總膽汁酸檢測ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-26 02:27 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 所有肝病中，餐后血清 TBA水平及異常率均比空腹時測定更靈敏，有人甚至認為餐后測定 TBA對各種肝病的診斷靈敏度和特異性高達 100%，而同時測定空腹血清膽汁酸有 40%的患者在正常范圍。急性肝炎是否轉(zhuǎn)為慢性，連續(xù)監(jiān)測餐后血清 TBA可以觀察慢性過程，慢性活動性肝炎是否發(fā)生纖維化改變，連續(xù)監(jiān)測餐后血清 TBA可以了解纖維化過程，不做肝活檢即可獲得肝損傷的程度。 酶比色法測定總膽汁酸 注意事項 ?由于血清中 TBA含量低，樣品中存在干擾物質(zhì)的影響相對就大，乳酸脫氫酶 (LD)是主要的干擾物質(zhì)，由 LD反應中生成的 NADH往往比 TBA反應中生成的量要大得多，因此測定前去除血清中 LD的影響至關(guān)重要，方法有：血清 67℃ 加溫 30min；加草氨酸作為LD的封閉劑；堿或酸處理；用丙酮酸鈉抑制 LD活性。上述 5種方法中丙酮酸鈉法最好，可免去前處理步驟，直接加入反應體系，不影響體系的 pH，且對反應無干擾。 ?血清中還存在其它脫氫酶 (有相應底物存在時 )和還原性物質(zhì)，如不除去，測定結(jié)果會偏高。據(jù)無選擇的 40例肝功能標本的測定結(jié)果來看，平均干擾相當于 TBA 18μmol/L ，范圍在 ～ 45μmol/L 之間。因此自動分析設(shè)計成雙試劑二步法，樣品先和不加3α HSD的體系孵育，使樣品中的干擾物質(zhì)先反應，然后再加入 3α HSD，啟動 TBA反應。 酶比色法測定總膽汁酸 注意事項 ?脂肪酶、膽固醇 (包括 HDLC、 LDLC)和甘油三酯測定試劑中均加有膽酸鹽，自動分析時會引起攜帶污染，必須引起注意。某些先進的儀器可以設(shè)定試劑針、樣品針和反應杯的補充清洗程序，亦可將 TBA編排在上述有污染的項目前測定。對某些不具備上述功能的儀器，最好將 TBA單批測定。 ?試劑中加適量表面活性劑可防止甲臢 沉淀。 酶比色法測定總膽汁酸 （ H) 【 方法學評價 】 ?1．手工法測定 TBA需做標本、標準的對照管，樣品和試劑用量大，試劑價格高，費用昂貴。分析儀測定能避免以上缺點，但去干擾能力不如手工法分析。 ?血清 TBA、尤其是正常血清 TBA濃度低，因而檢測靈敏度至為關(guān)鍵，本法測定TBA50μmol/L( 標本 /試劑比為 1： 10)的標準液， A500nm(1cm)為 。所以低濃度時重復性較差，對 31μmol/L 和157μmol/L 的樣品各 1份，用手工法每天上下午雙份測定，測 10天，結(jié)果總 CV分別為%和 %。本法線性上限為300μmol/L 。 循環(huán)法測定膽汁酸
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