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正文內(nèi)容

實驗四醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白(編輯修改稿)

2025-06-24 01:44 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 形成蛋白質(zhì)亞基 SDS膠束 。 SDS是陰離子 , 使多肽鏈帶上負電荷 , 該電荷量遠遠超過蛋白質(zhì)分子原有電荷量 , 掩蓋了不同蛋白質(zhì)之間的電荷差別 。 電泳遷移率主要取決于蛋白質(zhì)或亞基分子量的大小 。 SDSPAGE: 十二烷基硫酸鈉 聚丙烯酰胺凝膠電泳 作 用 ? 使蛋白質(zhì)成為亞基物質(zhì),形成蛋白質(zhì) SDS膠束,消除蛋白質(zhì)分子之間的電荷、形狀差異;橢圓棒狀,短軸均為 ,長軸正比于蛋白質(zhì)分子量。 ? MW在 15?200kDa,電泳遷移率與分子量對數(shù)呈線性關(guān)系。 ? logM=abRf, Rf為遷移率 醋酸纖維薄膜電泳 (CAME) ? 以醋酸纖維薄膜 (CAM)作支持物的一種區(qū)帶電泳技術(shù),將血清樣品點樣于醋纖膜上,在 泳,血清蛋白質(zhì)均帶負電荷移向正極。 ? 由于血清中各蛋白組分等電點不同而使表面凈電荷量不等,加之分子大小和形狀各異,因而電泳遷移率不同,彼此得以分離。 ? 電泳后, CAM經(jīng)染色和漂洗,可清晰呈現(xiàn) 清蛋白、α α β、 γ— 球蛋白 5條區(qū)帶。 人血清中常見蛋白質(zhì)的等電點和分子量 蛋白質(zhì) 等電點 分子量 正常參考值( %)
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