正交法測(cè)幾種因素對(duì)酶活力的影響(編輯修改稿)
2025-06-12 12:01 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 行操作：表 2實(shí)驗(yàn)號(hào)試劑/mL1682493572%血紅蛋白液緩沖溶液pH7pH8pH9pH8pH9pH7pH9pH7pH837℃預(yù)溫5min50℃預(yù)溫5min60℃預(yù)溫5min酶液37℃反應(yīng)10min50℃反應(yīng)10min50℃反應(yīng)10min反應(yīng)10min后，各管均加入15%三氯乙酸溶液2mL終止反應(yīng)。另取試管一支做非酶對(duì)照，即加2%，先加15%TCA2mL。將上述酶促和非酶對(duì)照各管反應(yīng)液，室溫放置15min，過(guò)濾，濾液留待Folin酚法測(cè)定酶活力。Folin酚法測(cè)定酶活力：，加入試劑A 4 mL，室溫放置10min， mL，室溫靜置30min后，于680nm處測(cè)吸光度。五、注意事項(xiàng)應(yīng)確保酶促反應(yīng)的溫度及反應(yīng)時(shí)間的準(zhǔn)確性。為減少顯色反應(yīng)時(shí)間帶來(lái)的誤差，F(xiàn)olin試劑的加入順序和最后測(cè)定吸光度的順序應(yīng)保持一致，且間隔時(shí)間應(yīng)盡量相同。加入FolinB試劑后應(yīng)迅速搖勻，加一管搖一管，使還原反應(yīng)產(chǎn)生于磷鉬酸磷鎢酸試劑被破壞之前。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表 31[S]/ml2[E]/ml3溫度/℃4pH試驗(yàn)結(jié)果A650nm11 1 1 3
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1