菌種的選育ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-30 05:09 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 不經(jīng)過人工處理 ,利用菌種的自然突變而進行菌種的篩選的過程 . 自然狀態(tài)下 ， 堿基對發(fā)生自然突變的機率為 108～ 109 自然突變有兩種情況 ： 一種是我們生產(chǎn)上所不希望看到的 ， 表現(xiàn)為菌株的衰退和生產(chǎn)質(zhì)量的下降 ， 這種突變成為負(fù)突變 。 另一種是我們生產(chǎn)上希望看到的 ， 對生產(chǎn)有利 ， 這種突變成為正突變 。 自然選育在工業(yè)生產(chǎn)上的意義 問題： 高產(chǎn)菌株是正突變高，還是負(fù)突變高？ 回復(fù)突變 ：高產(chǎn)菌株在傳代的過程中 ， 由于自然突變導(dǎo)致高產(chǎn)性狀的丟失 ， 生產(chǎn)性能下降 ， 這種情況我們稱為回復(fù)突變 自然選育雖然突變率很低 ， 但卻是工廠保證穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要措施 。 自然選育操作步驟： 一般習(xí)慣上將自然選育稱為菌種的分離純化 。 單細(xì)胞 (孢子 )懸液的制備 平板分離 挑選單菌落 (注意形態(tài)的觀察 ) 發(fā)酵試驗 誘變育種 用各種物理 、 化學(xué)的因素人工誘發(fā)基因突變進行的篩選 ，稱為誘變育種 誘變劑：能夠提高生物體突變頻率的物質(zhì)稱為誘變劑 誘變 劑 { 物理：紫外 ， 快中 子 化學(xué)：硫酸二乙酯 ， 亞硝基 胍 生物誘變劑 噬菌體 誘變育種的一般步驟見 (p38) 整個流程主要包括 :誘變和篩選 . 誘變育種中的幾個注意問題 出發(fā)菌株標(biāo)準(zhǔn) :產(chǎn)量高、對誘變劑的敏感性大、變異幅度大。 待處理的菌懸液應(yīng)考慮微生物的生理狀態(tài)、懸液的均一性和環(huán)境條件。一般要求菌體處于對數(shù)生長期，并采取一定的措施促使細(xì)胞處于同步生長 ,這樣有利于變異率提高得到很好的重現(xiàn)性。 出發(fā)菌株通常有三種 : ?從自然界分離得到的野生型 。 ?通過生產(chǎn)選育的菌株即自發(fā)突變選育 ?已經(jīng)通過誘變選育的菌株 . 對于不同出發(fā)菌株考慮采用不同的誘變劑進行處理 變異率與致死率有一定的關(guān)系 ,利用致死率作為劑量選擇的依據(jù) . 4. 變異菌株的篩選 初篩 : 總結(jié)變異的菌落“形態(tài)”特性和產(chǎn)量之間的關(guān)系 . 根據(jù)平皿反應(yīng)直接挑取高產(chǎn)菌株 : 平皿反應(yīng) :每個菌落產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基的指示物作用后的變色圈和抑制圈等等 . 常用方法 :紙片培養(yǎng)顯色法、透明圈法、瓊脂片法、濃度梯度法等等。 以上為產(chǎn)量型的篩選 營養(yǎng)缺陷型的篩選： 經(jīng)過誘變后，經(jīng)過中間培養(yǎng)，淘汰野生型、檢出營養(yǎng)缺陷型確定生長譜。 淘汰野生型的方法有：抗生素法、菌絲過濾法、差別殺菌法和饑餓法等，其目的是濃縮營養(yǎng)缺陷型。 營養(yǎng)缺陷型檢查方法：逐個測定法、夾層平板法、限量營養(yǎng)法等等。 出發(fā)菌株、誘變因素、篩選條件 物理、化學(xué)誘變劑的使用原理方法 ：有效波長 260nm左右；誘變條件，一般選擇 15W紫外燈，距菌（孢子）懸液 30cm左右，在黑暗或紅燈照射環(huán)境下進行。 作用機制：形成胸腺嘧啶二聚體以改變DNA生物活性，造成菌體變異甚至死亡。 2. 快中子 快中子的生物學(xué)效應(yīng)是由其撞擊原子核后產(chǎn)生的質(zhì)子產(chǎn)生的。 能夠引起較多的點突變和染色體變，而產(chǎn)生誘變育種的效應(yīng)。 (p40) 機理：氮芥的鹽酸鹽和碳酸氫鈉反應(yīng)釋放出氮芥子
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