【文章內容簡介】 型采用符合藥典標準的純化水或注射用水。當然淋洗最初階段，可以使用質量較低的水如飲用水。如由電腦按預定程序自動執(zhí)行的淋洗程序進行淋洗，淋洗的結果就比較安全可靠。從確保淋洗效果出發(fā)，應盡可能避免人工法對不同水質的切換——由操作者根據淋洗步驟選擇水質的方式。由于本步驟的目的是除去已溶解的低濃度的殘留物，并使殘留在設備上的水具有盡可能高的質量(最小的可溶性固體，最低的微生物污染水平)，在淋洗水的壓力、流速、淋洗持續(xù)時間及水溫等諸影響因素中，水溫的重要性相對下降。當然，較高的溫度有助于殘留水的揮發(fā)，并兼有一定的消毒作用。5．干燥根據需要決定是否進行干燥。除去設備表面的殘留水分可防止微生物生長，由于水膜有可能掩蓋殘留物，一定程度上有礙檢查。因此對于須暴露保存的設備，應進行干燥。但對于經過驗證的清潔程序，如果設備淋洗后要進行滅菌處理，或是采用高溫、無菌的注射用水淋洗后并保持密閉的設備則不一定要進行干燥處理。6．檢查通常經過驗證的清潔程序應保證清潔后的設備不殘留可見的殘余物。進行目檢可在發(fā)生意外時，仍能及時發(fā)現而采取補救措施，而不危及下批產品。因此在規(guī)程中可作出類似規(guī)定，如：目檢所有設備的表面，不得有殘余物。如發(fā)現殘余物，向工段長匯報以采取糾偏措施。7．儲存規(guī)定已清潔設備和部件的儲存條件和最長儲存時間，以防止再次污染。8．裝配應規(guī)定將被拆卸部件重新裝配的各步操作，附以圖表和示意圖以利于操作者理解。此外，要注意裝配期間避免污染設備和部件。三、清潔劑的選擇清潔劑應能有效溶解殘留物，不腐蝕設備，且本身易被清除。人用藥品注冊技術要求國際標準協調會(ICH)在“殘留溶劑指南”將溶劑分為3 個級別，對其使用和殘留限度有明確的要求。隨著環(huán)境保護標準的提高，還應要求清潔劑對環(huán)境盡量無害或可被無害化處理。滿足以上要求的前提下應盡量廉價。根據這些標準，對于水溶性殘留物，水是首選的清潔劑。從驗證的角度，不同批號的清潔劑應當有足夠的質量穩(wěn)定性。因此不宜提倡采用一般家用清潔劑，因其成分復雜、生產過程中對微生物污染不加控制、質量波動較大且供應商不公布詳細組成。使用這類清潔劑后，還會帶來另一個問題，即如何證明清潔劑的殘留達到了標準?應盡量選擇組成簡單、成分確切的清潔劑。根據殘留物和設備的性質，企業(yè)還可自行配制成分簡單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿溶液等。企業(yè)應有足夠靈敏的方法檢測清潔劑的殘留情況，并有能力回收或對廢液進行無害化處理。第三節(jié) 清潔驗證方案的準備參照物質或最難清潔物質、最難清潔部位和取樣部位，如何制訂驗證的合格標準即最大允許殘留清潔驗證方案必須符合一般驗證方案的共性要求。驗證方案中最關鍵技術問題為如何確定限度，用什么手段能準確地定量殘留量，這包括取樣方法和檢測方法的開發(fā)和驗證。一、參照物質與最難清潔物質一般藥品都由活性成分和輔料組成。對于復方制劑，含有多個活性成分。所有這些物質的殘留物都是必須除去的。在清潔驗證中是否需要為所有殘留物都制定限度標準并一一檢測呢?這是不切實際且沒有必要的。在一定的意義上，清潔的過程是個溶解的過程，因此，通常的做法是從各組分中確定最難清潔(溶解)的物質，以此作為參照物質。通常，相對與輔料，人們最更關注活性成分的殘留，因為它可能直接影響下批產品的質量、療效和安全性。因此活性成分的殘留限度必須作為驗證的合格標準之一。如當存在兩個以上的活性成分時，其中最難溶解的成分即可作為最難清潔物質論處。以復方18 氨基酸注射液為例，它有18 種氨基酸，均為活性成分。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其作為最難清潔物質。這樣一來，清潔驗證就找到了殘留的“參照物”而用不著為其他易溶組分操心。二、最難清潔部位和取樣點在討論如何確定最難清潔部位前，首先應當對清洗的機制有所了解。除手工擦洗主要依靠機械摩擦力將附著在設備表面的殘留物除去外，常規(guī)的清洗過程可從清洗液對殘留物的作用角度大致分為溶解、乳化和化學反應等不同的機制。不管何種機制，都存在殘留物與清洗液接觸、被潤濕、脫離設備表面等共同的過程。在此以使用最普遍的清洗機制——溶解為例詳細進行討論。以溶解為機制的清洗過程主要是通過溶劑(清洗液)對殘留物的溶解作用以及流動的清洗液對殘留物的沖擊而使附著在設備表面的殘留物進入溶劑中。微觀上看溶解的速度取決于單位時間內由溶質表面進入溶液的溶質分子數與從溶液中回到溶質表面的分子之差。一旦差值為零，表面溶解過程達到動態(tài)平衡，此溶液即為飽和溶液。溶解過程中從溶質表面很快形成一薄層飽和溶液，飽和溶液中的溶質分子不斷向溶液深處擴散，形成從溶質表面到溶液深處的一個遞減的濃度梯度。如果處于飽和層的溶質分子不能迅速進入溶液深處，就會降低溶解的速度。因此可以觀察到即使是溶解度很大的物質，如蔗糖的塊狀結晶(俗稱冰糖)在無攪拌的靜止狀態(tài)下的溶解速度是非常緩慢的。提高溶解速度的方法是使溶液流動以迫使溶質表面的飽和層離開。在清洗過程中，必須使清潔劑在運動中與殘留物接觸。清潔劑與殘留物的相對運動從宏觀上可分解為垂直方向和水平方向的運動。相對垂直的運動可將已溶解的物質迅速帶離溶質表面，而水平方向的相對運動根據流體力學的基本原理，可分為層流和湍流兩類情況(圖3－2)。層流指流體在導管中流動時，所有質點均沿著與管軸平行的方向流動。此時流體的速度在管道軸心處的速度最大，自軸心至管壁速度逐漸減以至等于零。由此可以推斷，如果清潔劑在待清洗設備中形成了層流，會很迅速地在殘留物表面形成一穩(wěn)定的飽和溶液層，殘留物的溶解速度會急劇下降，這與靜止狀態(tài)下的溶解過程非常相似，從而清潔效率也隨之明顯下降。因此在清潔中應避免層流的產生。流體以湍流形式流動時，雖然宏觀上流體沿管道向一個方向流動，但從微觀上看各質點的運動速度在大小和方向上都隨時發(fā)生變化?？傆胁糠仲|點的運動方向相對垂直于管軸或管壁。這樣殘留物表面再也不會形成穩(wěn)定的飽和層，溶解的速度就大大提高了，清潔的效率也隨之提高。因此，在清洗過程中，必須保證清潔液以湍流形式流動。流體以何種形式流動取決于流體雷諾準數Re 的大小。Re＝dwρ/μ式中，d 為管道直徑；w 為流速；ρ為流體的密度；μ為黏度。當Re＜2300 時，為層流；Re＞10 000 時，為湍流；2300＜Re＜10 000 時，為層流和湍流的過渡階段。Re 越大，表面湍流越劇烈，即質點運動方向和速率的變化越大，殘留物溶解的速度越快。在已確定清潔劑和淋洗液的情況下，Re 正比于管徑與流速的乘積：Re∝wd比較普遍的在線清洗過程都有清潔劑在泵的驅動下在設備與管道中循環(huán)的步驟。對已確定的系統(tǒng)，清潔劑的流量V 是固定的。根據液體的不可壓縮特性，在沒有平行管道和分叉的情況下，不管管徑如何變化，管內各點的流量必然相同。因V＝wS＝wπR2＝π/4wd2，其中 為管道截面積，則 ＝4/πV/ d2；則Re∝V/ d，如V 為定值，則R e∝ l/ d由此可知，在系統(tǒng)中，管徑較大的部位或管徑由小變大的部位R e值較小，相對容易發(fā)生層流，較難被清潔。對有多根平行管道尤其是管徑不同的系統(tǒng)，因各管道的流速變化、流量分配各不相同，通常將這些部位列為較難清潔的部位。此外，切不可忽視哪些似乎不直接接觸產品的部位，如復方氨基酸注射液配制系統(tǒng)一般需安裝防爆安全伐(膜)的歧管、排氣管、充氮管、抽真空管等。這些管道或由于投料時物料微粒的飛揚，或因為配制罐內霧化的小液滴隨充氮、抽真空等工藝過程四處飄散而可能被污染。有時這種污染很輕微，但如果清潔程序未能考慮這些管路，日積月累就可能產生嚴重的后果。綜合而言，凡是死角、清潔劑不易接觸的部位如帶密封墊圈的管道連接處，壓力、流速迅速變化的部位如有歧管或岔管處、管徑由小變大處、容易吸附殘留物的部位如內表面不光滑處等，都應視為最難清潔的部位。顯然，取樣點應包括各類最難清潔部位。乳化和化學反應的機制在微觀上與溶解過程相似，都有清潔劑分子作用于殘留物表面，使其表面的分子脫離或反應生成其他物質進而溶解，因此宏觀上不容易形成湍流的部位也是難清潔的部位。三、殘留物限度的確定如何確定殘留物限度是個相當復雜的問題，但卻是驗證方案無法回避，必須解決的問題。 FDA 在其《清潔規(guī)程驗證檢查指南》中指出：“FDA 不打算為清潔驗證設立一個通用方法或限度標準。那是不切實際的，因為原料和制劑生產企業(yè)使用的設備和生產的產品千差萬別，確立殘留物限度不僅必須對所有有關物質有足夠的了解，而且所定的限度必須是現實的、能達到和可被驗證的?！币簿褪钦f，鑒于生產設備和產品性質的多樣性，由藥品監(jiān)督機構設立統(tǒng)一的限度標準和檢驗方法是不現實的。企業(yè)應當根據其生產設備和產品的實際情況，制定科學合理的，能實現并能通過適當的方法檢驗的限度標準。目前企業(yè)界普遍接受的限度標準基于以下原則：① 分析方法客觀能達到的能力，如濃度限度——百萬分之十 (1010－6)；② 生物活性的限度，如正常治療劑量的l／1000；③ 以目檢為依據的限度，如不得有可見的殘留物。最后一項系半定量標準，是限度標準的補充。(一) 殘留物濃度限度1010－6－6 將殘留物濃度限度定為1010多為發(fā)達國家生產液體制劑如溶液、乳劑等劑型的企業(yè)采用。其要求是規(guī)定由上一批產品殘留在設備中的物質全部溶解到下一批產品中所致的濃度不得高于1010。對液體制劑而言，這就是進入下批各瓶產品的殘留物濃度。一般說來，除非是高活性、高敏感性的藥品，該限度是足夠安全的，因此，企業(yè)可進一步將其簡化成最終淋洗水樣品中－6殘留物的濃度限度為1010。驗證時一般采用收集清潔程序最后一步淋洗結束時的水樣，或淋洗完成后在設備中加入一定量的水(小于最小生產批次量)，使其在系統(tǒng)內循環(huán)后取樣，測定相關物質的濃度。實驗室通常配備的儀器如HPLC，紫外—可見分光光度計、薄層色譜等的靈敏度一般都能達到1010－6 －6以上，因此該限度標準不難被檢驗。從殘留物濃度限度可推導出設備內表面的單位面積殘留物限度(表面殘留物限度)，單位為μg／cm2。計算前需假設殘留物均勻分布在設備內表面上，在下批生產時全部溶解在產品中。設下批產品的生產批量為B(kg)，因殘留物濃度最高為1010－6，即10mg／kg，則殘留物總量最大為B1010－6＝10B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測總內表面積，設設備總內表面積為SA(cm2)，則表面殘留物限度L 為10B／SA(mg／cm2)；為確保安全，一般應除以安全因子F，即得L＝10B／(SAF) (mg／cm2)；如取安全因子F＝10，則L＝B／SA(mg／cm2)＝103B／SA(μg／cm2)。對于確定的設備，內表面積是定值，批量值應取最小批量，以獲取最差情況下的表面殘留物限度。根據上述推算過程得到的表面殘留物限度的前提是殘留物溶解到下批產品后均勻分配到各瓶／片產品中。實際生產中確實可能存在某些特殊表面，如灌封頭，殘留物溶解后并不均勻分散到整個批中，而是全部進入一瓶產品中。在這種情況下，上述限度就不適用了，必須為這些特殊部位制定特殊的限度。制定特殊表面限度的依據就是以最低日治療劑量為基礎的生物學活性的限度。(二) 生物學活性的限度——最低日治療劑量的l／1000依據藥物的生物學活性數據——最低日治療劑量(minimum treatment daily dosage, MTDD)確定殘留物限度是制藥企業(yè)普遍采用的方法。從確保安全的角度出發(fā)，一般取最低日治療劑量的l／1000 為殘留物限度的計算出發(fā)點