菌種的復蘇傳代及保存標準程序(編輯修改稿)
2025-08-11 02:50 本頁面
【文章內容簡介】 液在1~2月內使用，以減少反復操作的風險性。②為防止黑曲霉孢子的傳播，接種傳代時應關閉風機，近酒精燈操作。③若傳代的母代菌種為菌懸液，則用無菌吸管吹吸管內液體，取1～2滴滴在改良馬丁瓊脂斜面，用吸管涂布均勻，置23～28℃ 培養(yǎng)5～7日。④接種傳代時，改良馬丁斜面必須是干燥的，否則影響其孢子的形成。⑤接種傳代后，使用過的器具均需在121℃，30分鐘高壓滅菌后再作處理。：：凍干菌種（0代）復蘇后，可按上述方法制備第1代菌懸液、第2代菌懸液進行凍存。：日常使用的工作用菌種可用此法在短期內保存。（某些特殊菌種可用液體培養(yǎng)基）上，按規(guī)定的溫度和時間培養(yǎng)，待充分生長后，把培養(yǎng)好的新鮮菌種用牛皮紙包好，為減緩培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，延長保藏時間，可將菌種保藏管的棉花塞換成橡膠塞。放在4℃左右的冰箱中保藏。每隔 1個月移種一次，繼續(xù)進行保藏。：細菌、酵母菌、真菌保藏。：菌種培養(yǎng)基保存溫度傳種時間細菌一般多用營養(yǎng)瓊脂或根據菌種規(guī)定選用培養(yǎng)基4~6℃芽孢桿菌3~6個月其它細菌每個月酵母菌一般用麥芽汁瓊脂或麥芽汁酵母膏瓊脂4~6℃一般4~6個月絲狀真菌一般用PDA瓊脂、蔡氏瓊脂或麥芽汁瓊脂等。4~6℃每4個月移植一次（每2個月移植一次）：①保藏的菌種應是生命活力旺盛的新鮮培養(yǎng)物，至少應是第三代的培養(yǎng)物。 ②保藏時，破傷風桿菌可用庖肉培養(yǎng)基；生孢梭菌用流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基。③必須定期檢查保藏菌種冰箱的溫度、濕度以及菌種管的棉塞是否松動或生霉，如有異常應及時處理。④每次移植后，應與原菌種的編號、名稱逐一核對，確證培養(yǎng)基特征和純度無誤后再繼續(xù)保藏。⑤銅綠假單胞菌在冰箱中易發(fā)生菌體自溶而死亡，應在室溫下保存。 ：利用石蠟將培養(yǎng)物與空氣隔絕，以降低菌種的生理生化水平，并可防止水分蒸發(fā)，從而延長菌種的保藏期。：~ %瓊脂半固體高層培養(yǎng)基中，培養(yǎng)好備用。，每管10~15ml，加棉塞，瓶口包上紙，121℃高壓滅菌30min，取出置37℃溫箱或110~170℃烤箱中 1 ~ 2 h 或干燥器內除去液體石蠟中的水分。，液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基最上端 1 ㎝為宜，將試管直立，放入4℃冰箱中保藏。：適用于保藏部分霉菌，酵母菌和放線菌，對細菌保藏效果較差。 ：①保藏時，用新鮮培養(yǎng)物接種，應檢查純度和特征后，方可進行保藏。②保藏過程中，需經常觀察斜面是否干燥，如干燥，需重新移種。③使用菌種時，先將菌種管傾斜使液體石蠟流至一邊，再用接種針挑取培養(yǎng)物接種到新鮮斜面上培養(yǎng)，待長出新培養(yǎng)物后，再移種一次
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