基因組序列詮釋ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-03 00:16 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的蛋白質(zhì) . ? 蛋白質(zhì)組定義 廣義上是指某種細(xì)胞或組織中基因組表達(dá)的所有蛋白質(zhì) 。 狹義上 , 可以指不同時期細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的變化 . ? 蛋白質(zhì)組學(xué)定義 研究蛋白質(zhì)組結(jié)構(gòu)和功能的領(lǐng)域稱為蛋白質(zhì)組學(xué) . ? 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容 : 分析全部蛋白質(zhì)組所有成分以及它們的數(shù)量 。 確定各種組分所在的空間位置、修飾方法、互作機制、生物活性和特定功能等 蛋白質(zhì)組分析復(fù)雜性 ? 蛋白質(zhì)有許多加工方式 ,如磷酸化、糖基化、乙?；⒎核鼗?； ? mRNA 的可變剪接、程序性移碼和可控突變， 1個基因可編碼許多不同的蛋白質(zhì)，常常表現(xiàn)為組織特異性； ? 蛋白質(zhì)之間存在大量的相互作用，如形成同源或異源二聚體、三聚體或多聚體，不同的結(jié)合狀態(tài)有不同的活性； ? 1種蛋白質(zhì)可參與多種反應(yīng)，或多種蛋白質(zhì)參與 1種反應(yīng)。 蛋白質(zhì)組主要研究技術(shù)： 雙向電泳 生物質(zhì)譜技術(shù) 蛋白質(zhì)芯片 酵母雙雜交 雙向凝膠電泳 樣品制備 （包括蛋白質(zhì)的溶解、變性及還原，從而去除非蛋白質(zhì)雜質(zhì)等） → 第一向等電聚焦 （根據(jù)蛋白質(zhì)電荷差異進(jìn)行分離） → 第二向 SDSPAGE（以蛋白質(zhì)分子量差異為基礎(chǔ)） → 蛋白質(zhì)的檢測（用考馬斯亮藍(lán)、銀染、銅染等方法）→ 圖譜數(shù)字化分析 （圖象掃描、確定每個蛋白質(zhì)點的等電點和分子量，尋找差異蛋白） 蛋白質(zhì)組分析技術(shù) 主要蛋白質(zhì)組分析技術(shù)： 質(zhì)譜方法 蛋白質(zhì)序列分析 氨基酸組成分析 ? 質(zhì)譜技術(shù)的基本原理： 樣品分子離子化后，根據(jù)不同離子間質(zhì)核比（ m/z）的差異來分離并確定分子量。 ? 質(zhì)譜儀組成： 進(jìn)樣裝置、離子化源、質(zhì)量分析器、離子檢測器和數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)組成。 ? 質(zhì)譜技術(shù)在蛋白組研究中的應(yīng)用： A 肽質(zhì)譜和肽序列分析 蛋白質(zhì)經(jīng)雙向電泳后，分離到的蛋白質(zhì)被切割下來，進(jìn)行膠內(nèi)酶解，或轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，進(jìn)行膜上膜解，然后上樣進(jìn)行測序。 但目前質(zhì)譜法還不能夠取代 Edman降解法測序，可是其測定速度較快。 B 鑒定翻譯后修飾的蛋白質(zhì) 質(zhì)譜可通過特征離子監(jiān)測的方法很快確定磷酸化肽，通過串聯(lián)質(zhì)譜確定磷酸化位點； 質(zhì)譜可與蛋白酶解和糖苷酶酶解結(jié)合，尋找糖肽，鑒定糖基化位點； 質(zhì)譜還參與糖鏈組成、結(jié)構(gòu)甚至分支情況等的分析。 C 質(zhì)譜技術(shù)的其他作用 質(zhì)譜可對蛋白質(zhì)二硫鍵進(jìn)行定量和定位，分析蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用，蛋白質(zhì)與其他分子的相互作用，以及蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu) 等。 數(shù)據(jù)庫的建立是蛋白質(zhì)組研究的最重要的一個方面。 蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)庫包括： 蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫 質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫 雙向電泳圖譜數(shù)據(jù)庫 有關(guān)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的數(shù)據(jù)庫 與疾病相關(guān)蛋白質(zhì)研究的基本策略 蛋白質(zhì)組研究的目的 ? 建立蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò) ? 為人們了解生物體的各個生長、發(fā)育期的各個蛋白質(zhì)有機組成、
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