藥品檢驗(yàn)用菌種的傳代和保藏(編輯修改稿)
2025-06-22 18:20 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 藏法 ? 在小試管中放置菌懸液 ? 小試管在大試管中放置 ? 大試管在真空狀態(tài)下干燥 ? 密封大試管 28 液體直接干燥保藏法 ? 需要加入保護(hù)劑 ? 干燥之前不需凍結(jié) ? 在干燥過(guò)程中為增大蒸發(fā)面積，可加入多孔材料 ? 干燥后的容器應(yīng)熔封 29 蒸餾水保藏法 ? 最為簡(jiǎn)便的微生物保藏法 ? 微生物細(xì)胞或孢子保藏在蒸餾水中 ? 保藏的容器應(yīng)密封 ? 適于保藏 棒狀桿菌、土壤桿菌和假單孢菌等 30 液氮冰箱超低溫保藏法 ? 需專用設(shè)備－液氮超低溫冰箱 ? 菌懸液密封于安瓿管內(nèi)，控速凍結(jié) ? 國(guó)外已普遍采用 ? 保藏時(shí)間長(zhǎng) 31 凍結(jié)真空干燥保藏法 ? 歷史悠久，又稱凍干法 ? 不產(chǎn)生孢子只產(chǎn)生菌絲體的絲狀真菌不宜采用該法 ? 適用面廣 ? 保藏時(shí)間可達(dá) 10年以上 ? 多為菌種保藏機(jī)構(gòu)采用 32 凍結(jié)真空干燥保藏法 ? 密封性好，可避免保藏期間的污染 ? 保藏容器體積小，方便攜帶和貯藏 ? 保藏時(shí)間更長(zhǎng)，變異概率更低 33 普通微生物實(shí)驗(yàn)室適用的保藏技術(shù) ? 瓊脂斜面低溫保藏法 ? 液體石蠟保藏法 ? 低溫冷凍保藏法 ? 甘油冷凍保藏法 34 瓊脂斜面低溫 保藏法 ? 細(xì)菌置 4～ 6℃ 保藏，芽孢桿菌每 3～ 6個(gè)月移植一次，其他細(xì)菌每月移植一次。 ? 放線菌于 4～ 6℃ 保藏，每 3個(gè)月移植一次。 ? 酵母菌于 4～ 6℃ 保藏，每 4～ 6個(gè)月移植一次。 ? 絲狀真菌于 4～ 6℃ 保藏，每 4個(gè)月移植一次。 ? 擔(dān)子菌于 4～ 6℃ 保藏，每 3個(gè)月移植一次。 ? 保藏的濕度通常在 50％～ 70％為宜。 35 菌種保藏的一般規(guī)定 菌種 “ 代 ” 的確定： 2022版藥典規(guī)定，以干燥菌種管為第 “ 0”代，由此得到的第一批子代為第一代，以此類推。 菌種傳代次數(shù)規(guī)定： 2022版藥典規(guī)定不超過(guò) 5代。 菌種應(yīng)專人保藏、專柜貯藏，認(rèn)真做好登記，統(tǒng)一編號(hào)，按期傳代，并做好有關(guān)檢驗(yàn)記錄。 保存菌種傳代或凍干均應(yīng)填寫(xiě)專用記錄，菌種管上應(yīng)有標(biāo)簽，表明菌種編號(hào)、代次、批號(hào)、日期。 過(guò)期菌種應(yīng)及時(shí)處理、登記，經(jīng) 121 ℃ 30分鐘滅菌消毒。 36 實(shí)驗(yàn)室菌種傳代操作步驟 ? 接種前用 1： 1000新潔爾滅擦拭工作臺(tái)面，然后開(kāi)紫外燈消毒 30分鐘。 ? 自冰箱取出保存工作用菌種，室溫放置 20分鐘；溫度平衡后才能傳代。 ? 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入緩沖間，換鞋、穿無(wú)菌衣、戴口罩，用 1： 1000新潔爾滅溶液消毒雙手，并將培養(yǎng)基及菌種移入陽(yáng)性菌接種室。 ? 點(diǎn)燃酒精燈，將菌種管塞子，通過(guò)火焰轉(zhuǎn)動(dòng)使稍稍松動(dòng)，以免接種時(shí)粘著打不開(kāi)。 ? 接種操作：左手拿住菌種管，將管口靠近火焰旁，右手拿接種棒，將白金耳燒紅約 30秒，桿部通過(guò)火焰滅菌。挑取少量菌苔；另取 ，照上述方法在火焰旁打開(kāi)塞子，將白金耳伸入管內(nèi)斜面培養(yǎng)基的底部，從下到上將白金耳輕貼斜面培養(yǎng)基的表面作曲折移動(dòng)。 ? 接種后，將斜面置規(guī)定溫度、時(shí)間培養(yǎng)。取出觀察，菌種生長(zhǎng)良好，換橡皮塞，貼上標(biāo)簽，放入冰箱保存。 ? 細(xì)菌一個(gè)月傳代一次，枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、生孢梭菌、白
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