺皮質(zhì)類固醇分泌的增加、使用皮質(zhì)激素類藥物、胃或十二指腸出血。檢驗原理:本法為測定尿素的酶學(xué)方法，反應(yīng)式如下： 尿素+ 2H2O 脲酶 2NH4+ + CO2α酮戊二酸 + NH4+ + NADH GLDH L 谷氨酸+NAD++H2O 尿素和水在脲酶作用下生成氨和二氧化碳。產(chǎn)生的氨與α酮戊二酸鹽和NADH在谷氨酸脫氫酸（GLDH）催化下形成谷氨酸鹽和NAD+。其吸光度降低速率與尿素濃度成比例。 尿酸UA（雙試劑）: 血清中尿酸增高常見于痛風。另外核酸代謝增加的白血病多發(fā)性骨髓瘤、紅細胞增多癥等患者血清中尿酸亦常見增高；其次腎功能降低、鉛中毒、酒精中毒、腫瘤化療、放射治療后和妊娠毒血癥等均可使血清尿酸增高。血清尿酸的減少可見于服用可的松、雙香豆素、丙磺舒等藥物以后。檢驗原理:尿酸酶水解尿酸，產(chǎn)生的H2O2在過氧化物酶的催化下與3，5一二氯2羥基苯磺酸(DCHBS)和4氨基安替比林(4AAP)反應(yīng)，形成一種紫紅色醌亞胺。 肌酐CRE（苦味酸）: 肌肉中的磷酸肌酸變成肌酸后，再經(jīng)過脫水生成肌酐, 肌酐與肌肉組織有密切的關(guān)系，肌酐的生成量可作為判斷肌肉疾病的有用指標。另外，尿中肌酐的排泄量與肌肉總量成一定比例，不受飲食和尿量的影響，經(jīng)腎小球濾過后也不被腎小管重吸收，因此可用來檢測腎小球功能。腎臟疾病初期，一般血清肌酐濃度不升高。直至腎臟實質(zhì)性損害，如腎功能不全、尿毒癥和腎功能障礙引起血清肌酐濃度升高。檢驗原理:肌酐在堿性溶液中與苦味酸形成一種桔紅色絡(luò)合物。該絡(luò)合物的吸光度與樣品中肌酐濃度成正比。肌酐CRE（酶法）: 肌肉中的磷酸肌酸變成肌酸后，再經(jīng)過脫水生成肌酐,肌酐與肌肉組織有密切的關(guān)系，肌酐的生成量可作為判斷肌肉疾病的有用指標。另外，尿中肌酐的排泄量與肌肉總量成一定比例，不受飲食和尿量的影響，經(jīng)腎小球濾過后也不被腎小管重吸收，因此可用來檢測腎小球功能。腎臟疾病初期，一般血清肌酐濃度不升高。直至腎臟實質(zhì)性損害，如腎功能不全、尿毒癥和腎功能障礙才引起血清肌酐濃度升高。檢驗原理:反應(yīng)分兩步，在第一步，存在于標本中的內(nèi)源性肌酸被分解生成水，不對本反應(yīng)產(chǎn)生影響。樣本中的肌酐在各種酶的作用下生成紅色的醌色素，根據(jù)比色法測定醌色素的量，從而計算出肌酐的含量。 N乙酰 β 葡萄糖苷酶NAG : NAG是一種在糖蛋白降解代謝中起作用的溶酶體酶。尿中 NAG升高可明確顯示腎臟疾病，同樣可作為某些疾病的腎病監(jiān)測指標，如腎病綜合癥、血管球性腎炎、毒品引起的中毒性腎損害、糖尿病的腎病變、高血壓及尿路感染等。檢驗原理：NAG水解2甲氧基4（2’硝基）苯基2乙酰氨2去氧βD氨基葡萄糖苷（MNPG1cNAc）為2甲氧基4（2’硝基）苯酚。在堿性溶液中505nm波長處比色測定。 光抑素C CYSC: