【文章內(nèi)容簡介】 L 時，鱗莖鮮重達 g，增大倍數(shù)達 ；當蔗糖質(zhì)量濃度為 120g/L 時，形成的鱗莖最大，平均鮮重為 ，為對照的 倍，且鱗莖增大倍數(shù)達 ，而葉鮮重則相對減少。其結果表明，對于百合試管鱗莖誘導而言，培養(yǎng)基中蔗糖的濃度以 60 g/L 最佳，而蔗糖濃度為 120g/L 時最有利于鱗莖的膨大，蔗糖濃度為 90g/L 時對百合試管鱗莖的誘導及膨大均有顯著效果 [11]。李愛華等研究結果表明，不同蔗糖濃度增生鱗莖數(shù)量差異不顯著，而直徑表現(xiàn)出顯著差異。當蔗糖濃度≤50g/L 時，隨著蔗糖濃度的增大，增生鱗莖數(shù)增多，直徑也逐漸增大；當蔗糖濃度為 90 g/L 時，增生鱗莖數(shù)繼續(xù)增加，但直徑卻減?。欢斦崽菨舛葹?10g/L 時，增生鱗莖數(shù)較 90 g/L 有所減少，但鱗莖直徑增大很多 [10,27]。Merel LangensGerrits 對‘Star Gazer’研究發(fā)現(xiàn)，鱗莖重量隨著蔗糖濃度的增加而增加，而且鱗片本身重量也是隨著蔗糖濃度增加而增加 [14]。 對‘Star Gazer’研究發(fā)現(xiàn)，蔗糖濃度在 90g/L 時生成鱗莖的數(shù)量大于 60g/L，且很少有鱗莖生根和葉片 [25]。3 溫度對試管鱗莖生長的影響傅玉蘭等對接種用試管鱗莖預先給予 8℃的低溫處理，分別處理 10 d、20 d、30 d 和未經(jīng)低溫過程的對照組，接種于相同的培養(yǎng)基，經(jīng)過 1 個月的相同條件培養(yǎng)后，其試管鱗莖增殖率出現(xiàn)明顯差異。凡經(jīng)過 8℃低溫處理過的鱗莖均比對照組的增殖率高。其中，以處理 20 d 的試管鱗莖增殖率最高，達 %，明顯高于其他組。證明一定的低溫條件可提高百合鱗莖的生理活性，有利于促進其生長和增殖，低溫程度則以 8℃、20 d 效果最佳 [28]。Merel LangensGerrits 對‘Star Gazer’研究發(fā)現(xiàn)，25℃培養(yǎng) 12 周，15℃培養(yǎng) 2 周會誘導試管鱗莖在田間抽莖，15℃條件下延長培養(yǎng)時間對鱗莖抽莖沒有進一步促進作用。25℃培養(yǎng) 12 周后，把鱗莖從外植體上剝離放在潮濕的濾紙上，在 15℃條件下繼續(xù)培養(yǎng) 4 周，無法促進鱗莖抽莖，這說明培養(yǎng)基中某種養(yǎng)分或者外植體對鱗莖抽莖是必要的 [12]。王月芳等對蘭州百合研究表明高溫明顯抑制鱗片誘導再生苗形成，但對不定芽的發(fā)生有促進作用 [15]。 光照條件對試管鱗莖生長的影響傅玉蘭等研究結果表明，培養(yǎng)期間的光照強度和鱗莖增殖率并未呈現(xiàn)明顯的相關性。而且 1 500 lx 的光照強度和 2300 lx 的光照強度對百合試管鱗莖的增殖效果基本相同，對試管鱗莖增殖的影響比較微弱，在 500~2 300 lx 之間的光照強度范圍內(nèi)，光照強弱對試管鱗莖增殖的影響差異不明顯 [28]。朱旭東等對東方百合試管鱗莖進行低溫處理，隨著溫度的降低，鱗莖大小增長幅度也明顯下降，溫度低于 0℃時，鱗莖停止生長。其結果表明，東方百合試管鱗莖最佳保存溫度為1℃，但實際操作中可以選擇 5℃，適當繼代培養(yǎng)，可持續(xù)保存；從栽培后鱗莖的生長勢看，低溫處理對組培苗的生長有十分重要的影響，最有利于其生長的是 8 周、5℃，次之是 12 周、10℃，其他溫度都不太利于組培苗的生長 [29]。Lim 等的研究表明每天 16h 的光照可形成較多的小鱗莖，而連續(xù)黑暗培養(yǎng)可促進鱗莖的迅速長大 [30]。Park 等的研究表明對鱗莖生長最適宜的光周期和光照強度分別是 24h 的光照和 25005000 lux 的光照強度 [31]。Kumar 等研究認為鱗莖在連續(xù)的光照中比在黑暗中形成的數(shù)量多，連續(xù)的黑暗刺激了鱗莖鮮重，且再生的鱗莖都不產(chǎn)生葉片 [32]。4 百合鱗莖研究進展 百合休眠的概念休眠（dormancy ）是一個復雜的生理過程，它是指任何含有分生組織的植物結構其可見生長速度下降或暫停的現(xiàn)象，以利植物抵御外界干旱、低溫或高溫危害的一種狀態(tài)；是植物在進化中形成的一種對環(huán)境條件和季節(jié)性氣候變化的生物學適應和馴化的結果 [3336]。百合在離體培養(yǎng)過程中隨著培養(yǎng)時間的延長會逐漸進入休眠狀態(tài)，休眠后鱗莖的生長并不停止，休眠的誘導與生長原基的發(fā)育變化有關，休眠形成后鱗莖的生長原基只發(fā)育成鱗片，而不會發(fā)育成鱗片葉。通常將有生活力的百合試管鱗莖在未經(jīng)低溫處理的情況下種于田間，以它的萌發(fā)率作為休眠程度的的判斷標準，萌發(fā)率越高，說明休眠程度越淺，反之則越深 [33]。 百合鱗莖休眠形成的研究 蔗糖濃度對鱗莖休眠形成的影響趙海濤報道，Aguettazetal 等對 L. speciosum ，蔗糖濃度小于30g/L1 時，試管鱗莖休眠程度很淺，蔗糖濃度大于 30g/L1 時，百合試管鱗莖休眠程度與 30g/L1 時相似，高濃度蔗糖加深休眠可能是因為培養(yǎng)基中蔗糖濃度過高導致培養(yǎng)基中水勢下降，迫使試管鱗莖細胞失水形成逆境生理，從而形成脫落酸（ABA） ，ABA 進而促使鱗莖進入休眠狀態(tài) [33]。 激素對百合鱗莖休眠形成的影響目前人們普遍認為植物的休眠是由植物內(nèi)源激素所控制的，是內(nèi)源抑制物和促進物之間平衡的結果 [37]。Aung 的研究證實，各種鱗莖植物在鱗莖發(fā)育的特殊階段發(fā)生著與溫度相聯(lián)系的激素的出現(xiàn)含量變化，目前已經(jīng)提取出來并被證實的有：赤霉素、細胞分裂素、脫落酸、生長素和乙烯等 [38]。氟啶酮（Fluridone）是內(nèi)源脫落酸（Abscisic acid，ABA）合成的抑制劑。在百合組培的試驗中發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中加入脫落酸不影響組培小鱗莖的休眠狀態(tài)，但加入氟啶酮可以有效抑制鱗莖的休眠，若同時加入脫落酸，F(xiàn)luridone 的這種作用會被逆轉，外源 ABA 在 15176。C、20176。C、25176。C 條件下不會促進休眠的形成，說明一定量的內(nèi)源 ABA 是休眠形成的必要因素 [39]。 具有鱗片葉的試管鱗莖內(nèi)源 ABA 含量要比不生鱗片葉的高，外植體中內(nèi)源 ABA 的5含量要比它上面著生的試管鱗莖的含量高，內(nèi)源 ABA 的含量隨著試管鱗莖的培養(yǎng)時間延長而增加，這種增加可能是從鱗片外植體的吸收而來的 [39]。. LangensGerrits 研究發(fā)現(xiàn)，ABA 在 20176。C 條件下會加深 ‘Star Gazer’, ‘C. King’ 和‘Snow Queen’的休眠，但對 L. speciosum Thunb 沒有作用。 ‘Star Gazer’在 15176。C 條件下，‘Snow Queen’在 30176。C 條件下都不形成休眠，在此條件下加入外源 ABA 對休眠沒有影響。說明，外源 ABA 只會加深由溫度引起的休眠，但是在不能誘導休眠形成的溫度條件下（‘Star Gazer’15176。C， ‘Snow Queen’30176。C）外源 ABA 對休眠沒有促進作用 [13]。 溫度對百合鱗莖休眠形成的影響溫度是誘發(fā)和控制休眠最重要的環(huán)境因素 [35]。對 L. speciosum Thunb 的研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)溫度對試管鱗莖休眠的形成有重要影響，15176。C 幾乎不會誘導休眠，25176。C會促進休眠加深 [40]。不同基因型百合，對溫度的感應并不相同。對溫度的不同反應，反映了不同基因型百合源產(chǎn)地的氣候差異，對 L. speciosum Thunb，鐵炮百合 L. longiflorum Thunb， ‘Star Gazer’， ‘’和 ‘Snow Queen’的研究發(fā)現(xiàn)，在 20℃、25℃時，試管鱗莖都會形成休眠，除此之外， ‘Snow Queen’在 15℃的低溫條件下也會形成休眠，且隨著溫度的升高休眠程度變淺， ‘’百合在 30℃的高溫條件下也會形成休眠。 ‘Star Gazer’逐漸進入休眠狀態(tài)（10 周） ， ‘Snow Queen’進入休眠很快（6 周） [41]。對 L. speciosum Thunb 的研究發(fā)現(xiàn)，鱗莖是逐漸進入休眠的，隨著培養(yǎng)時間的延長休眠程度逐漸加深，而且隨著溫度的升高鱗莖進入休眠的時間越快，在 25℃培養(yǎng) 4 周的試管鱗莖經(jīng)過低溫處理與未經(jīng)過低溫處理在田間的萌發(fā)率相同，但是隨著培養(yǎng)時間的延長，未經(jīng)低溫處理的鱗莖萌發(fā)率逐漸降低直至 0，在 20℃培養(yǎng)的鱗莖在 8 周后萌發(fā)率才達到最大值，在 15℃下培養(yǎng)的鱗莖萌發(fā)率從一開始就不斷增長，直到70﹪保持不變。從溫度和培養(yǎng)時間對休眠形成的影響看，百合試管鱗莖需要在 1520℃以上一定的熱量積累休眠才能形成 [4243]。 光照對百合鱗莖休眠形成的影響在自然條件下，多數(shù)植物的冬季休眠的誘導因子是短日照，短日照有利于冬季休眠的球根植株地下貯藏器官的形成，加速鱗莖進入休眠。光照對于休眠的作用主要發(fā)生在鱗莖的生長發(fā)育階段，在采收后的影響未見報道。部分學者研究了短日照誘導休眠的機理，可能是短日照下，葉片產(chǎn)生抑制物質(zhì)，并從葉片上轉移到鱗莖的生長點所導致的 [44]。6光照會影響 ‘Snow Queen’的休眠形成，光照 16h，黑暗 8h 要比黑暗條件下萌發(fā)率高得多（分別是 80﹪，58﹪ ） ，但光照對 L. speciosum Thunb 的休眠沒有影響 [13]。 百合鱗莖休眠解除的研究 植物生長調(diào)節(jié)劑對鱗莖休眠解除的影響一般認為在球根休眠導入過程中，抑制生長的激素增加，休眠解除過程中促進生長的激素增加。各類植物激素對于休眠的作用不是獨立的，他們之間表現(xiàn)出復雜的互作關系。在百合低溫貯藏期間，ABA、ZR 含量隨著貯藏溫度降低呈現(xiàn)為下降趨勢，GA 3 含量則呈現(xiàn)為上升趨勢，各種激素濃度的變化與與休眠的解除有密切的相關性 [4546]。孫紅梅通過對百合鱗莖低溫解除休眠中物質(zhì)代謝的相關性研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)源 ABA 是抑制頂芽不能萌發(fā)的主要因子。ABA 和 GA3 共同調(diào)節(jié)了百合鱗莖的休眠。3 種促進生長的內(nèi)源激素 GAABA、ZR 在低溫處理過程中都有升高過程，但ZR 和 IAA 對促進百合鱗莖萌發(fā)的貢獻率較小 [4751]。生長 14 周的試管鱗莖用赤霉素（GA 3）浸泡 4h，10 周后萌發(fā)率達到 88%，GA 3 處理后的鱗莖要比低溫處理的鱗莖提前 1 周萌發(fā)，比 Fluridone 處理的鱗莖提前 2 周萌發(fā)。低溫處理后的試管鱗莖會新形成白色鱗片，24 周后增重，但是經(jīng) GA3 和Fluridone 處理過的鱗莖雖然萌發(fā)，卻沒有新鱗片生成，老鱗片萎縮，干枯，鱗莖不增重。GA 3 有解除休眠的作用但是卻無法像低溫處理一樣使鱗莖內(nèi)的淀粉轉化成糖[13]。 低溫處理對百合鱗莖休眠解除的影響低溫處理是打破百合鱗莖休眠最有效的方法 [52]。研究認為，低溫是個外界環(huán)境信號，植物接受到信號誘導后進入休眠狀態(tài)，隨著低溫的積累，植物漸漸進入內(nèi)源休眠的中期，當?shù)蜏胤e累達到一定程度時，植物內(nèi)部產(chǎn)生一系列生理生化變化，進入休眠的后期，這些變化達到一定水平，植物便打破休眠開始生長 [5356]。楊琳等對‘白天使’ 、 ‘普瑞頭’ 、 ‘索邦’ 、 ‘西伯利亞’百合大鱗莖進行低溫處理發(fā)現(xiàn)，2℃只能延長種球的休眠，使種球一直保持處理前的生理狀態(tài)，但‘白天使’有萌芽現(xiàn)象。而 2℃既可打破休眠又可延長休眠，具有雙重效應，這取決于種球采挖時其內(nèi)部生理狀況，7℃只對打破休眠有效。15℃處理四種百合鱗莖均未萌發(fā) [57]。羅麗蘭等報道，在組織培養(yǎng)中，低溫（﹤15℃）下所形成的百合子鱗莖無休眠或休眠比較淺，而在較高溫度下組培形成的百合小鱗莖休眠程度較深 [52]。曹毅等研究表明，無論是組培獲得的百合鱗莖，還是種間雜交種的鱗莖，或者其他繁殖方法獲得的鱗莖，均7可在 0～13℃處理 30～110d 打破休眠 [58]。很多組織培養(yǎng)的作物都處于休眠狀態(tài)，球根作物在組織培養(yǎng)時產(chǎn)生的小鱗莖通常也處于休眠狀態(tài)，通過環(huán)境刺激通?？梢越獬菝?，1～10176。C 的低溫可以解除百合試管鱗莖的休眠 [59]。組培生產(chǎn)的小鱗莖，在不同低溫處理不同時間，小鱗莖萌發(fā)的數(shù)量、遲早差異很大，而且在同種低溫處理下，隨著處理時間的延長，萌發(fā)的時間也相應提前，整齊度也相應提高 [60]。在實際生產(chǎn)中，常利用低溫、變溫處理適當?shù)臅r間來打破百合鱗莖的休眠 [6163]。許多研究證明，鱗莖植物在低溫作用下，外觀上幾乎沒有形態(tài)和結構的變化，但鱗莖中發(fā)生著復雜的生理生化變化 [44]。百合鱗莖貯藏著大量的碳水化合物為以后生長所利用。在低溫作用下淀粉等貯藏態(tài)碳水化合物開始轉化，貯藏于0℃下的百合鱗莖積累更多的可溶性糖。當鱗莖貯藏于–1℃時，將有大量的蔗糖積累，而淀粉作為蔗糖合成的主要碳源，在貯藏過程中將相應得減少；貯藏于4℃時，鱗莖的碳水化合物改變較少，但其變化仍舊趨向于可溶性糖含量增加，淀粉含量減少 [6470]。在低溫處理期間，鱗莖內(nèi)發(fā)生“低溫糖化”作用，主要貯藏物質(zhì)，淀粉水解，而可溶性碳水化合物則累積增多 [7174]。，孫紅梅等以蘭州百合為材料，對不同貯藏溫度下不同部位的鱗片，進行淀粉的測定，并研究了其與鱗莖萌發(fā)之間的關系，發(fā)現(xiàn)鱗莖不同部位（內(nèi)層、中層、外層鱗片，鱗莖盤，短縮芽等）淀粉含量存在明顯差異；不同部位的鱗片的淀粉含量隨著貯藏時間的延長而下降，其中，中部鱗片在貯藏的101d內(nèi)下降了50％左右，同時，溫度越低，越有利于鱗片中淀粉的降解；貯藏67天后淀粉含量不再有明顯的變化 [55]。涂淑萍等研究得出，亞洲百合雜種系的‘黃寶貝’(Yellow Baby)，鐵亞雜交種系的‘達諾’(Ceb Dazzle)，東方百合雜種系的‘卡薩布蘭卡’(CasaBlanca)也有類似報道，發(fā)現(xiàn)它們在冷藏處理初期的37d，淀粉含量迅速下降，37d后淀粉含量變化比較平緩，并且期間都存在淀粉含量上升的過程 [50]。管畢財?shù)劝l(fā)現(xiàn)，龍牙百合在休眠過程中還原糖含量增加，在低溫處理40d時達到最大值，發(fā)芽后還原糖含量急劇下降 [7580]。從百合鱗莖不同部位來看，孫紅梅等發(fā)現(xiàn)，頂芽