基因克隆原核表達ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-08 07:22 本頁面
【文章內容簡介】 ? 長度鑒定：酶切、 PCR ? 方向鑒定：聯(lián)合酶切 ? 測序 原核基因表達系統(tǒng) 一 ． 表達系統(tǒng)： 基因工程中用來獲得有功能的異源蛋白質的體系 ， 包括克隆載體 ， 表達載體及受體細胞 。 據(jù)受體細胞的不同可分為： 1． 原核表達載體系統(tǒng) ： 將外源基因引入原核細胞 ， 并使其在原核細胞中以 發(fā)酵形式 快速高效地表達 、合成基因產物的體系 。 2． 真核表達系統(tǒng) ：使外源基因在真核細胞中表達的體系。 二 ． 原核生物基因結構和表達特點 1. 原核生物染色體 DNA是裸露的環(huán)形 DNA，其轉錄和翻譯是偶聯(lián)的連續(xù)進行。 2. 原核生物形成 多順反子 mRNA：mRNA在合成過程中和多個核糖體結合，翻譯形成多條肽鏈。 多順反子 mRNA（ polycistronic mRNA）：即可作為兩個或多個肽鏈翻譯模板的 mRNA 一般不含內含子（ intron），沒有轉錄及翻譯后加工系統(tǒng) 原核生物中功能相關的基因串聯(lián)在一起 ， 形成 操縱子 。 操縱子（ operon） ：是一組功能上相關，受同一調控區(qū)控制的基因組成的一個遺傳單位 ? 原核生物基因表達的基本單位 （ 即一個轉錄單位 ） 。 ? 共同協(xié)調作用 ， 完成某一多肽的表達調控 。 ? 包括：調控區(qū) (調節(jié)基因 ， 啟動基因 ， 操作基因 )、 結構基因： 原核生物中參與轉錄的基因結構： ? 啟動子 ? 終止子 啟動子 (promoter, P)是指能被 RNA聚合酶識別、結合并啟動基因轉錄的一段DNA序列。 ? 一般長 4060bp，富含 AT鹼基對 ? 共有保守序列： 10區(qū)（ pribnow box）： TATAAT 35區(qū)： ? RNA聚合酶識別并結合啟動子 ， 但并不開始轉錄 ? 各種啟動子啟動轉錄能力不同 。 ? 啟動子強弱取決于 35區(qū)和 10區(qū)的堿基組成及其間隔序列 終止子（ terminator， T） :位于基因 3’端 ,給予 RNA聚合酶轉錄終止信號的 DNA序列 ?富含 GC的反向重復序列
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1